幽门螺杆菌感染与胃癌危险性关系的研究* 祖 毅1 蜀 津2 杨才明1 钟正福2 代红莹3 王 新1 秦光梅1
重庆市第二人民医院 1消化内科 2病理科 3分子生物学室重庆市永川 402160
*本课题获重庆市卫生局科研基金资助(9615)
项目负责人 祖毅重庆市第二人民医院 消化内科 402160
收稿日期 1997-12-05 接收日期 1998-03-06
Subject headings stomach neoplasms/etiology; Helicobacter pylori; Helicobacter infection; gastritis; risck factors; metaplasia; proliferating cell nuclear antigen
, 百拇医药
主题词 胃肿瘤/病因学；螺杆菌，幽门；螺杆菌感染；胃炎；危险因素；化生；增殖细胞核抗原
近年来众多流行病学资料提示，幽门螺杆菌(Helicobacter pylori，Hp)感染与胃癌的发生密切相关. 动物实验证实Hp慢性感染易引起胃粘膜组织恶性转化[1]；慢性萎缩性胃炎、肠化生及不典型增生已被认为是胃癌的危险因素[2]；而胃粘膜细胞增殖力学的变化是胃癌发生与演进的重要细胞学基础[3]. 我们通过对Hp感染与胃粘膜萎缩、肠化生、不典型增生及细胞增殖状态等胃癌危险因素关系的研究，旨在进一步了解Hp感染与胃癌危险性的关系.
1 对象和方法
, 百拇医药
1.1 对象 1996-01/12因上消化道症状在我院行内镜检查的慢性胃炎患者(除外胃大部切除和检查前2mo内接受过抗Hp治疗者)共476例，男305例，女171例，平均年龄47.4岁. 全部病例内镜检查后在胃窦部大、小弯，前、后壁及胃角共取胃粘膜5块.
1.2 方法
1.2.1 细菌学检查 ①Hp尿素酶试验：采用福建三强公司Hp UTSQ-H104快速诊断试剂盒. ②W-S银染色：采用福建三强公司SQ-T1034快速银染药盒(改良W-S法)进行病理切片染色. ③PCR：仪器为美国PE 2400型基因扩增仪，试剂盒及扩增引物为厦门长城生物工程有限公司产品，扩增产物为411BP，操作步骤及条件严格按试剂盒说明书执行. 上述三种方法一项以上阳性判为Hp阳性；全部阴性者判为Hp阴性.
, 百拇医药
1.2.2 组织学检查 活检标本100ml/L甲醛固定，常规制片，HE染色. 慢性胃炎和肠化生分级按全国胃癌病理协作组统一标准. 病理诊断由两位病理医师作出.
1.2.3 胃粘膜细胞动力学检查 以增殖细胞核抗原(PCNA)评价细胞增殖状态. PCNA免疫组化染色采用ABC法，第一抗体购自福建迈新公司抗PCNA(PC10)单克隆抗体，TBS代替第一抗体作阴性对照.
统计学处理 样本均数比较采用t检验，样本率比较采用χ2检验.
2 结果
, 百拇医药
2.1 Hp感染与癌前病变的关系 在476例受检者中，Hp阳性298例(62.6%)，Hp阴性178例(37.4%). 在Hp阳性组中，肠化生发生率为31.2%，显著高于Hp阴性组的19.7%(P<0.01)，Hp与肠化生的OR值为1.9，95% CI为25.9～36.5. Hp阳性组胃粘膜萎缩为13.8%，显著高于Hp阴性组的7.3%(P<0.05)，Hp与萎缩的OR值为2.1，95% CI为9.8～17.8. 而Hp阳性组不典型增生发生率与Hp阴性组无显著差异(表1).
H6.2 Hp感染与肠化生和萎缩程度的关系 Hp阳性组中度和重度肠化生和萎缩的发生率明显高于Hp阴性组，提示Hp感染与胃粘膜肠化生和萎缩程度有明显关系(表2).
2.3 Hp阳性与Hp阴性组癌前病变者年龄比较 Hp阳性的胃粘膜肠化生、萎缩及不典型增生患者的平均年龄较Hp阴性者明显提早(表3).
, http://www.100md.com
表1 Hp阳性和阴性患者三种癌前病变发生率的比较 n (%)
aP<0.05，bP<0.01，vs Hp阴性.
表2 Hp感染与肠化生和胃粘膜萎缩程度的关系n (%)
, http://www.100md.com
aP<0.05 vs Hp阴性.
表3 Hp阳性和阴性的癌前病变患者平均年龄比较
, 百拇医药
aP<0.05，bP<0.01， vs Hp阴性.
2.4 Hp感染对PCNA的影响 从Hp阳性和Hp阴性患者中随机各抽60例进行PCNA免疫组化染色，结果显示Hp阳性组的PCNA标记指数平均为25.6±5.2，显著高于Hp阴性组的20.7±3.6(P<0.01).
3 讨论
尽管众多流行病学资料表明Hp感染可增加胃癌发生的危险性，但其确切作用机制尚不明了. Correa[4]曾提出Hp感染→慢性胃炎→慢性萎缩性胃炎→肠化生及不典型增生→胃癌的假说来阐明Hp感染与胃癌的关系. Hp在普通人群中感染率高达60%，在慢性胃炎中常达80%以上. 不少研究发现约70%～90%的胃癌病例与Hp相关的慢性胃炎有关[5，6]. 一般认为Hp感染主要引起慢性胃炎，作用于胃癌发生的起始阶段而扮演一个“启动子”的作用，但新近研究则发现，Hp感染不仅引起慢性浅表性胃炎，而且也是萎缩性胃炎、肠化生等癌前病变的主要危险因素[7]. 已有足够的流行病学和病理组织学的证据表明，Hp一旦感染，常持续存在，未经治疗则逐渐发展至萎缩性胃炎、肠化生及不典型增生[8]；且Hp感染的持续存在可使萎缩和肠化生提前出现，并可加速肠化生的发展[9]. Rugge et al[6]观察到Hp阳性患者胃粘膜肠化生(特别是Ⅱ型和Ⅲ型肠化)发生率显著高于Hp阴性者；Guarner et al[10]研究表明，Hp与胃粘膜萎缩明显相关，OR值为5.7，95% CI为1.9～16.8；与不典型增生及胃癌的OR值4.0，95% CI为1.1～14.8，Hp感染与研究组中胃粘膜肠化生，萎缩及不典型增生三种癌前病变存在普遍关系. 由此可见，Correa的假设在解释Hp与胃癌关系时似乎较为合理. 本研究显示，Hp阳性者胃粘膜肠化生、萎缩的发生率显著高于Hp阴性者，特别是中度及重度肠化生和萎缩的发生率较Hp阴性者显著增高，而且其肠化生、萎缩及不典型增生三种癌前病变者的平均年龄较Hp阴性者明显提早，提示Hp感染可通过刺激和(或)促进肠化生、萎缩及不典型增生的发生和发展，从而增加胃癌发生的危险性.大量研究表明，细胞增殖加速是人类细胞癌变的普遍机制，细胞增殖加速可增加DNA受损机会；有丝分裂期细胞较静止期细胞更易于受致突、致癌物质损伤而发生癌变[3]. 对胃粘膜细胞增殖力学的研究证实，从正常胃粘膜到萎缩性胃炎、肠化生、不典型增生以致最终发展成胃癌，增殖细胞呈依次递增，因而，胃粘膜细胞增殖力学的变化可视为癌变的早期信号之一[11]. 增殖细胞核抗原(PCNA)又称周期素，是真核细胞DNA合成所必需的一种核蛋白，其合成与表达反映了细胞的增殖状态. 本研究显示，Hp阳性者胃粘膜的PCNA标记指数显著高于Hp阴性者，表明Hp感染加速了胃粘膜细胞的增殖，而这种处于高增殖状态的胃粘膜可能具有较高的癌变危险性.
, 百拇医药
4 参考文献
1 The Eurogast study group. An international association between .Helicobacter pylori infection and gastric cancer.
Lancet, 1993;341(8857):1359-1362
2 Yoshida S, Saito D. Gastric premalignancy and cancer screeing in highrick patients.Am J Gastroenterol, 1996;91(5):839-843
3 Preston-Martin S, Pike MC, Ross RK, Jones PA, Henderson BE. Incresed cell division as a cause of human cancer.
, http://www.100md.com
Cancer Res, 1990;50(23):7415-7421
4 Correa P. Helicobacter pylori and gastric cancinogenesis. Am J Surg Pathol,1995;19(Suppl 1):S37-S43
5 Parsnnet J. Helicobacter pylori infection and risk of gastric cancinoma. Gastroenterol Clin North Am, 1993;22(1):89-104
6 Rugge M, DI Mario F, Cassaro M, Baffa R, Farinati F, Rubio J et al.Pathology of gastric antrum and body association with
, 百拇医药
Helicobacter pylori infection in nonulcerous patients: is the bacterium a pormoter of intestinal metaplasia.
Histopathology, 1993;22(1):9-14
7 Kawaguchi H, Haruma K, Komoto K, Yoshihara M, Sumii K, Kajyama G. Helicobacter pylori infection is the major risk factor for
atrophic gastritis.Am J Gastroenterol,1996;91(5):959-962
8 Sipponen P.Helicobacter pylori: A cohort phenomenon. Am J Surg PAthol,1995;19(Suppl1):S30-S36
, http://www.100md.com
9 Asaka M, Kimura T, Kato M, Kudo M, Miki K, Ogoshi K et al.Possible role of Helicobacter pylori infection in early gastric
cancer development. Cancer,1994;73(11):2691-2694
10 Guarner J, Mohar A, Parsonnet J, Halperin D. The Association of Helicobacter pylori with gastric cancer and preneoplastic
gastric lesions in chiapas, mexico. Cancer,1993;71(2):297-301
11 Brenes F, Ruiz B, Correa P, Hunter F, Rhamakrishnan T, Fontham E et al. Helicobacter pylori cause hyperoliferation of the
gastric epitholium. Pre and Post eradication indices of Proliferating cell nuclear anting (PCNA).
Am J Gastroenterol, 1993;88(11):1870-1875, http://www.100md.com(幽门螺杆菌感染与胃癌危险性关系的研究* 祖 毅1 蜀 津2 杨才明1 钟正福2 代红莹3 王 新1 秦光梅1)
*本课题获重庆市卫生局科研基金资助(9615)
项目负责人 祖毅重庆市第二人民医院 消化内科 402160
收稿日期 1997-12-05 接收日期 1998-03-06
Subject headings stomach neoplasms/etiology; Helicobacter pylori; Helicobacter infection; gastritis; risck factors; metaplasia; proliferating cell nuclear antigen
, 百拇医药
主题词 胃肿瘤/病因学；螺杆菌，幽门；螺杆菌感染；胃炎；危险因素；化生；增殖细胞核抗原
近年来众多流行病学资料提示，幽门螺杆菌(Helicobacter pylori，Hp)感染与胃癌的发生密切相关. 动物实验证实Hp慢性感染易引起胃粘膜组织恶性转化[1]；慢性萎缩性胃炎、肠化生及不典型增生已被认为是胃癌的危险因素[2]；而胃粘膜细胞增殖力学的变化是胃癌发生与演进的重要细胞学基础[3]. 我们通过对Hp感染与胃粘膜萎缩、肠化生、不典型增生及细胞增殖状态等胃癌危险因素关系的研究，旨在进一步了解Hp感染与胃癌危险性的关系.
1 对象和方法
, 百拇医药
1.1 对象 1996-01/12因上消化道症状在我院行内镜检查的慢性胃炎患者(除外胃大部切除和检查前2mo内接受过抗Hp治疗者)共476例，男305例，女171例，平均年龄47.4岁. 全部病例内镜检查后在胃窦部大、小弯，前、后壁及胃角共取胃粘膜5块.
1.2 方法
1.2.1 细菌学检查 ①Hp尿素酶试验：采用福建三强公司Hp UTSQ-H104快速诊断试剂盒. ②W-S银染色：采用福建三强公司SQ-T1034快速银染药盒(改良W-S法)进行病理切片染色. ③PCR：仪器为美国PE 2400型基因扩增仪，试剂盒及扩增引物为厦门长城生物工程有限公司产品，扩增产物为411BP，操作步骤及条件严格按试剂盒说明书执行. 上述三种方法一项以上阳性判为Hp阳性；全部阴性者判为Hp阴性.
, 百拇医药
1.2.2 组织学检查 活检标本100ml/L甲醛固定，常规制片，HE染色. 慢性胃炎和肠化生分级按全国胃癌病理协作组统一标准. 病理诊断由两位病理医师作出.
1.2.3 胃粘膜细胞动力学检查 以增殖细胞核抗原(PCNA)评价细胞增殖状态. PCNA免疫组化染色采用ABC法，第一抗体购自福建迈新公司抗PCNA(PC10)单克隆抗体，TBS代替第一抗体作阴性对照.
统计学处理 样本均数比较采用t检验，样本率比较采用χ2检验.
2 结果
, 百拇医药
2.1 Hp感染与癌前病变的关系 在476例受检者中，Hp阳性298例(62.6%)，Hp阴性178例(37.4%). 在Hp阳性组中，肠化生发生率为31.2%，显著高于Hp阴性组的19.7%(P<0.01)，Hp与肠化生的OR值为1.9，95% CI为25.9～36.5. Hp阳性组胃粘膜萎缩为13.8%，显著高于Hp阴性组的7.3%(P<0.05)，Hp与萎缩的OR值为2.1，95% CI为9.8～17.8. 而Hp阳性组不典型增生发生率与Hp阴性组无显著差异(表1).
H6.2 Hp感染与肠化生和萎缩程度的关系 Hp阳性组中度和重度肠化生和萎缩的发生率明显高于Hp阴性组，提示Hp感染与胃粘膜肠化生和萎缩程度有明显关系(表2).
2.3 Hp阳性与Hp阴性组癌前病变者年龄比较 Hp阳性的胃粘膜肠化生、萎缩及不典型增生患者的平均年龄较Hp阴性者明显提早(表3).
, http://www.100md.com
表1 Hp阳性和阴性患者三种癌前病变发生率的比较 n (%)
| Hp | n | 肠化生 | 胃粘膜萎缩 | 不典型增生 |
| 阳性 | 298 | 94(31.2)b | 41(13.8)a | 17(5.7) |
| 阴性 | 178 | 35(19.7) | 13(7.3) | 8(4.5) |
aP<0.05，bP<0.01，vs Hp阴性.
表2 Hp感染与肠化生和胃粘膜萎缩程度的关系n (%)
| Hp | n | 肠 化 生 | 胃粘膜萎缩 | ||||
| 轻 | 中 | 重 | 轻 | 中 | 重 | ||
| 阳性 | 298 | 21(7.1) | 40(13.4)a | 33(11.1)a | 11(3.0) | 17(5.7)a | 13(4.4)a |
| 阴性 | 178 | 12(6.7) | 13 (7.3) | 10 (5.6) | 6(3.4) | 3(2.3) | 4(1.7) |
, http://www.100md.com
aP<0.05 vs Hp阴性.
表3 Hp阳性和阴性的癌前病变患者平均年龄比较
| Hp | 肠 化 生 | 胃粘膜萎缩 | 不典型增生 | |||
| n | 平均年龄 | n | 平均年龄 | n | 平均年龄 | |
| 阳性 | 94 | 43.9±11.2b | 41 | 41.6±10.3b | 17 | 42.2±12.5a |
| 阴性 | 35 | 52.7±9 | 13 | 53.1±11.7 | 8 | 46.4±10.4 |
, 百拇医药
aP<0.05，bP<0.01， vs Hp阴性.
2.4 Hp感染对PCNA的影响 从Hp阳性和Hp阴性患者中随机各抽60例进行PCNA免疫组化染色，结果显示Hp阳性组的PCNA标记指数平均为25.6±5.2，显著高于Hp阴性组的20.7±3.6(P<0.01).
3 讨论
尽管众多流行病学资料表明Hp感染可增加胃癌发生的危险性，但其确切作用机制尚不明了. Correa[4]曾提出Hp感染→慢性胃炎→慢性萎缩性胃炎→肠化生及不典型增生→胃癌的假说来阐明Hp感染与胃癌的关系. Hp在普通人群中感染率高达60%，在慢性胃炎中常达80%以上. 不少研究发现约70%～90%的胃癌病例与Hp相关的慢性胃炎有关[5，6]. 一般认为Hp感染主要引起慢性胃炎，作用于胃癌发生的起始阶段而扮演一个“启动子”的作用，但新近研究则发现，Hp感染不仅引起慢性浅表性胃炎，而且也是萎缩性胃炎、肠化生等癌前病变的主要危险因素[7]. 已有足够的流行病学和病理组织学的证据表明，Hp一旦感染，常持续存在，未经治疗则逐渐发展至萎缩性胃炎、肠化生及不典型增生[8]；且Hp感染的持续存在可使萎缩和肠化生提前出现，并可加速肠化生的发展[9]. Rugge et al[6]观察到Hp阳性患者胃粘膜肠化生(特别是Ⅱ型和Ⅲ型肠化)发生率显著高于Hp阴性者；Guarner et al[10]研究表明，Hp与胃粘膜萎缩明显相关，OR值为5.7，95% CI为1.9～16.8；与不典型增生及胃癌的OR值4.0，95% CI为1.1～14.8，Hp感染与研究组中胃粘膜肠化生，萎缩及不典型增生三种癌前病变存在普遍关系. 由此可见，Correa的假设在解释Hp与胃癌关系时似乎较为合理. 本研究显示，Hp阳性者胃粘膜肠化生、萎缩的发生率显著高于Hp阴性者，特别是中度及重度肠化生和萎缩的发生率较Hp阴性者显著增高，而且其肠化生、萎缩及不典型增生三种癌前病变者的平均年龄较Hp阴性者明显提早，提示Hp感染可通过刺激和(或)促进肠化生、萎缩及不典型增生的发生和发展，从而增加胃癌发生的危险性.大量研究表明，细胞增殖加速是人类细胞癌变的普遍机制，细胞增殖加速可增加DNA受损机会；有丝分裂期细胞较静止期细胞更易于受致突、致癌物质损伤而发生癌变[3]. 对胃粘膜细胞增殖力学的研究证实，从正常胃粘膜到萎缩性胃炎、肠化生、不典型增生以致最终发展成胃癌，增殖细胞呈依次递增，因而，胃粘膜细胞增殖力学的变化可视为癌变的早期信号之一[11]. 增殖细胞核抗原(PCNA)又称周期素，是真核细胞DNA合成所必需的一种核蛋白，其合成与表达反映了细胞的增殖状态. 本研究显示，Hp阳性者胃粘膜的PCNA标记指数显著高于Hp阴性者，表明Hp感染加速了胃粘膜细胞的增殖，而这种处于高增殖状态的胃粘膜可能具有较高的癌变危险性.
, 百拇医药
4 参考文献
1 The Eurogast study group. An international association between .Helicobacter pylori infection and gastric cancer.
Lancet, 1993;341(8857):1359-1362
2 Yoshida S, Saito D. Gastric premalignancy and cancer screeing in highrick patients.Am J Gastroenterol, 1996;91(5):839-843
3 Preston-Martin S, Pike MC, Ross RK, Jones PA, Henderson BE. Incresed cell division as a cause of human cancer.
, http://www.100md.com
Cancer Res, 1990;50(23):7415-7421
4 Correa P. Helicobacter pylori and gastric cancinogenesis. Am J Surg Pathol,1995;19(Suppl 1):S37-S43
5 Parsnnet J. Helicobacter pylori infection and risk of gastric cancinoma. Gastroenterol Clin North Am, 1993;22(1):89-104
6 Rugge M, DI Mario F, Cassaro M, Baffa R, Farinati F, Rubio J et al.Pathology of gastric antrum and body association with
, 百拇医药
Helicobacter pylori infection in nonulcerous patients: is the bacterium a pormoter of intestinal metaplasia.
Histopathology, 1993;22(1):9-14
7 Kawaguchi H, Haruma K, Komoto K, Yoshihara M, Sumii K, Kajyama G. Helicobacter pylori infection is the major risk factor for
atrophic gastritis.Am J Gastroenterol,1996;91(5):959-962
8 Sipponen P.Helicobacter pylori: A cohort phenomenon. Am J Surg PAthol,1995;19(Suppl1):S30-S36
, http://www.100md.com
9 Asaka M, Kimura T, Kato M, Kudo M, Miki K, Ogoshi K et al.Possible role of Helicobacter pylori infection in early gastric
cancer development. Cancer,1994;73(11):2691-2694
10 Guarner J, Mohar A, Parsonnet J, Halperin D. The Association of Helicobacter pylori with gastric cancer and preneoplastic
gastric lesions in chiapas, mexico. Cancer,1993;71(2):297-301
11 Brenes F, Ruiz B, Correa P, Hunter F, Rhamakrishnan T, Fontham E et al. Helicobacter pylori cause hyperoliferation of the
gastric epitholium. Pre and Post eradication indices of Proliferating cell nuclear anting (PCNA).
Am J Gastroenterol, 1993;88(11):1870-1875, http://www.100md.com(幽门螺杆菌感染与胃癌危险性关系的研究* 祖 毅1 蜀 津2 杨才明1 钟正福2 代红莹3 王 新1 秦光梅1)