钙通道阻滞剂治疗肝纤维化的研究进展
济南军区总医院消化科 山东省济南市 250031
项目负责人:江学良
收稿日期:1994-12-15
关键词 钙通道阻滞剂;肝纤维化
江学良,权启镇,孙自勤,王要军.钙通道阻滞剂治疗肝纤维化的研究进展.新消化病学杂志，1995；3(3)：161-162
关于钙通道阻滞剂(calcium-channel blocker, CCB)预防和治疗肝纤维化的研究，国外仅见Cutrin[1，2]报道了硝苯吡啶对大鼠实验性肝纤维化的初步作用，国内通过实验与临床研究，发现CCB在减轻肝脏炎症与肝细胞损伤、干扰细胞外基质产生并增加其分解、抑制储脂细胞增殖与转化及抑制成纤维细胞DNA与蛋白质合成等方面具有较好的作用，本文就此作一综述.
, 百拇医药
1 对血清PⅢP及PCⅢ的影响
血清PⅢP来源于Ⅲ型前胶原，在胶原合成旺盛时，血清PⅢP含量升高，是目前研究最多的反映肝纤维化的指标.多数研究表明，血清PⅢP能较好地反映肝纤维组织生成的活动性，被认为是纤维化活动性的良好指标，连续测定PⅢP可用于预测胶原沉积的变化，并作为抗肝纤维化药物疗效的考核指标之一.李定国等[3]发现，用汉防己甲素(tetrandrine, Tet 50mg，3次/d)治疗18月后，肝硬变患者血清PⅢP的含量明显下降(P<0.05)，而且静脉色氨酸耐量试验明显改善，说明Tet具有抗肝纤维化和改善肝功能的作用.权启镇等[4，5]也有类似发现.但Tet或其他的CCB对急慢性肝炎或早期肝硬变患者的效果是否更好，尚有待研究，以便能在预防肝纤维化的形成方面找到安全有效的药物.孙自勤[6]等在动物实验研究中发现Tet可降低四氯化碳(CCl4)诱导的肝纤维化大鼠血清中PCⅢ的含量，由于血清PCⅢ能较好地反映肝纤维化的早期病变，并可作为肝纤维化活动及动态变化的指标之一，显示Tet对预防肝纤维化的形成具有一定作用.
, 百拇医药
2 对血清及肝组织中透明质酸(HA)的影响
HA由间质细胞合成，参与形成蛋白聚糖多聚体，是结缔组织基质的重要成分，其升高幅度与肝组织纤维化改变呈正相关，被认为是反映肝活动性纤维化和肝损害的定量标志.权启镇等[4，5]发现，肝硬变患者服用Tet 6月后，血清HA含量明显下降，随着用药时间的延长，下降程度越明显(P<0.01)，而且对肝脏功能有一定改善作用，但HA含量变化在Child分级组间无显著差异，说明Tet对预防和治疗肝纤维化均有一定作用.孙自勤等[6]发现，CCl4诱导的实验性大鼠肝纤维化，血清及肝组织HA含量显著高于正常对照组，若初次注射CCl4后开始用Tet治疗，则HA含量显著低于未治疗组，显示Tet对预防肝纤维化形成有一定作用.车建途等[7，8]发现脑益嗪(cinnarizine, Cin)能明显降低大、中剂量组和晚期治疗大剂量组肝HA含量，硝苯吡啶(nifedipine, Nif)无论早期治疗组还是晚期治疗组均能显著降低大鼠实验性肝纤维化肝HA含量，而且Cin及Nif均以大剂量组的降低作用最为明显，说明一定量的Cin及Nif能显著降低大鼠肝纤维化异常的肝HA含量，阻止和延缓HA增高，对肝纤维化还可能有一定逆转作用.
, 百拇医药
3 对肝羟脯氨酸(Hyp)的影响
Hyp是胶原蛋白的主要成分，其他蛋白几乎不含Hyp.在肝纤维化过程中，肝Hyp含量随着胶原的消长而相应变化，故肝Hyp含量可作为评估肝胶原含量和肝纤维化程度的可靠指标.研究发现[7，8]，大剂量Cin及Nif使早期治疗组肝纤维化大鼠Hyp含量降低，在晚期治疗组无明显变化，说明Cin及Nif对肝纤维化大鼠肝Hyp含量的影响须在纤维化尚未形成的早期阶段即开始应用，具有良好的抗肝胶原增生效果.此时即使损害肝细胞和造成肝纤维化的因素依然存在，早期应用仍可望延缓肝纤维化胶原的产生和发展进程，这种作用与Cin及Nif的剂量有一定关系，大剂量组效果更明显.
4 对肝氨基葡萄糖苷酶(β-NAG)的影响
β-NAG是溶酶体水解酶，能分解基质成分中的葡萄糖氨基多糖.在肝纤维化疾病中，血清和肝组织的β-NAG活性增高是由于肝纤维化活跃程度增高所致.车建途[7，8]等发现，与模型对照组比较，Nif早期和晚期治疗组的大剂量组β-NAG活性明显降低，提示一定剂量的Nif能减轻肝纤维化的活跃程度，而Cin晚期治疗大剂量组肝总β-NAG活性明显降低，早期治疗组则无明显变化，说明Cin对大鼠肝纤维化肝总β-NAG活性的影响，以肝纤维化已形成时给药明显，显示Cin能抑制已形成的肝纤维化活跃程度.
, 百拇医药
5 对成纤维细胞的影响
成纤维细胞是参与肝纤维化形成的主要细胞之一，它能大量合成和分泌胶原蛋白、纤维蛋白结合素、HA及层连素等结缔组织基质成分.它的生长增殖对肝纤维化的形成具有不可忽视的作用.刘乃丰[9]发现维拉帕米(verapamil, Ver)能抑制培养的人胚肺成纤维细胞DNA、RNA和蛋白质合成，表现为DNA含量明显低于对照组，细胞多数集中在DNA合成前的G0/G1期，而DNA合成的S期和细胞分裂前、分裂时的G2+M期的细胞数量则明显减少，细胞有丝分裂指数较对照组降低，培养液中Hyp、HA含量降低，提示Ver可抑制成纤维细胞的生长、增殖和分泌结缔组织成分.Ca2+与成纤维细胞的生长、增殖密切相关，刘海林[10]等发现Cin可抑制人成纤维细胞胶原合成，由于Cin属哌嗪类衍生物，主要阻断细胞外Ca2+内流，提示细胞外Ca2+内流对成纤维细胞的胶原合成具有重要作用，从而进一步阐明了CCB抗纤维化的机理.
, 百拇医药
6 对肝脏炎症、细胞变性坏死的影响
炎症及肝细胞损伤是肝纤维化的启动因素，阻断其发生、发展必然有助于削弱肝纤维化的发生倾向.研究表明[5，11]，对CCl4诱导的大鼠肝纤维化，Tet及Ver治疗后炎性细胞浸润、细胞变性 坏死均较对照组明显减轻或消失，无1只有假小叶形成，而对照组于14周后多数形成假小叶.Cutrin[2]发现Nif能减轻实验性鼠肝硬变损伤，减少炎症浸润及肝细胞坏死.Tet治疗6月后还可使慢性肝病患者汇管区炎细胞浸润明显减轻或消失，部分患者纤维化消失.以上研究说明CCB可减轻炎症及肝细胞损伤，有一定的抗肝纤维化作用.
7 对肝内胶原纤维增生的影响
胶原，尤其是Ⅰ，Ⅲ，Ⅳ型胶原过度沉积是肝纤维化的主要病理改变，胶原沉积使肝窦壁结构发生改变，加重肝脏损害，所以抑制这些胶原合成与沉积是抗肝纤维化的关键.免疫组化检查显示[5，11]：Tet及Ver可使CCl4诱导的实验性肝纤维化大鼠Ⅰ，Ⅲ，Ⅳ型胶原沉积减少.经图象处理技术也显示：胶原纤维与弹力纤维面积明显少于对照组，治疗组实验动物无肝纤维化发生.在慢性肝病患者的研究中也有类似发现[4，5]，尤以急性肝炎恢复期和慢性肝病早期效果显著，部分患者肝纤维化消失或部分消失，说明CCB可通过抑制胶原沉积，促进其吸收，减轻及逆转肝纤维化.
, 百拇医药
8 对肝脏储脂细胞(FSC)的影响
FSC是肝纤维化发生和发展过程中的主要参与细胞，在一系列致病因子的作用下，FSC大量增殖并转化为肌纤维母细胞，合成并分泌大量细胞外基质，如Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ型胶原纤维，纤维结合素、层连素、蛋白聚糖等，导致肝纤维化.研究发现[5，6]，随着肝纤维化发展，FSC数目增多，面积增大，胞浆丰富，线粒体、内质网及高尔基体发达，因此FSC在肝纤维化的形成和发 展中起中心作用.用Tet及Ver治疗可使FSC数目减少，粗面内质网面积减少，线粒体、高尔基体等产生与分泌胶原的细胞器均受到抑制，说明CCB抗肝纤维化作用部分可能与其抑制FSC增生及向肌纤维母细胞转化有关. 综上所述，CCB在预防和治疗肝纤维化方面具有较好的作用，值得进一步研究和评价，包括CCB抗肝纤维化的机制、扩大临床应用范围及与其他传统抗肝纤维化药物的比较等.
9 参考文献1 Cutrin C. Nifedipine in rat liver cirrhosis. Vet Hum Toxicol,1994;36(1):14-16
, 百拇医药
2 Cutrin C. Effect of nifedipine and s-adenosylmethionine in the liver of rats treated with ccl4 and
ethanol for one month. Life Sci,1992;51(10):113-118
3 李定国，夏维新，陆汉明，等.血清I型前胶原肽在钙通道阻滞剂治疗肝纤维化中的意义.
中华内科杂志，1990；29(8)：453-456
4 权启镇，徐俊，齐风，等.汉防己甲素对肝硬化患者血清透明质酸及III型前胶原肽含量的影响.
上海医学，1993；16(10)：562-564
, 百拇医药 5 权启镇，孙自勤，李定国，等.钙拮抗剂抗肝纤维化的实验与临床研究.新消化病学杂志，1994；2(4)：221-224
6 孙自勤，王要军，权启镇，等.汉防己甲素对大鼠实验性肝纤维化的防治作用.新消化病学杂志，1994；2(1)：19-20
7 车建途，陆汉明，李定国，等.硝苯啶对大鼠肝纤维化肝透明质酸、羟脯氨酸及氨基葡萄糖苷酶的影响.
中国医学科学院学报，1994；16(1)：35-38
8 车建途，陆汉明，李定国，等.脑益嗪对大鼠肝纤维化肝透明质酸、羟脯氨酸及N-乙酰-β-氨基葡萄糖苷酶活性的影响.
上海第二医科大学学报，1994；14(1)：28-30
9 刘乃丰.维拉帕米抑制细胞DNA、RNA和蛋白质合成的作用.浙江医科大学学报，1990；19(3)：107-110
10 刘海林，陆汉明，李定国，等.桂利嗪、尼卡地平对人成纤维细胞胶原合成的影响.中国药理学通报，1994；10(4)：308-310
11 王要军，孙自勤，权启镇，等.汉防己甲素治疗大鼠实验性肝纤维化的研究.临床肝胆病杂志，1993；9(增刊)：40-41, 百拇医药
项目负责人:江学良
收稿日期:1994-12-15
关键词 钙通道阻滞剂;肝纤维化
江学良,权启镇,孙自勤,王要军.钙通道阻滞剂治疗肝纤维化的研究进展.新消化病学杂志，1995；3(3)：161-162
关于钙通道阻滞剂(calcium-channel blocker, CCB)预防和治疗肝纤维化的研究，国外仅见Cutrin[1，2]报道了硝苯吡啶对大鼠实验性肝纤维化的初步作用，国内通过实验与临床研究，发现CCB在减轻肝脏炎症与肝细胞损伤、干扰细胞外基质产生并增加其分解、抑制储脂细胞增殖与转化及抑制成纤维细胞DNA与蛋白质合成等方面具有较好的作用，本文就此作一综述.
, 百拇医药
1 对血清PⅢP及PCⅢ的影响
血清PⅢP来源于Ⅲ型前胶原，在胶原合成旺盛时，血清PⅢP含量升高，是目前研究最多的反映肝纤维化的指标.多数研究表明，血清PⅢP能较好地反映肝纤维组织生成的活动性，被认为是纤维化活动性的良好指标，连续测定PⅢP可用于预测胶原沉积的变化，并作为抗肝纤维化药物疗效的考核指标之一.李定国等[3]发现，用汉防己甲素(tetrandrine, Tet 50mg，3次/d)治疗18月后，肝硬变患者血清PⅢP的含量明显下降(P<0.05)，而且静脉色氨酸耐量试验明显改善，说明Tet具有抗肝纤维化和改善肝功能的作用.权启镇等[4，5]也有类似发现.但Tet或其他的CCB对急慢性肝炎或早期肝硬变患者的效果是否更好，尚有待研究，以便能在预防肝纤维化的形成方面找到安全有效的药物.孙自勤[6]等在动物实验研究中发现Tet可降低四氯化碳(CCl4)诱导的肝纤维化大鼠血清中PCⅢ的含量，由于血清PCⅢ能较好地反映肝纤维化的早期病变，并可作为肝纤维化活动及动态变化的指标之一，显示Tet对预防肝纤维化的形成具有一定作用.
, 百拇医药
2 对血清及肝组织中透明质酸(HA)的影响
HA由间质细胞合成，参与形成蛋白聚糖多聚体，是结缔组织基质的重要成分，其升高幅度与肝组织纤维化改变呈正相关，被认为是反映肝活动性纤维化和肝损害的定量标志.权启镇等[4，5]发现，肝硬变患者服用Tet 6月后，血清HA含量明显下降，随着用药时间的延长，下降程度越明显(P<0.01)，而且对肝脏功能有一定改善作用，但HA含量变化在Child分级组间无显著差异，说明Tet对预防和治疗肝纤维化均有一定作用.孙自勤等[6]发现，CCl4诱导的实验性大鼠肝纤维化，血清及肝组织HA含量显著高于正常对照组，若初次注射CCl4后开始用Tet治疗，则HA含量显著低于未治疗组，显示Tet对预防肝纤维化形成有一定作用.车建途等[7，8]发现脑益嗪(cinnarizine, Cin)能明显降低大、中剂量组和晚期治疗大剂量组肝HA含量，硝苯吡啶(nifedipine, Nif)无论早期治疗组还是晚期治疗组均能显著降低大鼠实验性肝纤维化肝HA含量，而且Cin及Nif均以大剂量组的降低作用最为明显，说明一定量的Cin及Nif能显著降低大鼠肝纤维化异常的肝HA含量，阻止和延缓HA增高，对肝纤维化还可能有一定逆转作用.
, 百拇医药
3 对肝羟脯氨酸(Hyp)的影响
Hyp是胶原蛋白的主要成分，其他蛋白几乎不含Hyp.在肝纤维化过程中，肝Hyp含量随着胶原的消长而相应变化，故肝Hyp含量可作为评估肝胶原含量和肝纤维化程度的可靠指标.研究发现[7，8]，大剂量Cin及Nif使早期治疗组肝纤维化大鼠Hyp含量降低，在晚期治疗组无明显变化，说明Cin及Nif对肝纤维化大鼠肝Hyp含量的影响须在纤维化尚未形成的早期阶段即开始应用，具有良好的抗肝胶原增生效果.此时即使损害肝细胞和造成肝纤维化的因素依然存在，早期应用仍可望延缓肝纤维化胶原的产生和发展进程，这种作用与Cin及Nif的剂量有一定关系，大剂量组效果更明显.
4 对肝氨基葡萄糖苷酶(β-NAG)的影响
β-NAG是溶酶体水解酶，能分解基质成分中的葡萄糖氨基多糖.在肝纤维化疾病中，血清和肝组织的β-NAG活性增高是由于肝纤维化活跃程度增高所致.车建途[7，8]等发现，与模型对照组比较，Nif早期和晚期治疗组的大剂量组β-NAG活性明显降低，提示一定剂量的Nif能减轻肝纤维化的活跃程度，而Cin晚期治疗大剂量组肝总β-NAG活性明显降低，早期治疗组则无明显变化，说明Cin对大鼠肝纤维化肝总β-NAG活性的影响，以肝纤维化已形成时给药明显，显示Cin能抑制已形成的肝纤维化活跃程度.
, 百拇医药
5 对成纤维细胞的影响
成纤维细胞是参与肝纤维化形成的主要细胞之一，它能大量合成和分泌胶原蛋白、纤维蛋白结合素、HA及层连素等结缔组织基质成分.它的生长增殖对肝纤维化的形成具有不可忽视的作用.刘乃丰[9]发现维拉帕米(verapamil, Ver)能抑制培养的人胚肺成纤维细胞DNA、RNA和蛋白质合成，表现为DNA含量明显低于对照组，细胞多数集中在DNA合成前的G0/G1期，而DNA合成的S期和细胞分裂前、分裂时的G2+M期的细胞数量则明显减少，细胞有丝分裂指数较对照组降低，培养液中Hyp、HA含量降低，提示Ver可抑制成纤维细胞的生长、增殖和分泌结缔组织成分.Ca2+与成纤维细胞的生长、增殖密切相关，刘海林[10]等发现Cin可抑制人成纤维细胞胶原合成，由于Cin属哌嗪类衍生物，主要阻断细胞外Ca2+内流，提示细胞外Ca2+内流对成纤维细胞的胶原合成具有重要作用，从而进一步阐明了CCB抗纤维化的机理.
, 百拇医药
6 对肝脏炎症、细胞变性坏死的影响
炎症及肝细胞损伤是肝纤维化的启动因素，阻断其发生、发展必然有助于削弱肝纤维化的发生倾向.研究表明[5，11]，对CCl4诱导的大鼠肝纤维化，Tet及Ver治疗后炎性细胞浸润、细胞变性 坏死均较对照组明显减轻或消失，无1只有假小叶形成，而对照组于14周后多数形成假小叶.Cutrin[2]发现Nif能减轻实验性鼠肝硬变损伤，减少炎症浸润及肝细胞坏死.Tet治疗6月后还可使慢性肝病患者汇管区炎细胞浸润明显减轻或消失，部分患者纤维化消失.以上研究说明CCB可减轻炎症及肝细胞损伤，有一定的抗肝纤维化作用.
7 对肝内胶原纤维增生的影响
胶原，尤其是Ⅰ，Ⅲ，Ⅳ型胶原过度沉积是肝纤维化的主要病理改变，胶原沉积使肝窦壁结构发生改变，加重肝脏损害，所以抑制这些胶原合成与沉积是抗肝纤维化的关键.免疫组化检查显示[5，11]：Tet及Ver可使CCl4诱导的实验性肝纤维化大鼠Ⅰ，Ⅲ，Ⅳ型胶原沉积减少.经图象处理技术也显示：胶原纤维与弹力纤维面积明显少于对照组，治疗组实验动物无肝纤维化发生.在慢性肝病患者的研究中也有类似发现[4，5]，尤以急性肝炎恢复期和慢性肝病早期效果显著，部分患者肝纤维化消失或部分消失，说明CCB可通过抑制胶原沉积，促进其吸收，减轻及逆转肝纤维化.
, 百拇医药
8 对肝脏储脂细胞(FSC)的影响
FSC是肝纤维化发生和发展过程中的主要参与细胞，在一系列致病因子的作用下，FSC大量增殖并转化为肌纤维母细胞，合成并分泌大量细胞外基质，如Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ型胶原纤维，纤维结合素、层连素、蛋白聚糖等，导致肝纤维化.研究发现[5，6]，随着肝纤维化发展，FSC数目增多，面积增大，胞浆丰富，线粒体、内质网及高尔基体发达，因此FSC在肝纤维化的形成和发 展中起中心作用.用Tet及Ver治疗可使FSC数目减少，粗面内质网面积减少，线粒体、高尔基体等产生与分泌胶原的细胞器均受到抑制，说明CCB抗肝纤维化作用部分可能与其抑制FSC增生及向肌纤维母细胞转化有关. 综上所述，CCB在预防和治疗肝纤维化方面具有较好的作用，值得进一步研究和评价，包括CCB抗肝纤维化的机制、扩大临床应用范围及与其他传统抗肝纤维化药物的比较等.
9 参考文献1 Cutrin C. Nifedipine in rat liver cirrhosis. Vet Hum Toxicol,1994;36(1):14-16
, 百拇医药
2 Cutrin C. Effect of nifedipine and s-adenosylmethionine in the liver of rats treated with ccl4 and
ethanol for one month. Life Sci,1992;51(10):113-118
3 李定国，夏维新，陆汉明，等.血清I型前胶原肽在钙通道阻滞剂治疗肝纤维化中的意义.
中华内科杂志，1990；29(8)：453-456
4 权启镇，徐俊，齐风，等.汉防己甲素对肝硬化患者血清透明质酸及III型前胶原肽含量的影响.
上海医学，1993；16(10)：562-564
, 百拇医药 5 权启镇，孙自勤，李定国，等.钙拮抗剂抗肝纤维化的实验与临床研究.新消化病学杂志，1994；2(4)：221-224
6 孙自勤，王要军，权启镇，等.汉防己甲素对大鼠实验性肝纤维化的防治作用.新消化病学杂志，1994；2(1)：19-20
7 车建途，陆汉明，李定国，等.硝苯啶对大鼠肝纤维化肝透明质酸、羟脯氨酸及氨基葡萄糖苷酶的影响.
中国医学科学院学报，1994；16(1)：35-38
8 车建途，陆汉明，李定国，等.脑益嗪对大鼠肝纤维化肝透明质酸、羟脯氨酸及N-乙酰-β-氨基葡萄糖苷酶活性的影响.
上海第二医科大学学报，1994；14(1)：28-30
9 刘乃丰.维拉帕米抑制细胞DNA、RNA和蛋白质合成的作用.浙江医科大学学报，1990；19(3)：107-110
10 刘海林，陆汉明，李定国，等.桂利嗪、尼卡地平对人成纤维细胞胶原合成的影响.中国药理学通报，1994；10(4)：308-310
11 王要军，孙自勤，权启镇，等.汉防己甲素治疗大鼠实验性肝纤维化的研究.临床肝胆病杂志，1993；9(增刊)：40-41, 百拇医药