亚甲蓝染色检查幽门螺杆菌
成都军区总医院干部 病房消化病区 四川省 成都市 610083
曹忠铭，男，1943-06-26生，山西省祁县人，汉族.主要从事消化内科、消化内镜、老年病的诊治研究.现任四川省消化内镜学会副主任委员，消化内科学会委员，成都军区医学科学委员会委员，消化专业组副组长.发表学术论文50篇，编著《中国老年之宝》等三部专著，获科技进步奖15项，其中国家二等奖1项，军队三等奖3项，军队4等奖11项.
项目负责人 曹忠铭,610083,四川省 成都市,四川省成都市成都军区总医院干二科，成都军区总医院干部病房消化病区 Tel: 028- 6680139-62861(办)，3571363(宅)
收搞日期 1995-09-09
The detection of Helicobacter pylori by methylene blue staining
, http://www.100md.com
Zhong-Ming Cao, Kuan-Yu Liu, Zhi-Liang Yin， Hong-Zhi Luo, Wen-Zhi You and Zhi-Yuan Chen
General Hospital of Chinese PLA Chengdu Command Area, Chengdu 610083 China
Abstract
AIMS To search for a plain and prompt method in detection of Helicobacter pylori.
METHODS Methylene blue stain of the biopsy tissues of 150 gastric mucosa was performed and compared with the urea enzyme test, culture of bacteria, Warthin-starry Ag-stain and HE stain.
, 百拇医药
RESULTS Methylene blue stain was a plain and prompt method, with a better contrast of bacteria and back-ground tissues.
CONCLUSIONS Methylene blue stain is worth of expanding.
Keywords methylene blue Helicobacter pylori gastric mucosa
Cao ZM, Liu KY, Yiu ZL， Luo HZ, You WZ,Chen ZY.The detection of Helicobacter pylori by methylene blue staining.
, http://www.100md.com
Xin Xiaohuabingxue Zazhi,1996；4(3)：140-141
摘要
目的 寻找一个简便快速效果好的幽门螺杆菌检查方法.
方法 对150例胃粘膜活检组织切片进行亚甲蓝染色并与尿素酶试验，细菌培养，Warthin-Starry银染色法及HE染色法进行对比.
结果 亚甲蓝染色法简便，快速，细菌与背景组织对比良好.
结论 组织切片亚甲蓝染色法值得推广应用.
关键词 亚甲蓝;幽门螺杆菌;胃粘膜
, 百拇医药
曹忠铭,刘宽宇,尹志良,罗洪志,游文智,陈志远.亚甲蓝染色检查幽门螺杆菌.新消化病学杂志，1996；4(3)：140-141
1983年Marshall[1]报告胃幽门螺杆菌(Hylicobacter pylori，Hp)以来，已明确Hp与慢性胃炎，消化性溃疡的发生、发展及复发
相关[2]，近年甚至认为Hp感染与胃癌相关[3].因而寻找一个简便而有效的Hp检查方法日益受到重视.我们在实践中摸索出的亚甲蓝染色法效果较好，与尿素酶试验、细菌培养、Warthin-Starry银染色法及HE染色法进行了比较.现报告如下.
1 对象和方法
, 百拇医药
1.1 对象 无选择地对因有消化不良等上消化道症状来院作内镜检查者作快速Hp尿素酶试验，(用福建三强公司Hp药盒).分别取尿素酶试验阳性者100例及阴性者50例作胃窦粘膜活组织细菌培养及组织切片HE染色，Warthin-Starry银染色及亚甲蓝染色检查Hp.
1.2 细菌培养 取胃粘膜活组织研碎，于1h内接种在加有两性霉素、万古霉素、TMP的血琼脂培养基上，置37℃和微需氧条件下培养4-7d.3d后即开始观察细菌生长情况；根据菌落特征，革兰染色，尿素酶试验等实验加以签定，若7d后培养仍无细菌生长，则为阴性.
1.3 HE及Warthin-Starry银染色 石蜡切片脱蜡入水后常规HE染色，Warthin-Starry银染色参照Warthin法进行[4].
, 百拇医药
1.4 亚甲蓝染色 石蜡切片用0.03%亚甲蓝溶液染0.5-2min(视染液新旧而定)，然后自来水清洗，再常规脱水，透明树胶封固，最后阅片.
2 结果
经尿素酶试验、Warthin-Starry染色、亚甲蓝染色、HE染色及细菌培养等5种方法检查Hp结果(表1).亚甲蓝染色镜下观察Hp呈兰色，胃粘膜上皮、胞浆及分泌物呈淡兰色，固有膜、结缔组织呈深兰色.Hp呈弯曲状、S状、短弧状及杆状，位于胃小凹或胃小凹分泌物中，亦可见于上皮细胞浆中.HE染色细菌着色浅淡，镜检时需非常仔细寻找才能发现.Warthin-Starry银染色细菌被染成浅黑色，组织背景呈黄棕色，易于辨认.
表1 组织切片染色方法检查Hp结果
, 百拇医药
3 讨论
在内镜检查的同时取粘膜活组织作Hp检查是目前常用途径.其中尿素酶试验方法简便但不能直接观察细菌，可出现假阳性及假阴性，常被用作初步筛选之用，或被没有病理检查条件的基层单位所采用.细菌培养结果可靠，但费时太久，亦有假阳性存在，除非对已知有Hp感染而常规治疗失败者，一般临床未作常规检查.胃粘膜活组织切片染色镜检，以其直观准确，不需在病理活检以外另取活组织而受到重视.但常规病理切片的HE染色时Hp着色浅淡，不仅观察困难而且常容易漏诊.经典的Warthin-Starry银染色法，细菌与组织对比度强，观察容易准确率高，但染色过程繁琐、费时，显色时间也较难掌握，也很难作为临床常规使用.我们在实践中摸索的亚甲蓝染色法，染色操作简便、快速，细菌与组织背景对比明显，用高倍光学显微镜即可清晰地辨认出Hp来，结果可靠、准确率高，值得推广应用.
4 参考文献
, http://www.100md.com
1 Marshall BJ. Unidentified curved bacilli on gastric epithelium in active chronic gastritis.Lancet, 1983;1(836):1273-1275
2 Tytgat CNJ, Noach LA, Rauwa EAJ. Helicobacter pylori infection and duodenal ulcer disease. Gastroenterol Clin North Am,1993;22(1):127-139
3 Parsonnet J. Helicobacter pylori and the carcinoma of the stomach. Gastroenterol Clin North Am, 1993;22(1):89-104
4 Bancvott JD, Sttevens A. Theory and practice of histological techniques. Spottiswoode Ballantyne Press, 1977:215-218, 百拇医药
曹忠铭，男，1943-06-26生，山西省祁县人，汉族.主要从事消化内科、消化内镜、老年病的诊治研究.现任四川省消化内镜学会副主任委员，消化内科学会委员，成都军区医学科学委员会委员，消化专业组副组长.发表学术论文50篇，编著《中国老年之宝》等三部专著，获科技进步奖15项，其中国家二等奖1项，军队三等奖3项，军队4等奖11项.
项目负责人 曹忠铭,610083,四川省 成都市,四川省成都市成都军区总医院干二科，成都军区总医院干部病房消化病区 Tel: 028- 6680139-62861(办)，3571363(宅)
收搞日期 1995-09-09
The detection of Helicobacter pylori by methylene blue staining
, http://www.100md.com
Zhong-Ming Cao, Kuan-Yu Liu, Zhi-Liang Yin， Hong-Zhi Luo, Wen-Zhi You and Zhi-Yuan Chen
General Hospital of Chinese PLA Chengdu Command Area, Chengdu 610083 China
Abstract
AIMS To search for a plain and prompt method in detection of Helicobacter pylori.
METHODS Methylene blue stain of the biopsy tissues of 150 gastric mucosa was performed and compared with the urea enzyme test, culture of bacteria, Warthin-starry Ag-stain and HE stain.
, 百拇医药
RESULTS Methylene blue stain was a plain and prompt method, with a better contrast of bacteria and back-ground tissues.
CONCLUSIONS Methylene blue stain is worth of expanding.
Keywords methylene blue Helicobacter pylori gastric mucosa
Cao ZM, Liu KY, Yiu ZL， Luo HZ, You WZ,Chen ZY.The detection of Helicobacter pylori by methylene blue staining.
, http://www.100md.com
Xin Xiaohuabingxue Zazhi,1996；4(3)：140-141
摘要
目的 寻找一个简便快速效果好的幽门螺杆菌检查方法.
方法 对150例胃粘膜活检组织切片进行亚甲蓝染色并与尿素酶试验，细菌培养，Warthin-Starry银染色法及HE染色法进行对比.
结果 亚甲蓝染色法简便，快速，细菌与背景组织对比良好.
结论 组织切片亚甲蓝染色法值得推广应用.
关键词 亚甲蓝;幽门螺杆菌;胃粘膜
, 百拇医药
曹忠铭,刘宽宇,尹志良,罗洪志,游文智,陈志远.亚甲蓝染色检查幽门螺杆菌.新消化病学杂志，1996；4(3)：140-141
1983年Marshall[1]报告胃幽门螺杆菌(Hylicobacter pylori，Hp)以来，已明确Hp与慢性胃炎，消化性溃疡的发生、发展及复发
相关[2]，近年甚至认为Hp感染与胃癌相关[3].因而寻找一个简便而有效的Hp检查方法日益受到重视.我们在实践中摸索出的亚甲蓝染色法效果较好，与尿素酶试验、细菌培养、Warthin-Starry银染色法及HE染色法进行了比较.现报告如下.
1 对象和方法
, 百拇医药
1.1 对象 无选择地对因有消化不良等上消化道症状来院作内镜检查者作快速Hp尿素酶试验，(用福建三强公司Hp药盒).分别取尿素酶试验阳性者100例及阴性者50例作胃窦粘膜活组织细菌培养及组织切片HE染色，Warthin-Starry银染色及亚甲蓝染色检查Hp.
1.2 细菌培养 取胃粘膜活组织研碎，于1h内接种在加有两性霉素、万古霉素、TMP的血琼脂培养基上，置37℃和微需氧条件下培养4-7d.3d后即开始观察细菌生长情况；根据菌落特征，革兰染色，尿素酶试验等实验加以签定，若7d后培养仍无细菌生长，则为阴性.
1.3 HE及Warthin-Starry银染色 石蜡切片脱蜡入水后常规HE染色，Warthin-Starry银染色参照Warthin法进行[4].
, 百拇医药
1.4 亚甲蓝染色 石蜡切片用0.03%亚甲蓝溶液染0.5-2min(视染液新旧而定)，然后自来水清洗，再常规脱水，透明树胶封固，最后阅片.
2 结果
经尿素酶试验、Warthin-Starry染色、亚甲蓝染色、HE染色及细菌培养等5种方法检查Hp结果(表1).亚甲蓝染色镜下观察Hp呈兰色，胃粘膜上皮、胞浆及分泌物呈淡兰色，固有膜、结缔组织呈深兰色.Hp呈弯曲状、S状、短弧状及杆状，位于胃小凹或胃小凹分泌物中，亦可见于上皮细胞浆中.HE染色细菌着色浅淡，镜检时需非常仔细寻找才能发现.Warthin-Starry银染色细菌被染成浅黑色，组织背景呈黄棕色，易于辨认.
表1 组织切片染色方法检查Hp结果
| n | 尿素酶试验 | Warthin-Starry银染色 | 亚甲蓝染色 | HE染色 | 细菌培养 |
| 72 | + | + | + | + | + |
| 50 | - | - | - | - | - |
| 16 | + | + | + | - | + |
| 4 | + | + | + | + | - |
| 2 | + | + | + | - | - |
| 6 | + | - | - | - | - |
, 百拇医药
3 讨论
在内镜检查的同时取粘膜活组织作Hp检查是目前常用途径.其中尿素酶试验方法简便但不能直接观察细菌，可出现假阳性及假阴性，常被用作初步筛选之用，或被没有病理检查条件的基层单位所采用.细菌培养结果可靠，但费时太久，亦有假阳性存在，除非对已知有Hp感染而常规治疗失败者，一般临床未作常规检查.胃粘膜活组织切片染色镜检，以其直观准确，不需在病理活检以外另取活组织而受到重视.但常规病理切片的HE染色时Hp着色浅淡，不仅观察困难而且常容易漏诊.经典的Warthin-Starry银染色法，细菌与组织对比度强，观察容易准确率高，但染色过程繁琐、费时，显色时间也较难掌握，也很难作为临床常规使用.我们在实践中摸索的亚甲蓝染色法，染色操作简便、快速，细菌与组织背景对比明显，用高倍光学显微镜即可清晰地辨认出Hp来，结果可靠、准确率高，值得推广应用.
4 参考文献
, http://www.100md.com
1 Marshall BJ. Unidentified curved bacilli on gastric epithelium in active chronic gastritis.Lancet, 1983;1(836):1273-1275
2 Tytgat CNJ, Noach LA, Rauwa EAJ. Helicobacter pylori infection and duodenal ulcer disease. Gastroenterol Clin North Am,1993;22(1):127-139
3 Parsonnet J. Helicobacter pylori and the carcinoma of the stomach. Gastroenterol Clin North Am, 1993;22(1):89-104
4 Bancvott JD, Sttevens A. Theory and practice of histological techniques. Spottiswoode Ballantyne Press, 1977:215-218, 百拇医药