CD44蛋白在胶质瘤和脑转移癌中表达的研究
作者：魏红权 章锁江 林敏 竺可青
单位：魏红权 林敏 浙江医科大学附属二院病理科(杭州，310009)；章锁江 竺可青 浙江医科大学病理教研室
关键词：脑肿瘤/原发性；脑肿瘤/继发性；CD44/白细胞粘附分子
癌症99zk43
中图号：R739.41文献标识码：A
文章编号：1000-467X(1999)s0-0105-01
CD44与肿瘤转移的关系近年已受到注意，并在胃癌和乳癌等具有高转移能力的肿瘤方面研究较多，而在低转移能力的肿瘤中研究尚少。本文对20例胶质瘤和25例脑转移癌作一对比研究，现报道如下。
1材料与方法
, http://www.100md.com
1.1标本
肿瘤标本均来自浙医二院1994年至1997年间的脑外科手术标本，均经10%福尔马林固定，石蜡包埋4μm切片，HE染色作病理诊断，其中低度恶性胶质瘤10例(星形细胞瘤Ⅰ级5例、Ⅱ级5例)，高度恶性胶质瘤10例(星形细胞瘤Ⅲ级5例、Ⅳ级5例)，脑转移癌25例。
1.2试剂
试剂均来自中山公司的单抗：CD44s，CD44v3，CD44v6抗体稀释度为1∶100，SP试剂盒由迈新公司提供。
1.3方法
采用S-P法进行，组织切片脱蜡，各浓度酒精顺序脱水，抗原修复，一抗在4℃冰箱孵育过夜。用PBS代一抗作空白对照，用正常皮肤组织作阳性对照〔1〕。
1.4判断标准
, 百拇医药
以胞膜着色为阳性，低倍视野中阳性细胞数<25%为75%为“+”，26%~50%为“++”，51%~75%为“+++”。
1.5统计学处理
χ2检验
2结果
所有20例胶质瘤均表达CD44s，其中10例低度恶性胶质瘤中7例弱阳性，3例强阳性；10例高度恶性胶质瘤中3例弱阳性，7例强阳性(图1)。20例胶质瘤，无1例表达CD44v；25例转移癌中23例表达CD44v，(P<0.05)强阳性中V311/15(图2),V616/25(图3)；弱阳性中V310/25，V66/25；阴性者中V34/25，V63/25。25例转移癌中CD44s表达，强阳性4/25，弱阳性9/25，阴性12/25。
, http://www.100md.com
图1 CD44s在胶质瘤中强阳性表达
图2 CD44v3在转移癌中强阳性表达
图3 CD44v6在转移癌中强阳性表达
3讨论
胶质瘤的一个显著特点是有较强的浸润性，却很少发生颅外转移，我们对颅内胶质瘤与颅内转移癌作一比较，结果发现胶质瘤表达CD44s，而不表达CD44v；且CD44s表达随恶性度的增高而增强，与Stephan〔2〕报道相符。在中枢神经系统中，间质主要成分是透明质酸，而其它如纤维连结蛋白和层粘蛋白等少见。CD44分子是透明质酸受体，CD44s与透明质酸结合，吸收并降解透明质酸，从而促进胶质瘤的浸润性生长，但CD44s几乎存在于所有的细胞，所以CD44s在胶质瘤中要达到多少含量或是否还要其它因子参与，而促进胶质瘤的浸润生长，还待进一步研究。
, 百拇医药
肿瘤的转移是癌症患者的主要死亡原因。有人最近研究发现与肿瘤转移有关的是CD44的变异体，有人将CD44变异体cDNA转移到非转移性的细胞株引起转移〔4〕。本研究也显示，转移癌CD44v高表达。据报道CD44借可变区与细胞外基质的透明质酸、纤维连结蛋白、胶原Ⅳ和层粘蛋白等分子结合，参与细胞伪足形成，进行迁移运动〔5〕。尽管在这一过程中，具体的机制还不十分清楚，但粘附分子的结构和表达异常，是癌细胞发生侵袭和转移的重要环节。对癌的发生和发展过程中细胞粘附分子表达和功能变化的研究，不同变异体是否有不同的组织特异性的研究，将进一步提示癌侵袭转移行为的机制，可为临床评价肿瘤预后的新指标和新的生物学治疗途径。同时本文转移癌的高CD44v表达和胶质瘤的CD44v阴性表达，可为颅内肿瘤的诊断提供一个新的鉴别指标。
〔参考文献〕
1 Terpe HJ,Stark H,prehm P,et al.CD44 Variant isoforms are preferentially expressed in basal epithelia of non malignant human fetal and adult tissues〔J〕 .Histochemistry,1994,101:79.
, http://www.100md.com
2 Stephan F,Kihs HP,Winfried S,et al.Combined Detection of CD44 Isofarms by Exon spceifie RT PCR and Immunohistochemistry in primary Human Brain Tumors and Brain Metastases〔J〕 .Bioch and Broph Res Com,1996,222:794.
3 Arch R, Wirth K, Hofmann M, et al. Participation in Normal Immune Responses of a Metastasis Inducing splice Variant of CD 44〔J〕 .Science,1992,257:682.
4 Rrdy W,Hofmann M,Reinhard SA,et al. The Two Major CD44 proteins Expresed on a Metastaic Rat Tumer Cell Line Are Derived from Different splice Variants Each One Individually Suffices to Confer Metastatic Behavior〔J〕 .Cancer Res,1993,53(6):1262.
5 李凌，简卫国.细胞粘附分子与癌侵袭转移〔J〕.国外医学.老年学分册，1997，18(5)：224.
收稿日期：1998-05-29；修回日期：1998-10-13, http://www.100md.com
单位：魏红权 林敏 浙江医科大学附属二院病理科(杭州，310009)；章锁江 竺可青 浙江医科大学病理教研室
关键词：脑肿瘤/原发性；脑肿瘤/继发性；CD44/白细胞粘附分子
癌症99zk43
中图号：R739.41文献标识码：A
文章编号：1000-467X(1999)s0-0105-01
CD44与肿瘤转移的关系近年已受到注意，并在胃癌和乳癌等具有高转移能力的肿瘤方面研究较多，而在低转移能力的肿瘤中研究尚少。本文对20例胶质瘤和25例脑转移癌作一对比研究，现报道如下。
1材料与方法
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1.1标本
肿瘤标本均来自浙医二院1994年至1997年间的脑外科手术标本，均经10%福尔马林固定，石蜡包埋4μm切片，HE染色作病理诊断，其中低度恶性胶质瘤10例(星形细胞瘤Ⅰ级5例、Ⅱ级5例)，高度恶性胶质瘤10例(星形细胞瘤Ⅲ级5例、Ⅳ级5例)，脑转移癌25例。
1.2试剂
试剂均来自中山公司的单抗：CD44s，CD44v3，CD44v6抗体稀释度为1∶100，SP试剂盒由迈新公司提供。
1.3方法
采用S-P法进行，组织切片脱蜡，各浓度酒精顺序脱水，抗原修复，一抗在4℃冰箱孵育过夜。用PBS代一抗作空白对照，用正常皮肤组织作阳性对照〔1〕。
1.4判断标准
, 百拇医药
以胞膜着色为阳性，低倍视野中阳性细胞数<25%为75%为“+”，26%~50%为“++”，51%~75%为“+++”。
1.5统计学处理
χ2检验
2结果
所有20例胶质瘤均表达CD44s，其中10例低度恶性胶质瘤中7例弱阳性，3例强阳性；10例高度恶性胶质瘤中3例弱阳性，7例强阳性(图1)。20例胶质瘤，无1例表达CD44v；25例转移癌中23例表达CD44v，(P<0.05)强阳性中V311/15(图2),V616/25(图3)；弱阳性中V310/25，V66/25；阴性者中V34/25，V63/25。25例转移癌中CD44s表达，强阳性4/25，弱阳性9/25，阴性12/25。
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图1 CD44s在胶质瘤中强阳性表达
图2 CD44v3在转移癌中强阳性表达
图3 CD44v6在转移癌中强阳性表达
3讨论
胶质瘤的一个显著特点是有较强的浸润性，却很少发生颅外转移，我们对颅内胶质瘤与颅内转移癌作一比较，结果发现胶质瘤表达CD44s，而不表达CD44v；且CD44s表达随恶性度的增高而增强，与Stephan〔2〕报道相符。在中枢神经系统中，间质主要成分是透明质酸，而其它如纤维连结蛋白和层粘蛋白等少见。CD44分子是透明质酸受体，CD44s与透明质酸结合，吸收并降解透明质酸，从而促进胶质瘤的浸润性生长，但CD44s几乎存在于所有的细胞，所以CD44s在胶质瘤中要达到多少含量或是否还要其它因子参与，而促进胶质瘤的浸润生长，还待进一步研究。
, 百拇医药
肿瘤的转移是癌症患者的主要死亡原因。有人最近研究发现与肿瘤转移有关的是CD44的变异体，有人将CD44变异体cDNA转移到非转移性的细胞株引起转移〔4〕。本研究也显示，转移癌CD44v高表达。据报道CD44借可变区与细胞外基质的透明质酸、纤维连结蛋白、胶原Ⅳ和层粘蛋白等分子结合，参与细胞伪足形成，进行迁移运动〔5〕。尽管在这一过程中，具体的机制还不十分清楚，但粘附分子的结构和表达异常，是癌细胞发生侵袭和转移的重要环节。对癌的发生和发展过程中细胞粘附分子表达和功能变化的研究，不同变异体是否有不同的组织特异性的研究，将进一步提示癌侵袭转移行为的机制，可为临床评价肿瘤预后的新指标和新的生物学治疗途径。同时本文转移癌的高CD44v表达和胶质瘤的CD44v阴性表达，可为颅内肿瘤的诊断提供一个新的鉴别指标。
〔参考文献〕
1 Terpe HJ,Stark H,prehm P,et al.CD44 Variant isoforms are preferentially expressed in basal epithelia of non malignant human fetal and adult tissues〔J〕 .Histochemistry,1994,101:79.
, http://www.100md.com
2 Stephan F,Kihs HP,Winfried S,et al.Combined Detection of CD44 Isofarms by Exon spceifie RT PCR and Immunohistochemistry in primary Human Brain Tumors and Brain Metastases〔J〕 .Bioch and Broph Res Com,1996,222:794.
3 Arch R, Wirth K, Hofmann M, et al. Participation in Normal Immune Responses of a Metastasis Inducing splice Variant of CD 44〔J〕 .Science,1992,257:682.
4 Rrdy W,Hofmann M,Reinhard SA,et al. The Two Major CD44 proteins Expresed on a Metastaic Rat Tumer Cell Line Are Derived from Different splice Variants Each One Individually Suffices to Confer Metastatic Behavior〔J〕 .Cancer Res,1993,53(6):1262.
5 李凌，简卫国.细胞粘附分子与癌侵袭转移〔J〕.国外医学.老年学分册，1997，18(5)：224.
收稿日期：1998-05-29；修回日期：1998-10-13, http://www.100md.com