儿童Hp血清学检测的意义
江苏省南京市儿童医院中心实验室 210008
项目负责人 郑金娟.江苏省南京市儿童医院中心实验室 210008收搞日期 1996-02-29
Subject headings Gastrointestinal diseases/microbiology；Helicobacter pylori；/immunology\；Antibodies, bacterial/analysis
主题词 胃肠疾病/微生物学；螺杆菌，幽门/免疫学；抗体，细菌/分析
郑金娟,张广毓,陈正艹二.儿童Hp血清学检测的意义.新消化病学杂志, 1997；5(3)：163
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1993年3月～1995年3月我们应用血清学方法测定[1-2]儿童血清标本1069份，现将调查结果报道如下.
1 对象和方法1.1 对象 收集本院门诊病区选送的血清标本1031份，男564份，女467份；年龄<6个月～14岁，平均6.28岁；病程1个月～10年，平均1.05年；临床症状以胃痛(或腹痛)为主诉，大部分伴有 消化系统症状，如食欲不振、消化不良、恶心呕吐、慢性腹泻及腹胀等.另设健康对照组38例，男23例，女15例，主要为学龄前后儿童，平均年龄5.8岁，近期无消化道 疾患.将1069份血清标本分为4个组，胃肠疾患组340例，经临床体检、上胃肠道钡餐检 查、B超和部分胃电图等检查，证实有胃炎者307例，胃或十二指肠溃疡25例，胃粘膜脱垂8 例；腹痛待查组496例，患儿以上腹部或脐周痛为主诉，伴或不伴有消化系统症状，亦排除了外科疾患；非消化道疾患组195例，包括肾炎、肺炎、低血钾、过敏性紫瘢以及发热待查等；健康儿童对照组38例，30例为市级幼儿园各班幼童，8例是6岁～10岁学龄期儿童.
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1.2 方法 应用美国Bio_Rad公司提供的试剂盒(批号为93-1，94-2，95-1)作间接酶联免疫吸附法测 定(ELISA)，以特异性抗原包被板，待测血清(或浓度标准、质控血清)作为一抗，酶标羊抗人IgG作二抗，TMB作底物显色，硫酸终止反应，在450nm处读取OD值及Hp 浓度结果.我们在原操作基础上作了一些修改.抽取患儿静脉血0.5ml～1ml，立即分 离血清置于-20低温冰箱保存待测.测定当日将患者血清作1:200稀释，每批标本均设立5 个Hp浓度标准(0，12 500，25 000，50 000,10 000U/L)，两个质控血清(阴性及阳性 )，一个空白对照.所有器皿均经严格消毒，试剂于检测当日新鲜配制.
2 结果依据Hp浓度标准判断，如果<12 500U/L为阴性；12 500-20 000U/L之间为可疑阳性，可疑阳性必须在两周后进行复查；>20 000 U/L为阳性；若>40 000 U/L为强阳性；并参考阳性和阴性质控血清的P/N浓度比值必须是≥2:1.1069例儿童血清Hp检测结果表1.以胃肠疾患Hp阳性和强阳性检出率最高，前者为262/340(77.1%)，后者为134/262(51.1%)；腹痛待查次之，两种阳性检出率是280/496(56.5%)和88/280(31.4%)；非消化道疾患和健康儿童阳检率分别为30/195(15.4%)和2/38(5.3% )，均未能检出强阳性.
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表1 儿童胃十二指肠疾病血清Hp抗体检测结果
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3 讨论Hp可致胃炎和胃、十二指肠溃疡已为国内外专家们定论[3-4].Bio_Rad公司最新研 制的Hp试剂盒供血清学检测有很高的敏感性(99.4%)、特异性(94.5%)和准确度(97.5%)，我们对1069例血清检测中取得较为满意的结果，测定方法简单、快速及安全，弥补了儿童不能准确主诉的困难. Hp阳性的患儿与年龄[5]、病程[1]及家庭因素[6]有关，这与 其他学者报道相同，6岁～14岁的年长儿、病程在1年以上以及有Hp阳性患者的家庭中，其 发病率明显偏高.血清学测定亦可作为临床诊断、动态观察、治疗效果和随访中的一种 检测手段.
4 参考文献1 涂水平，吴裕火斤.幽门螺旋杆菌的血清学诊断进展及临床价值.国外医学临床生物化学与检验学分册，1993；14(2)：54-58
, 百拇医药
2 潘志君，张振华，许幼如，等.检测幽门弯曲菌抗体IgG ELISA方法的建立及其临床应用.中华消化杂志，1990；10(1)：9-12
3 姚光弼.第九届世界胃肠病学大会概况.国外医学消化系统疾病分册，1991；11(1)：2-6
4 郭飞，陆汉明.幽门螺杆菌和儿童胃肠道疾病.临床儿科杂志，1992；10(4)：258-259
5 Sullivan PB, Thomas JE, Wight DGD, et al. Helicobacter pylori in Gambian children with chronic diarrhoea and malnutrition.
Arch Dis Child, 1990;65(2):189-191
6 Oderda G, Ansaldi N, Ponzetto M, et al. Campylobacter pylori in Families of children with pelapsing gastroduodenal disea
ses due to pylori infection. Am J Gastroenterol, 1988;83(12):1437-1438, 百拇医药(郑金娟 张广毓 陈正艹二)
项目负责人 郑金娟.江苏省南京市儿童医院中心实验室 210008收搞日期 1996-02-29
Subject headings Gastrointestinal diseases/microbiology；Helicobacter pylori；/immunology\；Antibodies, bacterial/analysis
主题词 胃肠疾病/微生物学；螺杆菌，幽门/免疫学；抗体，细菌/分析
郑金娟,张广毓,陈正艹二.儿童Hp血清学检测的意义.新消化病学杂志, 1997；5(3)：163
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1993年3月～1995年3月我们应用血清学方法测定[1-2]儿童血清标本1069份，现将调查结果报道如下.
1 对象和方法1.1 对象 收集本院门诊病区选送的血清标本1031份，男564份，女467份；年龄<6个月～14岁，平均6.28岁；病程1个月～10年，平均1.05年；临床症状以胃痛(或腹痛)为主诉，大部分伴有 消化系统症状，如食欲不振、消化不良、恶心呕吐、慢性腹泻及腹胀等.另设健康对照组38例，男23例，女15例，主要为学龄前后儿童，平均年龄5.8岁，近期无消化道 疾患.将1069份血清标本分为4个组，胃肠疾患组340例，经临床体检、上胃肠道钡餐检 查、B超和部分胃电图等检查，证实有胃炎者307例，胃或十二指肠溃疡25例，胃粘膜脱垂8 例；腹痛待查组496例，患儿以上腹部或脐周痛为主诉，伴或不伴有消化系统症状，亦排除了外科疾患；非消化道疾患组195例，包括肾炎、肺炎、低血钾、过敏性紫瘢以及发热待查等；健康儿童对照组38例，30例为市级幼儿园各班幼童，8例是6岁～10岁学龄期儿童.
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1.2 方法 应用美国Bio_Rad公司提供的试剂盒(批号为93-1，94-2，95-1)作间接酶联免疫吸附法测 定(ELISA)，以特异性抗原包被板，待测血清(或浓度标准、质控血清)作为一抗，酶标羊抗人IgG作二抗，TMB作底物显色，硫酸终止反应，在450nm处读取OD值及Hp 浓度结果.我们在原操作基础上作了一些修改.抽取患儿静脉血0.5ml～1ml，立即分 离血清置于-20低温冰箱保存待测.测定当日将患者血清作1:200稀释，每批标本均设立5 个Hp浓度标准(0，12 500，25 000，50 000,10 000U/L)，两个质控血清(阴性及阳性 )，一个空白对照.所有器皿均经严格消毒，试剂于检测当日新鲜配制.
2 结果依据Hp浓度标准判断，如果<12 500U/L为阴性；12 500-20 000U/L之间为可疑阳性，可疑阳性必须在两周后进行复查；>20 000 U/L为阳性；若>40 000 U/L为强阳性；并参考阳性和阴性质控血清的P/N浓度比值必须是≥2:1.1069例儿童血清Hp检测结果表1.以胃肠疾患Hp阳性和强阳性检出率最高，前者为262/340(77.1%)，后者为134/262(51.1%)；腹痛待查次之，两种阳性检出率是280/496(56.5%)和88/280(31.4%)；非消化道疾患和健康儿童阳检率分别为30/195(15.4%)和2/38(5.3% )，均未能检出强阳性.
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表1 儿童胃十二指肠疾病血清Hp抗体检测结果
| 组别 | n | 阳性 | 可疑阳性 | 阴性 | 阳检率(%) | |
| 强阳性 | 阳性 | |||||
| 胃肠疾患 | 340 | 134 | 128 | 28 | 50 | 77.1 |
| 腹痛待查 | 496 | 88 | 192 | 38 | 178 | 56.5 |
| 非消化道疾患 | 195 | - | 30 | 39 | 156 | 15.4 |
| 健康儿童 | 38 | - | 2 | 2 | 36 | 5.3 |
| 合计 | 1069 | 222 | 352 | 107 | 420 | 53.7 |
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3 讨论Hp可致胃炎和胃、十二指肠溃疡已为国内外专家们定论[3-4].Bio_Rad公司最新研 制的Hp试剂盒供血清学检测有很高的敏感性(99.4%)、特异性(94.5%)和准确度(97.5%)，我们对1069例血清检测中取得较为满意的结果，测定方法简单、快速及安全，弥补了儿童不能准确主诉的困难. Hp阳性的患儿与年龄[5]、病程[1]及家庭因素[6]有关，这与 其他学者报道相同，6岁～14岁的年长儿、病程在1年以上以及有Hp阳性患者的家庭中，其 发病率明显偏高.血清学测定亦可作为临床诊断、动态观察、治疗效果和随访中的一种 检测手段.
4 参考文献1 涂水平，吴裕火斤.幽门螺旋杆菌的血清学诊断进展及临床价值.国外医学临床生物化学与检验学分册，1993；14(2)：54-58
, 百拇医药
2 潘志君，张振华，许幼如，等.检测幽门弯曲菌抗体IgG ELISA方法的建立及其临床应用.中华消化杂志，1990；10(1)：9-12
3 姚光弼.第九届世界胃肠病学大会概况.国外医学消化系统疾病分册，1991；11(1)：2-6
4 郭飞，陆汉明.幽门螺杆菌和儿童胃肠道疾病.临床儿科杂志，1992；10(4)：258-259
5 Sullivan PB, Thomas JE, Wight DGD, et al. Helicobacter pylori in Gambian children with chronic diarrhoea and malnutrition.
Arch Dis Child, 1990;65(2):189-191
6 Oderda G, Ansaldi N, Ponzetto M, et al. Campylobacter pylori in Families of children with pelapsing gastroduodenal disea
ses due to pylori infection. Am J Gastroenterol, 1988;83(12):1437-1438, 百拇医药(郑金娟 张广毓 陈正艹二)