香砂六君合剂对大鼠胃粘膜屏障的保护作用
1开平市中医院 广东省开平市 529300
2泸州医学院附属中医院 四川省泸州市 64600
四川省教委科研基金资助课题，No.97133.
项目负责人 向爱民开平市中医院 广东省开平市 529300
收稿日期 1998-11-20 接收日期 1999-04-03
Subject headings xiangsha liujun mixture; gastric mucosal barrier; disease modles, animal
, 百拇医药
主题词 香砂六君子汤；胃粘膜屏障；疾病模型，动物
1 材料和方法
1.1 材料 Wistar大鼠，体重150g±25g，由泸州医学院动物科提供，香砂六君合剂，参照《方剂学》所载香砂六君子汤(人参10g，白术9g，茯苓9g，陈皮9g，法半夏12g，木香6g，砂仁6g，甘草6g)制成合剂，每mL含生药1g，所有中药均购于泸州医学院附属中医院中药房，并经专职人员鉴定. 600mL/L食用乙醇由泸州林园酒厂生产；盐酸由重庆化学试剂厂出品，按600mL/L食用乙醇1L含0.125mol盐酸配成酸性乙醇.
1.2 方法 Wistar大鼠24只，称体重后，随机分为对照组(n=8)、损伤组(n=8)、香砂六君合剂保护组(n=8). 上午，对照组灌生理盐水，损伤组、保护组灌以酸性乙醇；下午，对照组、损伤组灌生理盐水，保护组灌香砂六君合剂，连续8wk，灌胃剂量10mL/Kg，wk5起损伤组和保护组每天在温水中负重游泳10min，单日禁食，双日饮食不限量，造成过度疲劳及饥饱失常.wk8末上午，观察动物一般情况，处死. 取胃窦粘膜1份(约20mg)，用高氯酸消化法作磷脂的测定[1]；切取1mm×3mm胃窦组织一块，福尔马林固定，石蜡包埋5μm切片，HE染色，于高倍镜下观察上皮细胞，并计数3个视野(直径320μm)中炎细胞个数，取其均值，为炎细胞密度(LD)；阿里新蓝一过碘酸雪夫氏染色，即AB(pH 2.5)/PAS染色，参考鸟居明法[2]，测胃粘膜表面粘液厚度(T1，μm)，粘膜内粘液厚度(T2，μm)和粘膜固有层厚度(T3，μm)，计算表面粘液指数(T1/T3)，粘膜内粘液指数(T2/T3)和总粘液指数[(T1+T2)/T3].
, 百拇医药
2 结果
造膜后，损伤组动物，可见摄食量减少，大便质稀，次数增多，肌肉瘦削等脾气虚症状；对照组、保护组均未出现上述症状. 8wk后保护组动物体重增加(WT)显著高于损伤组(P<0.05)；损伤组胃粘膜中磷脂含量显著低于保护组(P<0.01)，对照组、保护组无显著差异(P>0.05). 肉眼观察，损伤组胃粘膜有充血、水肿、有散在出血点及条索状糜烂，保护组无肉眼损伤；损伤组损伤积分(UI)显著高于保护组(P<0.01)；高倍镜观察损伤组粘膜被覆上皮结构不完整，有不同程度的糜烂等，可见大量的炎细胞浸润；保护组上皮结构较完整，炎细胞密度(LD)明显低于损伤组(P<0.01). 损伤组胃粘膜表面粘液T1较保护组明显减少(P<0.01)；保护组，胃粘液指数T1/T3，T2/T3，(T1+T2)/T3均显著高于损伤组(P<0.01).
, http://www.100md.com
3 讨论
胃粘膜屏障包括胃粘液一碳酸氢盐屏障，胃粘膜血流与微循环，胃粘膜上皮更新，和前列腺素(PG)等对胃粘膜的细胞保护作用；胃粘膜粘液层是胃粘膜抗损伤的第一道防线 [3]. 本研究表明，香砂六君合剂能显著增加胃粘膜粘液量，其机制可能为该方中含有丰富的糖蛋白、氨基酸、微量元素，可为胃粘液形成提供丰富的物质基础；健脾益气类中药，有改善胃粘膜血流(GMBF)，增加前列腺素(PG)合成作用，香砂六君合剂能增加胃粘液量，可能与改善GMBF、增加内源性PG含量有关[4]. 磷脂既是胃粘液中的重要成分，又能形成磷脂单分子层构成疏水屏障，有效地防止H+逆扩散. 香砂六君方中所含多糖类、三帖酸类、微量元素等可为内源性的磷脂合成提供原料；方中茯苓所含丰富的卵磷脂，可直接提供外源性的磷脂，保护胃粘膜.
, 百拇医药
本研究提示，香砂六君合剂在防治实验性大鼠脾气虚证同时，能显著地增加胃壁粘液及胃腺体内粘液，减轻攻击因子对胃粘膜上皮细胞的损害，减少炎细胞浸润，提示该方可增强胃粘液屏障，坚固胃粘膜抗损伤的第一道防线. 同时显著增加胃粘膜中磷脂含量，有增强胃粘膜疏水屏障功能的作用. 香砂六君方增加胃粘液和胃粘膜中磷脂含量，从而保护胃粘膜屏障，可认为是该方健脾益气治疗胃病的重要机制之一.
4 参考文献
1 上海市医学化验所. 临床生化检查. 上海：上海科学技术出版社，1982：185
2 鸟居明，有泉雅博，岩崎仁. シツト胃被覆すよび粘膜内粘液の组织化学的研究—数种药剂の胃粘膜に对すゐ影响.
日本消化器病学会杂志，1984；81：1529
3 潘国宗，曹世植著. 现代胃肠病学. 第1版. 北京：科技出版社，1996：831-840
4 沈鹰，刘正民，韦嵩. 中医脾胃与胃粘膜防御功能关系的研究. 中医杂志，1997；38：743-744, 百拇医药(向爱民1 周德端2 徐 州2 戴玉兰1)
2泸州医学院附属中医院 四川省泸州市 64600
四川省教委科研基金资助课题，No.97133.
项目负责人 向爱民开平市中医院 广东省开平市 529300
收稿日期 1998-11-20 接收日期 1999-04-03
Subject headings xiangsha liujun mixture; gastric mucosal barrier; disease modles, animal
, 百拇医药
主题词 香砂六君子汤；胃粘膜屏障；疾病模型，动物
1 材料和方法
1.1 材料 Wistar大鼠，体重150g±25g，由泸州医学院动物科提供，香砂六君合剂，参照《方剂学》所载香砂六君子汤(人参10g，白术9g，茯苓9g，陈皮9g，法半夏12g，木香6g，砂仁6g，甘草6g)制成合剂，每mL含生药1g，所有中药均购于泸州医学院附属中医院中药房，并经专职人员鉴定. 600mL/L食用乙醇由泸州林园酒厂生产；盐酸由重庆化学试剂厂出品，按600mL/L食用乙醇1L含0.125mol盐酸配成酸性乙醇.
1.2 方法 Wistar大鼠24只，称体重后，随机分为对照组(n=8)、损伤组(n=8)、香砂六君合剂保护组(n=8). 上午，对照组灌生理盐水，损伤组、保护组灌以酸性乙醇；下午，对照组、损伤组灌生理盐水，保护组灌香砂六君合剂，连续8wk，灌胃剂量10mL/Kg，wk5起损伤组和保护组每天在温水中负重游泳10min，单日禁食，双日饮食不限量，造成过度疲劳及饥饱失常.wk8末上午，观察动物一般情况，处死. 取胃窦粘膜1份(约20mg)，用高氯酸消化法作磷脂的测定[1]；切取1mm×3mm胃窦组织一块，福尔马林固定，石蜡包埋5μm切片，HE染色，于高倍镜下观察上皮细胞，并计数3个视野(直径320μm)中炎细胞个数，取其均值，为炎细胞密度(LD)；阿里新蓝一过碘酸雪夫氏染色，即AB(pH 2.5)/PAS染色，参考鸟居明法[2]，测胃粘膜表面粘液厚度(T1，μm)，粘膜内粘液厚度(T2，μm)和粘膜固有层厚度(T3，μm)，计算表面粘液指数(T1/T3)，粘膜内粘液指数(T2/T3)和总粘液指数[(T1+T2)/T3].
, 百拇医药
2 结果
造膜后，损伤组动物，可见摄食量减少，大便质稀，次数增多，肌肉瘦削等脾气虚症状；对照组、保护组均未出现上述症状. 8wk后保护组动物体重增加(WT)显著高于损伤组(P<0.05)；损伤组胃粘膜中磷脂含量显著低于保护组(P<0.01)，对照组、保护组无显著差异(P>0.05). 肉眼观察，损伤组胃粘膜有充血、水肿、有散在出血点及条索状糜烂，保护组无肉眼损伤；损伤组损伤积分(UI)显著高于保护组(P<0.01)；高倍镜观察损伤组粘膜被覆上皮结构不完整，有不同程度的糜烂等，可见大量的炎细胞浸润；保护组上皮结构较完整，炎细胞密度(LD)明显低于损伤组(P<0.01). 损伤组胃粘膜表面粘液T1较保护组明显减少(P<0.01)；保护组，胃粘液指数T1/T3，T2/T3，(T1+T2)/T3均显著高于损伤组(P<0.01).
, http://www.100md.com
3 讨论
胃粘膜屏障包括胃粘液一碳酸氢盐屏障，胃粘膜血流与微循环，胃粘膜上皮更新，和前列腺素(PG)等对胃粘膜的细胞保护作用；胃粘膜粘液层是胃粘膜抗损伤的第一道防线 [3]. 本研究表明，香砂六君合剂能显著增加胃粘膜粘液量，其机制可能为该方中含有丰富的糖蛋白、氨基酸、微量元素，可为胃粘液形成提供丰富的物质基础；健脾益气类中药，有改善胃粘膜血流(GMBF)，增加前列腺素(PG)合成作用，香砂六君合剂能增加胃粘液量，可能与改善GMBF、增加内源性PG含量有关[4]. 磷脂既是胃粘液中的重要成分，又能形成磷脂单分子层构成疏水屏障，有效地防止H+逆扩散. 香砂六君方中所含多糖类、三帖酸类、微量元素等可为内源性的磷脂合成提供原料；方中茯苓所含丰富的卵磷脂，可直接提供外源性的磷脂，保护胃粘膜.
, 百拇医药
本研究提示，香砂六君合剂在防治实验性大鼠脾气虚证同时，能显著地增加胃壁粘液及胃腺体内粘液，减轻攻击因子对胃粘膜上皮细胞的损害，减少炎细胞浸润，提示该方可增强胃粘液屏障，坚固胃粘膜抗损伤的第一道防线. 同时显著增加胃粘膜中磷脂含量，有增强胃粘膜疏水屏障功能的作用. 香砂六君方增加胃粘液和胃粘膜中磷脂含量，从而保护胃粘膜屏障，可认为是该方健脾益气治疗胃病的重要机制之一.
4 参考文献
1 上海市医学化验所. 临床生化检查. 上海：上海科学技术出版社，1982：185
2 鸟居明，有泉雅博，岩崎仁. シツト胃被覆すよび粘膜内粘液の组织化学的研究—数种药剂の胃粘膜に对すゐ影响.
日本消化器病学会杂志，1984；81：1529
3 潘国宗，曹世植著. 现代胃肠病学. 第1版. 北京：科技出版社，1996：831-840
4 沈鹰，刘正民，韦嵩. 中医脾胃与胃粘膜防御功能关系的研究. 中医杂志，1997；38：743-744, 百拇医药(向爱民1 周德端2 徐 州2 戴玉兰1)