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RT-PCR,ε,γ血红蛋白基因,GEl,WoRKs软件,定量分析,应用GElWoRKs软件定量分析PCR扩增产物

     【摘要】 目的 探讨Gel Works1D软件应用于PCR扩增产物的定性与定量分析。方法 提取孕妇全血mRNA，经体外逆转录后，应用ε/γ引物引导扩增胎儿特异血红蛋白基因片段，同时用不同剂量标准mRNA经逆转录及PCR扩增后，经琼脂糖凝胶电泳，以凝胶成像系统扫描成像，用Gel Works1D软件分析凝胶图像，绘制标准曲线，对样品进行定性与定量分析。结果 在7例妊娠妇女中，6例扩增出ε/γ基因片段(274bp)，1例为阴性。定量标准曲线公式:Y=-2.83×10 ^-5 X ² +0.06045X-2.265，R ² =0.9401，6份样品中，胎儿mRNA在孕妇外周血中的浓度平均25.72ng/ml，最大值33.66ng/ml，最小值20.84ng/ml。结论 Gel Works1D分析软件，可以对样品mRNA或DNA进行定性与定量分析，由于影响PCR扩增的因素较多，标准曲线的线性关系受到一定程度的限制，适当增加或减少逆转录时的模板量可克服上述缺陷。

    关键词 RT-PCR ε/γ血红蛋白基因 Gel Works软件 定量分析

    【文献标识码】 A 【文章编号】 1606-8106(2004)09-0769-03

    Using Gel Works software to quantity the products of PCR

    Wang Binyou ......