急性脑出血患者脑脊液中白介素-6及可溶性白介素-6受体的检测
暨南大学医学院第五附属医院暨广东省清远市人民医院，广东清远511500
白介素-6(IL-6)被认为在中枢神经系统中具有神经保护和神经营养作用，其重要性倍受关注。有研究报道，在脑出血患者外周血单核细胞及脑脊液中IL-6的表达显著增高〔1，2〕，而对脑出血患者脑脊液(CSF)中可溶性IL-6受体(sIL-6R)的变化尚未见报道。我们对急性脑出血患者CSF中IL-6和sIL-6R进行联合测定，以了解其临床意义及两者的相互关系。报告如下。
1 资料与方法
1.1 病例：1999年1月—2001年8月我院神经外、内科收治的经临床和CT证实的自发性脑出血患者25例，男13例，女12例；年龄12～75岁,平均49岁。脑实质出血23例(颞叶7例，额叶5例，丘脑8例，小脑2例，胼胝体1例；其中脑实质出血破入脑室者16例，单纯脑实质出血7例)；单纯脑室出血2例。出血量<20 ml 4例，20~30 ml 7例，31~60 ml 8例，>60 ml 6例。
, 百拇医药
1.2 方法：患者于入院后2日内经腰椎穿刺取CSF 2 ml，离心、沉淀取上清液，放入-80 ℃下待测，部分患者进行发病后第1、2、3、5和10~13日动态观察。选择同期住院的20例非神经系统疾病患者CSF标本为对照。
IL-6和sIL-6R测定均采用双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)法，按试剂盒说明书操作，其含量超过标准曲线上限时将标本进行适当稀释后重测。
1.3 统计学方法：实验数据以均数±标准差(x[TX-]±s)表示，用SPSS10.0统计软件进行t(t′)、F检验和相关分析。
2 结果
2.1 急性脑出血患者CSF中IL-6和sIL-6R均非常显著地升高(见表1)。脑实质出血破入脑室者CSF中的IL-6和sIL-6R较单纯脑实质出血者明显增高(见表2)。
, 百拇医药
2.2不同出血时间IL-6和sIL-6R的变化见表3。脑出血第1日IL-6和sIL-6R即升至最高，此后仍维持在较高水平。对不同出血时间CSF中IL-6与sIL-6R含量配对计算相关系数(n=40),两者间呈微弱相关关系(r=0.276,P>0.05)。
3 讨论
本资料中脑出血患者第1日CSF中的IL-6和sIL-6R均非常显著地升高，脑实质出血破入脑室者CSF中的IL-6和sIL-6R较单纯脑实质出血者增高明显。表明IL-6和sIL-6R与脑损伤后炎症反应有紧密的联系。脑出血患者第1日CSF中IL-6和sIL-6R就较对照组有数倍增加，到第10日左右仍维持在较高水平，脑实质出血并破入脑室者较单纯脑实质出血者显著升高。表明IL-6和sIL-6R的含量变化与脑损伤程度和范围有关；同时还表明脑出血后第1日脑组织局部的炎症应激反应明显加强。
CSF中sIL-6R表达上调，可能与脑组织水肿、炎性细胞浸润导致脑组织局部合成sIL-6R增加有关；或者由于脑组织局部炎症浸润激活了IL-6与细胞膜型IL-6R的结合，导致sIL-6R脱落进入CSF中。由于血液中sIL-6R的含量可达60 μg/L〔3〕,极大地高于CSF中的浓度，因此，不排除因血-脑脊液屏障的破坏导致血液中sIL-6R扩散至CSF中而使其浓度增高。而脑出血患者血液中IL-6明显低于CSF中的浓度，CSF中IL-6含量显著增加，应是脑内局部合成所致〔2〕。患者CSF中IL-6和sIL-6R增高的作用，可能是脑出血继发缺血性损伤，上调的sIL-6R与IL-6结合，识别信号转导成分(gp130),形成具有生物活性的三元复合体，立即激活细胞内的多种激酶，导致蛋白磷酸化和相关的细胞因子、化学因子以及黏附分子的基因表达，进而发挥其抗缺血性损伤，促进神经修复等神经保护作用〔4〕，从而增强IL-6的生物学效应。sIL-6R具有与膜型IL-6R同样的生物学活性，它能特异性地结合IL-6形成复合物，再与gp130结合发生信号传导。我们采用ELISA法检测可直接得到sIL-6R免疫学含量。Azuma等〔5〕认为采用ELISA法检测sIL-6R免疫学活性可以反映sIL-6R的生物学活性。
, http://www.100md.com
在急性脑出血患者，CSF中的IL-6水平和sIL-6R活性显著升高，且出血破入脑室者显著高于未破入脑室者，间接表明两者在脑出血后免疫病理反应的相互关系。从理论上来看CSF中的IL-6含量和sIL-6R活性应该呈明显正相关，本组患者IL-6和sIL-6R含量虽然均显著升高，但相关性不明显，其主要原因是试验的批间差异或其检测时含量过高时标本稀释的误差所致，同时不排除IL-6与sIL-6R反应过程中IL-6与sIL-6R的分泌不平衡所致。
参考文献
〔1〕张淑，姚智，邢复明，等.高血压脑出血患者肿瘤坏死因子-α和白细胞介素-6活性水平的观察.中国危重病急救医学，1998，10(6)：374-375.
〔2〕李介华，徐国祥，罗小华,等.急性脑出血患者脑脊液IL-6和CRP的不同变化与意义.中国实验诊断学，2001，5(4)：165-166.
, 百拇医药
〔3〕Tarkowski E,Rosengren L,Blomstrand C,et al.Early intrathecal pyoduction of interleukin-6 the size of brain lesion in stroke.Stroke，1995，26(8)：1393-1398.
〔4〕肖岚.白介素-6与脑缺血损伤.国外医学神经病学神经外科学分册，2000，27(5):258-261.
〔5〕Azuma H,Moriyama T,Ikeda H,et al.Analysis of soluble interleukin-6 receptor in cerebrospinal fluid in inflammatory and non- inflammatory conditions.Cytokine，2000,12(2):160-164.)
第1作者简介：李介华(1959-)，男(汉族)，湖南省桃江人，副主任技师。中华医学会广东分会检验学会委员，岭南医学检验与临床杂志编委。
, 百拇医药(李介华，徐国祥，冯建容，徐辉，李二娟，罗小华，朱奕，温嘉琳)
白介素-6(IL-6)被认为在中枢神经系统中具有神经保护和神经营养作用，其重要性倍受关注。有研究报道，在脑出血患者外周血单核细胞及脑脊液中IL-6的表达显著增高〔1，2〕，而对脑出血患者脑脊液(CSF)中可溶性IL-6受体(sIL-6R)的变化尚未见报道。我们对急性脑出血患者CSF中IL-6和sIL-6R进行联合测定，以了解其临床意义及两者的相互关系。报告如下。
1 资料与方法
1.1 病例：1999年1月—2001年8月我院神经外、内科收治的经临床和CT证实的自发性脑出血患者25例，男13例，女12例；年龄12～75岁,平均49岁。脑实质出血23例(颞叶7例，额叶5例，丘脑8例，小脑2例，胼胝体1例；其中脑实质出血破入脑室者16例，单纯脑实质出血7例)；单纯脑室出血2例。出血量<20 ml 4例，20~30 ml 7例，31~60 ml 8例，>60 ml 6例。
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1.2 方法：患者于入院后2日内经腰椎穿刺取CSF 2 ml，离心、沉淀取上清液，放入-80 ℃下待测，部分患者进行发病后第1、2、3、5和10~13日动态观察。选择同期住院的20例非神经系统疾病患者CSF标本为对照。
IL-6和sIL-6R测定均采用双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)法，按试剂盒说明书操作，其含量超过标准曲线上限时将标本进行适当稀释后重测。
1.3 统计学方法：实验数据以均数±标准差(x[TX-]±s)表示，用SPSS10.0统计软件进行t(t′)、F检验和相关分析。
2 结果
2.1 急性脑出血患者CSF中IL-6和sIL-6R均非常显著地升高(见表1)。脑实质出血破入脑室者CSF中的IL-6和sIL-6R较单纯脑实质出血者明显增高(见表2)。
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2.2不同出血时间IL-6和sIL-6R的变化见表3。脑出血第1日IL-6和sIL-6R即升至最高，此后仍维持在较高水平。对不同出血时间CSF中IL-6与sIL-6R含量配对计算相关系数(n=40),两者间呈微弱相关关系(r=0.276,P>0.05)。
3 讨论
本资料中脑出血患者第1日CSF中的IL-6和sIL-6R均非常显著地升高，脑实质出血破入脑室者CSF中的IL-6和sIL-6R较单纯脑实质出血者增高明显。表明IL-6和sIL-6R与脑损伤后炎症反应有紧密的联系。脑出血患者第1日CSF中IL-6和sIL-6R就较对照组有数倍增加，到第10日左右仍维持在较高水平，脑实质出血并破入脑室者较单纯脑实质出血者显著升高。表明IL-6和sIL-6R的含量变化与脑损伤程度和范围有关；同时还表明脑出血后第1日脑组织局部的炎症应激反应明显加强。
CSF中sIL-6R表达上调，可能与脑组织水肿、炎性细胞浸润导致脑组织局部合成sIL-6R增加有关；或者由于脑组织局部炎症浸润激活了IL-6与细胞膜型IL-6R的结合，导致sIL-6R脱落进入CSF中。由于血液中sIL-6R的含量可达60 μg/L〔3〕,极大地高于CSF中的浓度，因此，不排除因血-脑脊液屏障的破坏导致血液中sIL-6R扩散至CSF中而使其浓度增高。而脑出血患者血液中IL-6明显低于CSF中的浓度，CSF中IL-6含量显著增加，应是脑内局部合成所致〔2〕。患者CSF中IL-6和sIL-6R增高的作用，可能是脑出血继发缺血性损伤，上调的sIL-6R与IL-6结合，识别信号转导成分(gp130),形成具有生物活性的三元复合体，立即激活细胞内的多种激酶，导致蛋白磷酸化和相关的细胞因子、化学因子以及黏附分子的基因表达，进而发挥其抗缺血性损伤，促进神经修复等神经保护作用〔4〕，从而增强IL-6的生物学效应。sIL-6R具有与膜型IL-6R同样的生物学活性，它能特异性地结合IL-6形成复合物，再与gp130结合发生信号传导。我们采用ELISA法检测可直接得到sIL-6R免疫学含量。Azuma等〔5〕认为采用ELISA法检测sIL-6R免疫学活性可以反映sIL-6R的生物学活性。
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在急性脑出血患者，CSF中的IL-6水平和sIL-6R活性显著升高，且出血破入脑室者显著高于未破入脑室者，间接表明两者在脑出血后免疫病理反应的相互关系。从理论上来看CSF中的IL-6含量和sIL-6R活性应该呈明显正相关，本组患者IL-6和sIL-6R含量虽然均显著升高，但相关性不明显，其主要原因是试验的批间差异或其检测时含量过高时标本稀释的误差所致，同时不排除IL-6与sIL-6R反应过程中IL-6与sIL-6R的分泌不平衡所致。
参考文献
〔1〕张淑，姚智，邢复明，等.高血压脑出血患者肿瘤坏死因子-α和白细胞介素-6活性水平的观察.中国危重病急救医学，1998，10(6)：374-375.
〔2〕李介华，徐国祥，罗小华,等.急性脑出血患者脑脊液IL-6和CRP的不同变化与意义.中国实验诊断学，2001，5(4)：165-166.
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〔3〕Tarkowski E,Rosengren L,Blomstrand C,et al.Early intrathecal pyoduction of interleukin-6 the size of brain lesion in stroke.Stroke，1995，26(8)：1393-1398.
〔4〕肖岚.白介素-6与脑缺血损伤.国外医学神经病学神经外科学分册，2000，27(5):258-261.
〔5〕Azuma H,Moriyama T,Ikeda H,et al.Analysis of soluble interleukin-6 receptor in cerebrospinal fluid in inflammatory and non- inflammatory conditions.Cytokine，2000,12(2):160-164.)
第1作者简介：李介华(1959-)，男(汉族)，湖南省桃江人，副主任技师。中华医学会广东分会检验学会委员，岭南医学检验与临床杂志编委。
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