10种中药有效部位对解脲支原体药敏试验研究
【摘要】 目的 探讨10种中药有效部位体外抗解脲支原体(UU)的活性。方法 应用微量稀释培养法，检测10种中药有效部位体外抗14株UU标准株的敏感性。结果 黄柏氯仿提取物最敏感，其MIC 50 为0.0625mg/ml，MIC 90 为0.25mg/ml。其次为大黄总蒽醌、栀子总苷和总甘草酸。结论 中药有效部位对UU标准株的敏感性比原生药水煎剂平均提高了10倍以上，值得做进一步研究。
关键词 中药有效部位 解脲支原体 非淋菌性尿道炎
【文献标识码】 B 【文章编号】 1606-8106(2004)09-0838-02
非淋菌性尿道炎(NGU)在我国发病率逐年增加，其发病率在性传播疾病(STD)中占第三位。解脲支原体(UU)是引起NGU的主要病原体之一，大约20%～30%的NGU由UU引起。近10年来，中医药治疗NGU取得了长足的进步，治疗病例逾千例。已有170余种中药水煎液对(UU)的敏感性作过筛查 [1～4] ，发现其中20余种对UU敏感性较高。我们选取其中10种中药，根据文献 [5～9] ，略加改进，进行提取、分离出10种有效部位，对14株UU标准株作药敏试验，现将结果报告如下。
, 百拇医药
1 材料与方法
1.1 供试样品 黄芩总黄酮、栀子总苷、总甘草酸、大黄总蒽醌、穿心莲总内脂、黄连总生物碱、黄柏总生物碱、金银花总氯原酸、苦参总生物碱、黄柏氯仿提取物等，分别制成10mg/ml的水混悬剂，调整pH至6.0±0.5，121℃15min灭菌备用;14型UU标准株(由南京铁道医学院提供);UU液体培养基(由南京黎明生物制品有限公司购进);液体石蜡(化学纯，121℃15min灭菌)。
1.2 样品MIC测定 采用微量稀释培养法规定，在净化工作台内进行操作。(1)将UU标准株复苏、传代3次后用新鲜液体培养基稀释成10 4 CCU/ml作为接种液;(2)将UU接种液分别加入1～6孔中，第1孔和第6孔各18μl，第2～5孔各加100μl，第1孔加供试样品20μl，混匀，用微量移液器依次从第1孔始吸取100μl到第2～5孔中作倍比稀释，从第5孔中弃去100μl混合液，第6孔加供试样品稀释剂20μl混匀后弃去100μl，作为阳性对照孔。(3)加样完毕后，每孔用
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2滴液体石蜡覆盖各孔，置37℃孵箱中。结果观察，以培养72h最低无颜色变化孔的药物浓度定为最低抑菌浓度，即MIC值。
2 结果
微量稀释培养法测定10种中药有效部位对UU的MIC值见表1;当样品浓度为1.0mg/ml时，UU对各药的敏感率见表2。从表中可见:黄柏氯仿提取物对UU最敏感，其MIC 50 为0.0625mg/ml，MIC 90 为0.25mg/ml，其次为大黄总蒽醌、栀子总苷和总甘草酸。当药物浓度为1.0mg/ml时，对14株UU标准标的敏感率，金银花总氯原酸和栀子总苷为100%，黄柏氯仿提取物、大黄总蒽醌、总甘草酸、黄连总生物碱各为92.9%。
3 讨论
迄今已有170余种中药水煎液在体外测定过UU的敏感性，其中有20余种敏感性较高。我们再从中选取10种化学成分比较明确的中药，进行提取，分离出总有效部位(经过精制处理)，采用微量稀释培养法，再行药敏试验，结果提示，该有效部位对14株UU标准株的MIC值，比原生药水煎液 [1～4] 平均提高10倍以上，有的可达100倍。这不仅为中医治疗NGU提供了一定科学依据，还为进一步研究、开发科技含量较高的二类新药打下良好的临床基础。本实验在国内未见同类文献报道，值得深入研究。
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表1 10种中药有效部位对14株UU标准株体外抑制结果 略
表2 14株UU标准株在1.0mg/ml时的敏感率 略
对于有效成分较为明确的中药，采用中药有效部位作UU药敏试验，对微量稀释培养法而言，既克服有的中药水煎液因颜色太深而影响试验结果，又避免了中药水煎剂原 生药受产地、生长环境、采收、贮存等条件差异，致使同一品种的试验结果差异存在很大的弊端。
参考文献
1 刘忠义，张国威，何云志.解脲支原体中药敏感试验.中华皮科杂志，1996，29(5):349.
2 张赛娟，翁华.苦参、黄连和黄芩对体外解脲支原体的作用.宁波医学，1996，86):336.
3 黄贝贝，徐洪波，潘大鑫，等.25种中药抗解脲支原体实验研究.中国人兽共患病杂志，1997，13(1):64.
, 百拇医药
4 胡国华，叶元康，夏英，等.抗溶脲脲原体的中药筛选的实验研究.天津中医学院学报，17(3):43.
5 冀春茹，王洛铭.中药化学实验技术与实验.郑州:河南科技出版社，1986，232，251.
6 上海药物研究所.中药有效成分的提取与分离.第二版.上海:上海科技出版社，1988，187.
7 林启寿.中草药成分化学.北京:科技出版社，1977，614.
8 阚毓铭.中药化学实验操作技术.北京:中国医药科技出版社，1988，187.
9 北京中医学院.中药化学.北京:中国教育出版社，1974，151.
作者单位:610031成都四川省皮肤病性病防治研究所
(编辑 李阳), 百拇医药
关键词 中药有效部位 解脲支原体 非淋菌性尿道炎
【文献标识码】 B 【文章编号】 1606-8106(2004)09-0838-02
非淋菌性尿道炎(NGU)在我国发病率逐年增加，其发病率在性传播疾病(STD)中占第三位。解脲支原体(UU)是引起NGU的主要病原体之一，大约20%～30%的NGU由UU引起。近10年来，中医药治疗NGU取得了长足的进步，治疗病例逾千例。已有170余种中药水煎液对(UU)的敏感性作过筛查 [1～4] ，发现其中20余种对UU敏感性较高。我们选取其中10种中药，根据文献 [5～9] ，略加改进，进行提取、分离出10种有效部位，对14株UU标准株作药敏试验，现将结果报告如下。
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1 材料与方法
1.1 供试样品 黄芩总黄酮、栀子总苷、总甘草酸、大黄总蒽醌、穿心莲总内脂、黄连总生物碱、黄柏总生物碱、金银花总氯原酸、苦参总生物碱、黄柏氯仿提取物等，分别制成10mg/ml的水混悬剂，调整pH至6.0±0.5，121℃15min灭菌备用;14型UU标准株(由南京铁道医学院提供);UU液体培养基(由南京黎明生物制品有限公司购进);液体石蜡(化学纯，121℃15min灭菌)。
1.2 样品MIC测定 采用微量稀释培养法规定，在净化工作台内进行操作。(1)将UU标准株复苏、传代3次后用新鲜液体培养基稀释成10 4 CCU/ml作为接种液;(2)将UU接种液分别加入1～6孔中，第1孔和第6孔各18μl，第2～5孔各加100μl，第1孔加供试样品20μl，混匀，用微量移液器依次从第1孔始吸取100μl到第2～5孔中作倍比稀释，从第5孔中弃去100μl混合液，第6孔加供试样品稀释剂20μl混匀后弃去100μl，作为阳性对照孔。(3)加样完毕后，每孔用
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2滴液体石蜡覆盖各孔，置37℃孵箱中。结果观察，以培养72h最低无颜色变化孔的药物浓度定为最低抑菌浓度，即MIC值。
2 结果
微量稀释培养法测定10种中药有效部位对UU的MIC值见表1;当样品浓度为1.0mg/ml时，UU对各药的敏感率见表2。从表中可见:黄柏氯仿提取物对UU最敏感，其MIC 50 为0.0625mg/ml，MIC 90 为0.25mg/ml，其次为大黄总蒽醌、栀子总苷和总甘草酸。当药物浓度为1.0mg/ml时，对14株UU标准标的敏感率，金银花总氯原酸和栀子总苷为100%，黄柏氯仿提取物、大黄总蒽醌、总甘草酸、黄连总生物碱各为92.9%。
3 讨论
迄今已有170余种中药水煎液在体外测定过UU的敏感性，其中有20余种敏感性较高。我们再从中选取10种化学成分比较明确的中药，进行提取，分离出总有效部位(经过精制处理)，采用微量稀释培养法，再行药敏试验，结果提示，该有效部位对14株UU标准株的MIC值，比原生药水煎液 [1～4] 平均提高10倍以上，有的可达100倍。这不仅为中医治疗NGU提供了一定科学依据，还为进一步研究、开发科技含量较高的二类新药打下良好的临床基础。本实验在国内未见同类文献报道，值得深入研究。
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表1 10种中药有效部位对14株UU标准株体外抑制结果 略
表2 14株UU标准株在1.0mg/ml时的敏感率 略
对于有效成分较为明确的中药，采用中药有效部位作UU药敏试验，对微量稀释培养法而言，既克服有的中药水煎液因颜色太深而影响试验结果，又避免了中药水煎剂原 生药受产地、生长环境、采收、贮存等条件差异，致使同一品种的试验结果差异存在很大的弊端。
参考文献
1 刘忠义，张国威，何云志.解脲支原体中药敏感试验.中华皮科杂志，1996，29(5):349.
2 张赛娟，翁华.苦参、黄连和黄芩对体外解脲支原体的作用.宁波医学，1996，86):336.
3 黄贝贝，徐洪波，潘大鑫，等.25种中药抗解脲支原体实验研究.中国人兽共患病杂志，1997，13(1):64.
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4 胡国华，叶元康，夏英，等.抗溶脲脲原体的中药筛选的实验研究.天津中医学院学报，17(3):43.
5 冀春茹，王洛铭.中药化学实验技术与实验.郑州:河南科技出版社，1986，232，251.
6 上海药物研究所.中药有效成分的提取与分离.第二版.上海:上海科技出版社，1988，187.
7 林启寿.中草药成分化学.北京:科技出版社，1977，614.
8 阚毓铭.中药化学实验操作技术.北京:中国医药科技出版社，1988，187.
9 北京中医学院.中药化学.北京:中国教育出版社，1974，151.
作者单位:610031成都四川省皮肤病性病防治研究所
(编辑 李阳), 百拇医药