通脉胶囊抗血栓形成及抗凝作用实验研究
【摘要】 目的 探讨通脉胶囊抗血栓形成及抗凝作用。方法 以抗大鼠血栓实验检测本药抑制血栓形成的作用;以对小鼠凝血时间影响实验、对血小板聚集功能的影响实验测定本药的抗凝血、减轻血栓的作用。结果 本药具有明显抑制血栓形成的作用，使小鼠凝血时间明显延长，血小板聚集个数明显减少。结论 通过基础实验证明了本药的抗血栓、抗凝血的药效学作用，揭示了该药抗缺血性中风的药理作用机制。
关键词 通脉胶囊 血栓 药效学
【文献标识码】 A 【文章编号】 1609-6614(2004)04-0332-02
通脉胶囊由僵蚕、丹参、赤芍、川芎、酒大黄等组成，临床应用具有活血化瘀、疏通经络之功效，可用于脑动脉硬化、缺血性脑中风的治疗。笔者根据其疗效，对通脉胶囊进行了抗血栓及抗凝作用的研究。
1 材料
, 百拇医药
1.1 实验药物 通脉胶囊由黑龙江中医药大学制药厂提供(批号:010325);脑得生(阳性对照药)由黑龙江中医药大学制药厂提供(批号:20010612)。
1.2 实验动物 Wistar大鼠(雌雄各半，体重250±20g，合格证号:09-3-3)及昆明种小鼠(雌雄各半，体重18±2g，合格证号:09-2-2)。由黑龙江中医药大学实验动物中心提供。
1.3 实验仪器 78-1型加热磁力搅拌器(杭州仪表电机厂);国产光学显微镜DZ-0.8;自动平衡离心机(北京医用离心机厂)。
2 方法与结果
2.1 抗大鼠血栓实验 Wistar大鼠50只，体重250～300g，雌雄兼用，称重后随机分5组，每组10只。通脉胶囊高剂量组1.728g/kg;中剂量组0.864g/kg;低剂量组0.432g/kg;脑得生组0.486g/kg;空白对照组等量生理盐水。各组大鼠均每日灌胃给药1次，连续7天，末次药后30min，以10%乌拉坦1ml/100g腹腔麻醉，仰位固定于大鼠手术台上，实施手术。弯剪剪去颈部位毛，正中切开颈部皮肤，钝剥离分离右颈总动脉及左颈外静脉，将事先充满肝素生理盐水(50U/ml)的聚乙烯管(分三段连结，在中段放入长6cm的4号手术线)的一端插入左颈外静脉后，从聚乙烯管注入肝素50U/kg，夹住管壁，将右颈总动脉近心端以止血夹阻断血流，眼科剪剪一“△”口，将聚乙烯管另一端插入右颈总动脉，结扎，5min后打开止血夹开放血流，血液从右颈总动脉经聚乙烯管返回左颈外静脉，开放血流15min后，中断血流，迅速取下聚乙烯管，取出手术线，分析天平称重，以总重量减去线重即血栓湿重 [1] 。实验结果见表1。实验结果:通脉胶囊各剂量组及脑得生组与生理盐水组间t检验，通脉胶囊中、高剂量组及脑得生组P<0.01，低剂量组P<0.05。统计结果分析表明，通脉胶囊有显著抑制大鼠体内血栓形成的趋势，与脑得生组作用相似。
, 百拇医药
2.2 通脉胶囊对小鼠凝血时间的影响 昆明种小鼠50只，体重18～22g，雌雄各半，随机分5组，每组10只。通脉胶囊低剂量组0.624g/kg;中剂量组1.248g/kg;高剂量组
表1 通脉胶囊对大鼠体内血栓形成的影响
注:各用药组与生理盐水组比较 ˇ P<0.052.476g/kg;阳性对照药脑得生0.702g/kg;空白对照组给等量生理盐水。各组小鼠均每日灌胃给药1次，连续7天，末次药后60min，用毛细玻管将各鼠做眼眶内眦取血，采用玻片法及毛细玻管发测定凝血时间。测定方法如下。
2.2.1 玻片法 事先用酒精棉球擦净载玻片，待酒精挥发干之后，用毛细玻管将各鼠做眼眶内眦取血，迅速滴血于载玻片上，血滴直径约5～10mm，立即开始记时，此后每隔30s用干燥洁净针头挑动血液1次至针头能挑起纤维蛋白丝为止，即为凝血时间。
, 百拇医药
2.2.2 毛细玻管法 各组小鼠给药10min后，均用内径为1mm的玻璃毛细管插入小鼠内眦球后静脉丛取血，至毛细玻管内血栓达5cm。每隔30s折断毛细玻管一小段，检察有无出现血凝丝。计算从毛细玻璃管采血到出现血凝丝的时间，即为凝血时间 [2] 。实验结果见表2。
表2 通脉胶囊对小鼠凝血时间的影响
注:各用药组与生理盐水组比较 ˇ P<0.05， ˇˇ P<0.01实验结果:通脉胶囊各剂量组及脑得生组与生理盐水组间t检验，玻片法中，通脉胶囊高剂量组P<0.01，中、低剂量组P<0.05，脑得生组P<0.01;毛细玻管法中，通脉胶囊高剂量组P<0.01，低、中剂量组P<0.05，脑得生组P<0.01。统计结果分析表明，通脉胶囊能明显延长凝血时间，高剂量组与脑得生组相似。
2.3 对血小板聚集功能的影响 实验动物、分组、给药剂量、给药时间同实验2.2。末次药后40min，取抗凝血，离心分离多血小板血浆0.1ml，置于硅化处理载玻片上，血浆中放入铁心玻璃球一个，将载玻片放在加热磁力搅拌器上，37℃预热2min，启动搅拌器，以1000r/min转5min，取下载玻片，先肉眼观察血小板聚集个数，后置显微镜下观察血小板聚集个数 [3] 。实验结果见表3。
, 百拇医药
表3 通脉胶囊对血小板聚集功能的影响
注:用药组与生理盐水组比较 ˇ P<0.05实验结果经统计学t检验，证明通脉胶囊高、中剂量组与生理盐水组比，差异有显著性(P<0.05)。低剂量组、阳性对照组与生理盐水组比差异无显著性。实验结果表明通 脉胶囊具有显著抑制血小板聚集的作用，其作用优于脑得生组。
3 讨论
通脉胶囊以化痰开窍、通腑泻热、活血化瘀为原则经科学组方而成，由僵蚕、丹参、赤芍、川芎、酒大黄、芒硝、胆南星、栝蒌、水蛭、三七等组成，方中胆南星、栝蒌清热化痰，大黄、芒硝通腑泻热，丹参、川芎等活血化瘀，共同达到痰热去、腑气通、脉络畅的功效。本实验证明，通脉胶囊具有抑制大鼠血栓形成，延长小鼠出血时间，降低小鼠血小板聚集性的作用，从而从现代药理学上验证了通脉胶囊具有抑制血栓形成、抗凝血作用，为临床应用于脑动脉硬化，缺血性脑中风的治疗提供了理论依据。
参考文献
1 徐叔云，卞如廉，陈修.药理实验方法学，北京:人民卫生版社，1985，845.
2 徐叔云，卞如廉，陈修.药理实验方法学，第2版.北京:人民卫生出版社，1991，945.
3 陈奇.中药药理研究方法学，北京:人民卫生出版社，1993，484.
作者单位:150040黑龙江中医药大学附属第一医院
(编辑黄 杰), 百拇医药
关键词 通脉胶囊 血栓 药效学
【文献标识码】 A 【文章编号】 1609-6614(2004)04-0332-02
通脉胶囊由僵蚕、丹参、赤芍、川芎、酒大黄等组成，临床应用具有活血化瘀、疏通经络之功效，可用于脑动脉硬化、缺血性脑中风的治疗。笔者根据其疗效，对通脉胶囊进行了抗血栓及抗凝作用的研究。
1 材料
, 百拇医药
1.1 实验药物 通脉胶囊由黑龙江中医药大学制药厂提供(批号:010325);脑得生(阳性对照药)由黑龙江中医药大学制药厂提供(批号:20010612)。
1.2 实验动物 Wistar大鼠(雌雄各半，体重250±20g，合格证号:09-3-3)及昆明种小鼠(雌雄各半，体重18±2g，合格证号:09-2-2)。由黑龙江中医药大学实验动物中心提供。
1.3 实验仪器 78-1型加热磁力搅拌器(杭州仪表电机厂);国产光学显微镜DZ-0.8;自动平衡离心机(北京医用离心机厂)。
2 方法与结果
2.1 抗大鼠血栓实验 Wistar大鼠50只，体重250～300g，雌雄兼用，称重后随机分5组，每组10只。通脉胶囊高剂量组1.728g/kg;中剂量组0.864g/kg;低剂量组0.432g/kg;脑得生组0.486g/kg;空白对照组等量生理盐水。各组大鼠均每日灌胃给药1次，连续7天，末次药后30min，以10%乌拉坦1ml/100g腹腔麻醉，仰位固定于大鼠手术台上，实施手术。弯剪剪去颈部位毛，正中切开颈部皮肤，钝剥离分离右颈总动脉及左颈外静脉，将事先充满肝素生理盐水(50U/ml)的聚乙烯管(分三段连结，在中段放入长6cm的4号手术线)的一端插入左颈外静脉后，从聚乙烯管注入肝素50U/kg，夹住管壁，将右颈总动脉近心端以止血夹阻断血流，眼科剪剪一“△”口，将聚乙烯管另一端插入右颈总动脉，结扎，5min后打开止血夹开放血流，血液从右颈总动脉经聚乙烯管返回左颈外静脉，开放血流15min后，中断血流，迅速取下聚乙烯管，取出手术线，分析天平称重，以总重量减去线重即血栓湿重 [1] 。实验结果见表1。实验结果:通脉胶囊各剂量组及脑得生组与生理盐水组间t检验，通脉胶囊中、高剂量组及脑得生组P<0.01，低剂量组P<0.05。统计结果分析表明，通脉胶囊有显著抑制大鼠体内血栓形成的趋势，与脑得生组作用相似。
, 百拇医药
2.2 通脉胶囊对小鼠凝血时间的影响 昆明种小鼠50只，体重18～22g，雌雄各半，随机分5组，每组10只。通脉胶囊低剂量组0.624g/kg;中剂量组1.248g/kg;高剂量组
表1 通脉胶囊对大鼠体内血栓形成的影响
注:各用药组与生理盐水组比较 ˇ P<0.052.476g/kg;阳性对照药脑得生0.702g/kg;空白对照组给等量生理盐水。各组小鼠均每日灌胃给药1次，连续7天，末次药后60min，用毛细玻管将各鼠做眼眶内眦取血，采用玻片法及毛细玻管发测定凝血时间。测定方法如下。
2.2.1 玻片法 事先用酒精棉球擦净载玻片，待酒精挥发干之后，用毛细玻管将各鼠做眼眶内眦取血，迅速滴血于载玻片上，血滴直径约5～10mm，立即开始记时，此后每隔30s用干燥洁净针头挑动血液1次至针头能挑起纤维蛋白丝为止，即为凝血时间。
, 百拇医药
2.2.2 毛细玻管法 各组小鼠给药10min后，均用内径为1mm的玻璃毛细管插入小鼠内眦球后静脉丛取血，至毛细玻管内血栓达5cm。每隔30s折断毛细玻管一小段，检察有无出现血凝丝。计算从毛细玻璃管采血到出现血凝丝的时间，即为凝血时间 [2] 。实验结果见表2。
表2 通脉胶囊对小鼠凝血时间的影响
注:各用药组与生理盐水组比较 ˇ P<0.05， ˇˇ P<0.01实验结果:通脉胶囊各剂量组及脑得生组与生理盐水组间t检验，玻片法中，通脉胶囊高剂量组P<0.01，中、低剂量组P<0.05，脑得生组P<0.01;毛细玻管法中，通脉胶囊高剂量组P<0.01，低、中剂量组P<0.05，脑得生组P<0.01。统计结果分析表明，通脉胶囊能明显延长凝血时间，高剂量组与脑得生组相似。
2.3 对血小板聚集功能的影响 实验动物、分组、给药剂量、给药时间同实验2.2。末次药后40min，取抗凝血，离心分离多血小板血浆0.1ml，置于硅化处理载玻片上，血浆中放入铁心玻璃球一个，将载玻片放在加热磁力搅拌器上，37℃预热2min，启动搅拌器，以1000r/min转5min，取下载玻片，先肉眼观察血小板聚集个数，后置显微镜下观察血小板聚集个数 [3] 。实验结果见表3。
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表3 通脉胶囊对血小板聚集功能的影响
注:用药组与生理盐水组比较 ˇ P<0.05实验结果经统计学t检验，证明通脉胶囊高、中剂量组与生理盐水组比，差异有显著性(P<0.05)。低剂量组、阳性对照组与生理盐水组比差异无显著性。实验结果表明通 脉胶囊具有显著抑制血小板聚集的作用，其作用优于脑得生组。
3 讨论
通脉胶囊以化痰开窍、通腑泻热、活血化瘀为原则经科学组方而成，由僵蚕、丹参、赤芍、川芎、酒大黄、芒硝、胆南星、栝蒌、水蛭、三七等组成，方中胆南星、栝蒌清热化痰，大黄、芒硝通腑泻热，丹参、川芎等活血化瘀，共同达到痰热去、腑气通、脉络畅的功效。本实验证明，通脉胶囊具有抑制大鼠血栓形成，延长小鼠出血时间，降低小鼠血小板聚集性的作用，从而从现代药理学上验证了通脉胶囊具有抑制血栓形成、抗凝血作用，为临床应用于脑动脉硬化，缺血性脑中风的治疗提供了理论依据。
参考文献
1 徐叔云，卞如廉，陈修.药理实验方法学，北京:人民卫生版社，1985，845.
2 徐叔云，卞如廉，陈修.药理实验方法学，第2版.北京:人民卫生出版社，1991，945.
3 陈奇.中药药理研究方法学，北京:人民卫生出版社，1993，484.
作者单位:150040黑龙江中医药大学附属第一医院
(编辑黄 杰), 百拇医药