抑癌基因p16和p21在胃癌组织的不同表达
1解放军465医院 辽宁省吉林市 132013
2解放军第四军医大学病理教研室
3空军医学高等专科学校
项目负责人 邬淑杭,解放军465医院 辽宁省吉林市 132013收搞日期 1996-12-20
Subject headings Genes, suppressor, tumor; Stomach neoplasms/genetics
主题词 基因，抑制，肿瘤;胃肿瘤/遗传学
, http://www.100md.com
邬淑杭,隋延仿,金伟,尹丽波.抑癌基因p16和p21在胃癌组织的不同表达.新消化病学杂志, 1997;5(8):539
本文采用免疫组织化学方法对人胃癌组织中抑癌基因p16和p21进行了检测，以探讨二者在胃 癌中表达的意义.
1 材料和方法1.1 材料 将西京医院1994年～1995年间手术证实的80例胃癌标本，40例慢性萎缩性胃炎标本作为研究对象. 病理分型按WHO方法，高分化腺癌16例、中分化腺癌26例、低分化腺癌24例、粘液癌14例. 另选10例正常粘膜标本作对照.
1.2 试剂 实验用兔抗人p16多克隆抗体及鼠抗人p21单克隆抗体购自美国Santa Cruze生物技术公司，S-P免疫组化染色试剂盒购自北京中山生物技术公司.
, 百拇医药
1.3 免疫组织化学染色(S-P法) 石蜡切片常规脱蜡至水，1% H2O2甲醇封闭内源性过氧化物酶30min，依次加入一抗(兔抗人p16多克隆抗体1∶100，鼠抗人p21单克隆抗体1∶100)，4℃过夜)，二抗(生物素化羊抗兔IgG 1∶100，生物素化羊抗鼠 IgG 1∶100，30min)，S-P/HRP(1∶100)复合物30min，上述各步间均以PBS缓冲液振洗3次，每次5min，DAB显色，苏木精复染细 胞核，常规脱水、透明、封片. 实验中以神经胶质细胞癌阳性切片作为阳性对照，用PBS代替一抗作为阴性对照.
2 结果80例胃癌中有25例P16蛋白呈阳性显色，阳性率为31.3%，明显低于癌旁胃组织(35/37)及慢 性萎缩性胃炎(26/40)，阳性物质为棕黄色，大部位于细胞浆中，极少数位于胞核中; P21蛋白有30例呈阳性显色，阳性率为37.5%。亦明显低于癌旁胃组织(45/57)及慢性萎缩性胃炎(32/40)，阳性物质大部位于细胞核中，少数位于胞浆中. 在胃癌中P16和P21均表达的 有20例，均未表达的有45例，P16和P21表达率有较高的一致性. P16阳性率在不同病理类型 间有显著差异(P<0.01)，在分化程度较高的胃癌组织P16阳性率明显高于低分化胃癌.P21阳性率在不同病理类型间则未见显著差异(P>0.05)，P21阳性率高低与胃癌组织分 化程度无关.
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3 讨论细胞周期的正常进行依赖于周期蛋白和抑制蛋白的调节而完成. 现已证实P16蛋白对细 胞周期具有负调节作用，p16基因在食管癌、胰腺癌及脑肿瘤等原发肿瘤中有缺失或高频率的突变[1]，从而确定了p16基因的改变与肿瘤的发生关系密切. p16是CDK4或CDK6的阻滞剂. p21是所有CDKS阻滞剂，其过量表达可以阻止细胞的生长，诱导P21的表达，可以阻止DNA损伤的细胞生长，有利于DNA的修复或细胞凋零的进行. Shiohara等[2]研究发现在肾细胞癌、结肠癌、卵巢癌等都有P21染色体区域的缺失，说明P21的缺失与肿瘤的发生有关. 目前有关抑癌基因p16和p21在胃癌组织中的表达尚未见报道. 本研究表明抑癌基因p16和p21在胃癌组织中的阳性表达率均明显低于相应的癌旁组织及慢性 萎缩性胃炎，提示p16和p21表达减低与胃癌发生密切相关. 在p16表达阳性的胃癌病例中p21 亦呈阳性表达，而p16阴性者p21亦多数未表达，这与文献报道一致[3]. p16和p21都是细胞周期素依赖激酶阻滞剂. p16通过阻滞细胞周期素D复合物的形成抑制细胞生长，p21是广泛的细胞周期素依赖激酶的阻滞剂[4]. 这就显示两者皆是在不同的路径上共同发挥抑癌作用.
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4 参考文献1 Kamb A, Gruis NA, Weaver Feldhaus J, et al. A cell cycle regulator potentially involved in genesis of many tumor types.
Science, 1994;264(5157):436-440
2 Shiohara BM, EI-Deiry WS, Wada M. Absence of WAFI mutations in a variety of human malignancies. Blood, 1994;84(12):3781-3784
3 Wang Y, Becker D. Differential expression of the cyclin-dependent kinase inhibitors p16 and p21 in the human melanocytic system.
Oncogene, 1996;11(12):1069-1075
4 Hall M, Bates S, Peters G. Evidence for different modes of action of cyclin_dependent kinase inhibitors: p15 and p16 bind to kinases,p21 and p27 bind to cyclins. Oncogene, 1995;10(11):1581-1588, http://www.100md.com
2解放军第四军医大学病理教研室
3空军医学高等专科学校
项目负责人 邬淑杭,解放军465医院 辽宁省吉林市 132013收搞日期 1996-12-20
Subject headings Genes, suppressor, tumor; Stomach neoplasms/genetics
主题词 基因，抑制，肿瘤;胃肿瘤/遗传学
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邬淑杭,隋延仿,金伟,尹丽波.抑癌基因p16和p21在胃癌组织的不同表达.新消化病学杂志, 1997;5(8):539
本文采用免疫组织化学方法对人胃癌组织中抑癌基因p16和p21进行了检测，以探讨二者在胃 癌中表达的意义.
1 材料和方法1.1 材料 将西京医院1994年～1995年间手术证实的80例胃癌标本，40例慢性萎缩性胃炎标本作为研究对象. 病理分型按WHO方法，高分化腺癌16例、中分化腺癌26例、低分化腺癌24例、粘液癌14例. 另选10例正常粘膜标本作对照.
1.2 试剂 实验用兔抗人p16多克隆抗体及鼠抗人p21单克隆抗体购自美国Santa Cruze生物技术公司，S-P免疫组化染色试剂盒购自北京中山生物技术公司.
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1.3 免疫组织化学染色(S-P法) 石蜡切片常规脱蜡至水，1% H2O2甲醇封闭内源性过氧化物酶30min，依次加入一抗(兔抗人p16多克隆抗体1∶100，鼠抗人p21单克隆抗体1∶100)，4℃过夜)，二抗(生物素化羊抗兔IgG 1∶100，生物素化羊抗鼠 IgG 1∶100，30min)，S-P/HRP(1∶100)复合物30min，上述各步间均以PBS缓冲液振洗3次，每次5min，DAB显色，苏木精复染细 胞核，常规脱水、透明、封片. 实验中以神经胶质细胞癌阳性切片作为阳性对照，用PBS代替一抗作为阴性对照.
2 结果80例胃癌中有25例P16蛋白呈阳性显色，阳性率为31.3%，明显低于癌旁胃组织(35/37)及慢 性萎缩性胃炎(26/40)，阳性物质为棕黄色，大部位于细胞浆中，极少数位于胞核中; P21蛋白有30例呈阳性显色，阳性率为37.5%。亦明显低于癌旁胃组织(45/57)及慢性萎缩性胃炎(32/40)，阳性物质大部位于细胞核中，少数位于胞浆中. 在胃癌中P16和P21均表达的 有20例，均未表达的有45例，P16和P21表达率有较高的一致性. P16阳性率在不同病理类型 间有显著差异(P<0.01)，在分化程度较高的胃癌组织P16阳性率明显高于低分化胃癌.P21阳性率在不同病理类型间则未见显著差异(P>0.05)，P21阳性率高低与胃癌组织分 化程度无关.
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3 讨论细胞周期的正常进行依赖于周期蛋白和抑制蛋白的调节而完成. 现已证实P16蛋白对细 胞周期具有负调节作用，p16基因在食管癌、胰腺癌及脑肿瘤等原发肿瘤中有缺失或高频率的突变[1]，从而确定了p16基因的改变与肿瘤的发生关系密切. p16是CDK4或CDK6的阻滞剂. p21是所有CDKS阻滞剂，其过量表达可以阻止细胞的生长，诱导P21的表达，可以阻止DNA损伤的细胞生长，有利于DNA的修复或细胞凋零的进行. Shiohara等[2]研究发现在肾细胞癌、结肠癌、卵巢癌等都有P21染色体区域的缺失，说明P21的缺失与肿瘤的发生有关. 目前有关抑癌基因p16和p21在胃癌组织中的表达尚未见报道. 本研究表明抑癌基因p16和p21在胃癌组织中的阳性表达率均明显低于相应的癌旁组织及慢性 萎缩性胃炎，提示p16和p21表达减低与胃癌发生密切相关. 在p16表达阳性的胃癌病例中p21 亦呈阳性表达，而p16阴性者p21亦多数未表达，这与文献报道一致[3]. p16和p21都是细胞周期素依赖激酶阻滞剂. p16通过阻滞细胞周期素D复合物的形成抑制细胞生长，p21是广泛的细胞周期素依赖激酶的阻滞剂[4]. 这就显示两者皆是在不同的路径上共同发挥抑癌作用.
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4 参考文献1 Kamb A, Gruis NA, Weaver Feldhaus J, et al. A cell cycle regulator potentially involved in genesis of many tumor types.
Science, 1994;264(5157):436-440
2 Shiohara BM, EI-Deiry WS, Wada M. Absence of WAFI mutations in a variety of human malignancies. Blood, 1994;84(12):3781-3784
3 Wang Y, Becker D. Differential expression of the cyclin-dependent kinase inhibitors p16 and p21 in the human melanocytic system.
Oncogene, 1996;11(12):1069-1075
4 Hall M, Bates S, Peters G. Evidence for different modes of action of cyclin_dependent kinase inhibitors: p15 and p16 bind to kinases,p21 and p27 bind to cyclins. Oncogene, 1995;10(11):1581-1588, http://www.100md.com