癌基因c-erbB-2与MG-3c7抗原在胃癌中的表达
解放军81医院 江苏省南京市 210002
项目负责人:张苏玲
收稿日期:1995-06-25
C-erbB-2 oncogene and MG-3c7 antigen expression in gastric carcinoma
Su-Ling Zhang, Hui-Ying Chen, Dian-Qian Zhang and Wen-Hu Liu
Chinese PLA 81 Hospital , Nanjing 210002 China
Abstract
, 百拇医药
AIMS To study the c-erbB-2 oncogene and MG-3c7 antigen expressions in gastric carcinoma.
METHODS Fifty-one surgically resected gastric adenocarcinoma and 10 normal gastric tissues were examined for the expression of c-erbB-2 oncoprotein and MG-3c7 antigen using immunohistochemical ABC method.
RESULTS The c-erbB-2 and MG-3c7 expressions were confined to gastric tubular adenocarcinoma which was well and moderately differentiated. The positivity rates were 52%(12/23) and 83%(25/30) respectively. C-erbB-2 prote in and MG-3c7 antigen were expressed in gastric adenocarcinoma (16% and 41.6% respectively). However, the signet-ring cell carcinoma, mucinous adenocarcinoma and normal gastric tissues were negative staining.
, 百拇医药
CONCLUSIONS The positive expression of c-erbB-2 and MG-3c7indicates that gastric carcinoma is well differentiated, and it is helpful in diagnosis.
Subject Headings stomach neoplasms oncogene c-erbB-2MG-3c7 antigen
Zhang SL, Chen HY, Zhang DQ,Liu WH.C-erbB-2 oncogene and MG-3c7 antigenexpression in gastric carcinoma.Xin Xiaohuabingxue Zazhi,1995；3(4):195-196
摘要
, 百拇医药
目的 从组织形态学及分子免疫学角度探讨癌基因c-erbB-2与MG-3c7抗原在胃癌的表达.
方法 应用免疫组织化学技术，对51例胃癌，10例正常胃组织进行了癌基因c-erbB与MG-3c7抗原的检测.
结果 高中分化型胃管状乳头状腺癌中c-erbB-2与MG-3c7的强阳性表达率为52%(12/23)和83%(25/30)，胃腺癌为16%(1/6)与41.6%(5/12).印戒细胞癌、粘液腺癌与正常胃组织为阴性反应.
结论 c-erbB-2与MG-3c7的阳性表达提示胃癌的分化较好，有助于胃癌的诊断研究.
主题词 胃肿瘤;癌基因c-erbB-2;MG-3c7抗原
, http://www.100md.com
张苏玲,陈惠英,张佃乾,刘文虎.癌基因c-erbB-2与MG-3c7抗原在胃癌中的表达.新消化病学杂志，1995；3(4):195-196
胃癌基因的研究已进展到从分子生物学角度去阐明胃癌的发生与发展.我们选用癌基因c-erbB-2与本室自制的抗人胃管状腺癌单克隆抗体MG-3c7，对各型胃癌组织进行免疫酶染色，分析两种标志物与肿瘤组织形态学改变的相关性.
1 材料和方法
1.1 材料 组织标本取胃癌手术切除标本51例及正常胃组织10例.经石蜡包埋后制备切片.抗人胃管状腺癌单克隆抗体MG-3c7系我室制备、纯化后，效价1:200.兔抗人c-erbB-2(1:200)，购自上海中达医学应用研究所.鼠、兔ABC-HRP试剂盒，购自上海华美生化试剂公司.
1.2 方法 石蜡切片经烤片、脱蜡、水化后，0.3% H2O2-甲醇液，15min去内源酶.5%牛血清白蛋白封闭.组织切片分两组，分别加入兔抗人c-erbB-2与鼠抗人MG-3c7 McAb，37℃孵育3h.生物素化羊抗兔-IgG，羊抗鼠-IgG，37℃孵育2h.兔和鼠ABC-HRP分别作用1h.DAB显色液于显微镜下控制显色，终止反应后，苏木素复染、脱水、透明、封片.染色步骤中各步间均用001mol/L pH 7.4磷酸盐缓冲液洗涤3次.
, 百拇医药
1.3 结果判断 参照阳性细胞百分率4级判断原则[1]及阳性细胞染色定性判断[2]拟定判断指标为：(-)细胞无阳性染色或与背景一致.(+)1%-9%细胞呈浅棕色弱阳性反应.(++)10%-49% 细胞呈棕色阳性反应.(+++)50%-100%细胞呈深棕色强阳性反应.(++)-(+++)为强阳性反应，具有诊断意义.
2 结果
2.1 癌基因c-erbB-2 与抗人胃管状腺癌单抗MG-3c7相关抗原在胃癌各组织学类型中的表达与分布情况见表1.
表1 c-erbB-2与MG-3c7在胃癌组织中的分布
, 百拇医药
2.2 c-erbB-2与MG-3c7的阳性表达率与胃癌分化程度的关系 见表2.
表2 c-erbB-2与MG-3c7阳性与胃癌分化程度的关系
经卡方检验，c-erbB-2组高中分化与低分化间有显著性差异(P<0.025)，MG-3c7组高中分化与低分化间有显著性差异(P<0.05). 染色结果示：c-erbB-2在胃癌组织中主要分布于癌细胞膜上，少部分在细胞浆中.MG-3c7主要分布于癌细胞浆中，阳性细胞呈深棕色反应.胃印戒细胞癌、粘液腺癌、正常胃粘膜在本实验中均为阴性反应.
, 百拇医药
图1 胃管状腺癌，MG-3c7强阳性，主要分布于细胞浆(×400)
图2 胃管状腺癌，c-erbB-2阳性，主要分布于细胞膜(×400)
3 讨论
癌基因c-erbB-2为编码一组生长因子受体，其序列与表皮生长因子受体(EGF-R)相似,它具有酪氨酸蛋白激酶活性，其蛋白产物系与细胞膜结合的磷酸糖蛋白[3].国内外文献对c-erbB-2在乳腺癌、卵巢癌中的过度表达论述较多,而对胃癌中基因的表达研究较少[1，4].我们运用研制的抗人胃管状腺癌单抗MG-3c7与抗人癌基因c-erbB-2抗体同时对一组胃癌，尤其是胃管状乳头状腺癌，进行了免疫组化研究,分析了癌基因的表达与肿瘤的促发和进展的相互关系.染色结果显示癌基因c-erbB-2以膜反应为主，而MG-3c7则以细胞浆着染为主.两者的相应表达产物反映出不同的形态学特点，将有助于对胃癌的细胞表型及恶性行为作进一步的分析研究.同时实验还观察到c-erbB-2与MG-3c7分别在高中分化型胃管状乳头状腺癌中具有一定的特异性，阳性符合率分别为52%与83%.而印戒细胞癌及粘液腺癌两种标志物均未出现阳性表达.有文献报道，c-erbB-2基因在肠型胃癌、高中分化型胃癌中的阳性表达率显著升高，常在19%-55%[3].本文实验结果与此相符.实验结果还表明，c-erbB-2与MG-3c7的表达与胃癌的分化程度有着密切的关系，其分化程度与两种标志物的表达成正比(P<0.025，P<0.05).由此可见MG-3c7与c-erbB-2在形态学与免疫学上存有一定的共性与异质性，可联合用于胃癌的分子生物学诊断研究中. 高中分化型胃管状腺癌的癌细胞异型性较高，核分裂象多见.细胞膜表型c-erbB-2的过度表达，并非预示肿瘤发展至某个阶段或正维持着某种恶性性状，而是提示这一类肿瘤的预后较好，并对化疗药物不敏感，这一点与其他肿瘤不同[5].因此MG-3c7相关抗原与c-erbB-2蛋白产物的共同出现及强阳性表达，可估价肿瘤的分化程度及预后.
, 百拇医药
4 参考文献1 Hellquist HB,Karlson MG, Nilsson C, et al. Salivary ductcarcinoma-ahighly aggressive
salivary gland tumour with over expression of c-erbB-2.J Pathol, 1994;172(1):35-44
2 张苏玲，王建一，闫新文，等.抗人乳腺癌单克隆抗体BG6的免疫组化研究及应用.中华病理学杂志，1989；18(1)：59-61
3 梁建昌，田伏三卅.癌基因、抗癌基因与胃癌异质性研究进展.国外医学肿瘤学分册，1994；21(3)：134-135
, 百拇医药
4 Arnaout AH, Dawson PM, Soomro S, et al. HER2(c-erbB-2)oncoproteinexpression in colorectal adenocar
cinoma: an immunohistological study usingthree different antibodies. J Clin Pathol, 1992;45(13):726-727
5 Hilton DA, West KP. C-erbB-2 oncogene product expression and prognosisin gastric carcinoma.
J clin Pathol, 1992;45(8):454-456, 百拇医药
项目负责人:张苏玲
收稿日期:1995-06-25
C-erbB-2 oncogene and MG-3c7 antigen expression in gastric carcinoma
Su-Ling Zhang, Hui-Ying Chen, Dian-Qian Zhang and Wen-Hu Liu
Chinese PLA 81 Hospital , Nanjing 210002 China
Abstract
, 百拇医药
AIMS To study the c-erbB-2 oncogene and MG-3c7 antigen expressions in gastric carcinoma.
METHODS Fifty-one surgically resected gastric adenocarcinoma and 10 normal gastric tissues were examined for the expression of c-erbB-2 oncoprotein and MG-3c7 antigen using immunohistochemical ABC method.
RESULTS The c-erbB-2 and MG-3c7 expressions were confined to gastric tubular adenocarcinoma which was well and moderately differentiated. The positivity rates were 52%(12/23) and 83%(25/30) respectively. C-erbB-2 prote in and MG-3c7 antigen were expressed in gastric adenocarcinoma (16% and 41.6% respectively). However, the signet-ring cell carcinoma, mucinous adenocarcinoma and normal gastric tissues were negative staining.
, 百拇医药
CONCLUSIONS The positive expression of c-erbB-2 and MG-3c7indicates that gastric carcinoma is well differentiated, and it is helpful in diagnosis.
Subject Headings stomach neoplasms oncogene c-erbB-2MG-3c7 antigen
Zhang SL, Chen HY, Zhang DQ,Liu WH.C-erbB-2 oncogene and MG-3c7 antigenexpression in gastric carcinoma.Xin Xiaohuabingxue Zazhi,1995；3(4):195-196
摘要
, 百拇医药
目的 从组织形态学及分子免疫学角度探讨癌基因c-erbB-2与MG-3c7抗原在胃癌的表达.
方法 应用免疫组织化学技术，对51例胃癌，10例正常胃组织进行了癌基因c-erbB与MG-3c7抗原的检测.
结果 高中分化型胃管状乳头状腺癌中c-erbB-2与MG-3c7的强阳性表达率为52%(12/23)和83%(25/30)，胃腺癌为16%(1/6)与41.6%(5/12).印戒细胞癌、粘液腺癌与正常胃组织为阴性反应.
结论 c-erbB-2与MG-3c7的阳性表达提示胃癌的分化较好，有助于胃癌的诊断研究.
主题词 胃肿瘤;癌基因c-erbB-2;MG-3c7抗原
, http://www.100md.com
张苏玲,陈惠英,张佃乾,刘文虎.癌基因c-erbB-2与MG-3c7抗原在胃癌中的表达.新消化病学杂志，1995；3(4):195-196
胃癌基因的研究已进展到从分子生物学角度去阐明胃癌的发生与发展.我们选用癌基因c-erbB-2与本室自制的抗人胃管状腺癌单克隆抗体MG-3c7，对各型胃癌组织进行免疫酶染色，分析两种标志物与肿瘤组织形态学改变的相关性.
1 材料和方法
1.1 材料 组织标本取胃癌手术切除标本51例及正常胃组织10例.经石蜡包埋后制备切片.抗人胃管状腺癌单克隆抗体MG-3c7系我室制备、纯化后，效价1:200.兔抗人c-erbB-2(1:200)，购自上海中达医学应用研究所.鼠、兔ABC-HRP试剂盒，购自上海华美生化试剂公司.
1.2 方法 石蜡切片经烤片、脱蜡、水化后，0.3% H2O2-甲醇液，15min去内源酶.5%牛血清白蛋白封闭.组织切片分两组，分别加入兔抗人c-erbB-2与鼠抗人MG-3c7 McAb，37℃孵育3h.生物素化羊抗兔-IgG，羊抗鼠-IgG，37℃孵育2h.兔和鼠ABC-HRP分别作用1h.DAB显色液于显微镜下控制显色，终止反应后，苏木素复染、脱水、透明、封片.染色步骤中各步间均用001mol/L pH 7.4磷酸盐缓冲液洗涤3次.
, 百拇医药
1.3 结果判断 参照阳性细胞百分率4级判断原则[1]及阳性细胞染色定性判断[2]拟定判断指标为：(-)细胞无阳性染色或与背景一致.(+)1%-9%细胞呈浅棕色弱阳性反应.(++)10%-49% 细胞呈棕色阳性反应.(+++)50%-100%细胞呈深棕色强阳性反应.(++)-(+++)为强阳性反应，具有诊断意义.
2 结果
2.1 癌基因c-erbB-2 与抗人胃管状腺癌单抗MG-3c7相关抗原在胃癌各组织学类型中的表达与分布情况见表1.
表1 c-erbB-2与MG-3c7在胃癌组织中的分布
| 组织学类型 | c-erbB-2 | 阳性(%) | MG-3c7[ | 阳性(%) | ||||||||
| n | +++ | ++ | + | - | n | +++ | ++ | + | - | |||
| 管状乳头状 | ||||||||||||
| 腺癌 | 23 | 5 | 7 | 1 | 10 | 52.0 | 30 | 12 | 13 | 5 | 83.0 | |
| 腺癌 | 6 | 0 | 1 | 2 | 3 | 16.0 | 12 | 3 | 2 | 2 | 5 | 41.6 |
| 印戒细胞癌 | 3 | 0 | 0 | 0 | 3 | 0.0 | 2 | 0 | 0 | 0 | 2 | 0.0 |
| 粘液腺癌 | 2 | 0 | 0 | 1 | 1 | 0.0 | 7 | 0 | 0 | 0 | 7 | 0.0 |
| 正常胃粘膜 | 6 | 0 | 0 | 2 | 4 | 0.0 | 10 | 0 | 0 | 2 | 8 | 0.0 |
, 百拇医药
2.2 c-erbB-2与MG-3c7的阳性表达率与胃癌分化程度的关系 见表2.
表2 c-erbB-2与MG-3c7阳性与胃癌分化程度的关系
| 分化程度 | c-erbB-2 | MG-3c7 | ||
| n | 阳性率(%) | n | 阳性率(%) | |
| 高中分化 | 23 | 52.1 | 14 | 71.4 |
| 低 分 化 | 11 | 9.0 | 10 | 30.0 |
经卡方检验，c-erbB-2组高中分化与低分化间有显著性差异(P<0.025)，MG-3c7组高中分化与低分化间有显著性差异(P<0.05). 染色结果示：c-erbB-2在胃癌组织中主要分布于癌细胞膜上，少部分在细胞浆中.MG-3c7主要分布于癌细胞浆中，阳性细胞呈深棕色反应.胃印戒细胞癌、粘液腺癌、正常胃粘膜在本实验中均为阴性反应.
, 百拇医药
图1 胃管状腺癌，MG-3c7强阳性，主要分布于细胞浆(×400)
图2 胃管状腺癌，c-erbB-2阳性，主要分布于细胞膜(×400)
3 讨论
癌基因c-erbB-2为编码一组生长因子受体，其序列与表皮生长因子受体(EGF-R)相似,它具有酪氨酸蛋白激酶活性，其蛋白产物系与细胞膜结合的磷酸糖蛋白[3].国内外文献对c-erbB-2在乳腺癌、卵巢癌中的过度表达论述较多,而对胃癌中基因的表达研究较少[1，4].我们运用研制的抗人胃管状腺癌单抗MG-3c7与抗人癌基因c-erbB-2抗体同时对一组胃癌，尤其是胃管状乳头状腺癌，进行了免疫组化研究,分析了癌基因的表达与肿瘤的促发和进展的相互关系.染色结果显示癌基因c-erbB-2以膜反应为主，而MG-3c7则以细胞浆着染为主.两者的相应表达产物反映出不同的形态学特点，将有助于对胃癌的细胞表型及恶性行为作进一步的分析研究.同时实验还观察到c-erbB-2与MG-3c7分别在高中分化型胃管状乳头状腺癌中具有一定的特异性，阳性符合率分别为52%与83%.而印戒细胞癌及粘液腺癌两种标志物均未出现阳性表达.有文献报道，c-erbB-2基因在肠型胃癌、高中分化型胃癌中的阳性表达率显著升高，常在19%-55%[3].本文实验结果与此相符.实验结果还表明，c-erbB-2与MG-3c7的表达与胃癌的分化程度有着密切的关系，其分化程度与两种标志物的表达成正比(P<0.025，P<0.05).由此可见MG-3c7与c-erbB-2在形态学与免疫学上存有一定的共性与异质性，可联合用于胃癌的分子生物学诊断研究中. 高中分化型胃管状腺癌的癌细胞异型性较高，核分裂象多见.细胞膜表型c-erbB-2的过度表达，并非预示肿瘤发展至某个阶段或正维持着某种恶性性状，而是提示这一类肿瘤的预后较好，并对化疗药物不敏感，这一点与其他肿瘤不同[5].因此MG-3c7相关抗原与c-erbB-2蛋白产物的共同出现及强阳性表达，可估价肿瘤的分化程度及预后.
, 百拇医药
4 参考文献1 Hellquist HB,Karlson MG, Nilsson C, et al. Salivary ductcarcinoma-ahighly aggressive
salivary gland tumour with over expression of c-erbB-2.J Pathol, 1994;172(1):35-44
2 张苏玲，王建一，闫新文，等.抗人乳腺癌单克隆抗体BG6的免疫组化研究及应用.中华病理学杂志，1989；18(1)：59-61
3 梁建昌，田伏三卅.癌基因、抗癌基因与胃癌异质性研究进展.国外医学肿瘤学分册，1994；21(3)：134-135
, 百拇医药
4 Arnaout AH, Dawson PM, Soomro S, et al. HER2(c-erbB-2)oncoproteinexpression in colorectal adenocar
cinoma: an immunohistological study usingthree different antibodies. J Clin Pathol, 1992;45(13):726-727
5 Hilton DA, West KP. C-erbB-2 oncogene product expression and prognosisin gastric carcinoma.
J clin Pathol, 1992;45(8):454-456, 百拇医药