大肠癌C-erbB-2和EGFR的表达意义
1华北大学医学院生理教研室 吉林省吉林市 132001
2中国人民解放军第四军医大学吉林军医学院附属医院外科
3吉林市第二人民医院普外科
项目负责人 曲娴 华北大学医学院生理教研室 吉林省吉林市 132001
Tel. 0086-432-2452575 Ext.2045
收稿日期 2001-02-08 接受日期 2001-03-11
主题词 原癌基因蛋白质C-erbB-2类/生物合成； 原癌基因蛋白质C-erbB-2类/分析； 受体,表皮生长因子-尿抑胃素/生物合成；受体,表皮生长因子-尿抑胃素/分析；直肠肿瘤/代谢；直肠肿瘤/病理学；免疫组织化学；预后
, http://www.100md.com
曲娴, 刘建平, 曲宏, 孙红霞. 大肠癌C-erbB-2和EGFR的表达意义. 世界华人消化杂志，2001；9(7)：838-839
大肠癌是严重威胁人类健康的常见肿瘤之一[1-11],机制尚未完全阐明[12-17]. 原癌基因蛋白(C-erbB-2)及表皮生长因子受体(EGFR)的表达与肿瘤生物学行为及预后的关系日益受到关注[18-22]. 鉴于C-erbB-2与EGFR在结构和功能上的相似，我们应用免疫组化对51例结直肠癌进行C-erbB-2和EGFR蛋白标记，探讨两种基因共同表达时对肿瘤生物学行为及预后的影响，为进一步研究结直肠癌的治疗及预后提供有益资料.
1 材料和方法
, 百拇医药
1.1 材料 1992/1995年外科手术经病理证实资料完整的结直肠癌51例(吉林市第二人民医院32例，北华大学附属医院19例). 男27例，女24例；平均年龄68.5岁，经40g·L-1甲醛固定，常规石蜡包埋切片. C-erbB-2为Oncogene Sci Inc产品，1∶400稀释；EGFR为Sigma公司产品，1∶400稀释；PCNA 为Dako公司产品，1∶50稀释.
1.2 方法 常规ABC免疫组化法，阳性对照用乳腺癌阳性标本，以TBS代替一抗做阴性对照. 凡肿瘤细胞膜、细胞浆或细胞膜和细胞浆出现棕色染色者为阳性，PCNA增殖指数以随机计数10个高倍视野共计1000个细胞中阳性细胞的百分率表示.
统计学方法 采用F检验,q检验及四格表的确切概率法.
2 结果
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2.1 大肠癌C-erbB-2和EGFR表达与PCNA的关系 C-erbB-2和EGFR免疫组化染色两者均阳性占24%(12/51)，均为阴性占14%(7/51)，C-erbB-2阳性占47%(24/51),EGFR阳性占16%(8/51),两者共同表达组肿瘤细胞PCNA增殖指数高于其他各组，与两者同时阴性组的差异有显著性(P<0.05)，C-erbB-2阳性组细胞增殖指数也高于两者同时阴性组，差异有显著性(P<0.05).
2.2 大肠癌C-erbB-2和EGFR表达与肿瘤生物学行为的关系 C-erbB-2和EGFR同时阳性组与EGFR阳性组比较前者多呈浸润性生长方式(P<0.05),但与C-erbB-2阳性组及两者同时阴性组比较,差异无显著性(P>0.05)；C-erbB-2和EGFR两者同时阳性或单独阳性组淋巴转移率有增高趋势,但无统计学意义(P<0.05，表1);C-erbB-2和EGFR共同阳性组5年生存率低于其他各组，而单独的C-erbB-2或EGFR阳性与共同阴性组5年生存率的差别无显著性(P>0.05).
, 百拇医药
表1 C-erbB-2和EGFR表达与肿瘤生物学行为的关系
, 百拇医药
aP<0.05 vs EGFR阳性；cP<0.05 vs 其余3组.
3 讨论
原癌基因C-erbB-2与EGFR具有高度同源性，两者在肿瘤的发生和生物学行为等方面可能存在协同作用. 目前有关于C-erbB-2与EGFR的研究多集中在乳腺癌[23]，而在老年结直肠癌中的变化尚少见报道. 本实验表明两者共同阳性表达时，肿瘤细胞PCNA增殖指数高于共同阴性表达组,而且也有高于单独C-erbB-2或EGFR表达组的趋势，显示两者对细胞增殖有协同作用. C-erbB-2单独表达时肿瘤细胞PCNA增殖指数也高于共同阴性表达组，而EGFR单独表达时则无此差别，说明此协同作用主要取决于C-erbB-2，可能是由于两者作用的途径不同有关. EGFR由胞外结构域、跨膜区和胞内结构域组成，胞内结构域具有酪氨酸激酶(TPK)活性，EGFR与配体表皮生长因子(EGF)结合，可催化细胞内某些底物蛋白质的酪氨酸残基磷酸化，导致细胞增殖信息传递，刺激细胞增殖和分化[24-30]. 而C-erbB-2则在无EGF时可激活TPK,已证实鸟类红细胞增多症病毒v-erbB的基因产物缺少膜外的EGFR结合区段,不需与EGF结合便可相继被激活,于是细胞不断地生长. 已有报道C-erbB-2或EGFR的表达与肿瘤的浸润和转移有关[21-23,25-30]. 我们观察到C-erbB-2及EGFR共同表达时肿瘤呈浸润性生长方式的比单独EGFR表达多，显示两者共同表达时肿瘤的浸润能力增强，至于为何两者共同表达与单独的C-erbB-2表达或两者共同阴性表达组间差异无显著性,以及C-erbB-2和EGFR共同阳性组有淋巴结转移增多的趋势但无统计学意义,尚有待积累病例进一步研究. 同时，本研究显示单独C-erbB-2或EGFR阳性与大肠癌5年生存率无明显关系，而C-erbB-2及EGFR共同表达组5年生存率则低于其他组，反映了两者对预后影响的协同作用. 因此两者共同表达时，可作为判定大肠癌恶性程度及估计预后的有效指标.
, 百拇医药
4 参考文献
1 于皆平, 董卫国. 大肠癌早期诊断的现状. 世界华人消化杂志, 1999;7:553-554
2 范应方, 黄宗海. 结直肠癌基因治疗研究进展. 世界华人消化杂志，2001;9:427-430
3 郁宝铭, 赵任. 大肠癌分子生物学研究的现状. 世界华人消化杂志, 1999;7:173-175
4 卢献平, 李宝金, 陈声乐, 吕斌, 蒋宁一. 化疗及导向化疗治疗大肠癌与癌细胞凋亡研究. 世界华人消化杂志, 1999;7:332-334
5 黄宗海, 余文林, 杨力, 宋惠娟, 杨继震. 逆转录病毒介导HSVtk基因转导体外抗结肠癌的作用. 世界华人消化杂志，2001;9:84-86
, 百拇医药
6 徐延豪, 宋今丹. 肿瘤相关抗原LEA在大肠癌前病变及早期肠癌诊断中应用的研究. 世界华人消化杂志, 1999;7:992
7 周志宏,沈志祥. 大肠癌肿瘤坏死因子的研究进展. 世界华人消化杂志，2000;8:700-701
8 许健, 陈君坤, 刘福坤, 吴波, 黄伟, 曹建民, 李成郎. 大肠癌术前化疗疗效的病理组织学对照研究. 华人消化杂志, 1998;6:891-893
9 刘时才, 白馨, 韦荣干, 黄振录. 半乳糖氧化酶检测大肠癌和癌前病变T抗原. 华人消化杂志, 1998;6:990-991
10 吴金生, 何勇, 王述民. 脂质体包裹EGFR反义寡脱氧核苷酸抑制人大肠癌细胞的增殖. 华人消化杂志, 1998;6:762-764
, 百拇医药
11 张亚历, 张振书, 吴保平, 孙正基, 林金容, 周殿元. 大肠癌相关标记物筛检高危人群的评价. 世界华人消化杂志，2000;8:1188-1190
12 陈星海, 王江滨, 张俊格, 刘蓉昕. 凋亡相关因子FasL在大肠癌组织中的表达规律研究. 世界华人消化杂志，2000;8:1184-1186
13 谷化平, 倪灿荣, 詹熔洲. 大肠癌CD15, CD44v6和nm23H1的mRNA表达与转移及预后的相关性. 世界华人消化杂志，2000;8:887-891
14 王维,罗和生,余保平. 端粒酶与大肠癌. 世界华人消化杂志，2000;8:800-802
15 卿三华,蒋会勇,齐德林,周正端,黄祥成,张福明,盛权根. 影响大肠癌淋巴结转移的因素间相关性探讨. 世界华人消化杂志，2000;8:654-657
, 百拇医药
16 赵任, 郁宝铭, 张国弛, 郑民华, 李东华, 黄梁, 邹鸿志. 手术前后补硒对大肠癌患者的免疫功能及抗氧化功能的影响.
世界华人消化杂志，2000;8:1013-1016
17 王青, 吴金生, 赖大年, 马庆久, 潘伯荣. 抑癌基因P16蛋白在大肠腺癌组织中的表达及意义. 世界华人消化杂志, 1999;7:1047-1048
18 Lopez Guerrero JA, Bolufer Gilabert P, Vera Sempere FJ, Marugan de la Concha I, Barragan Gonzalez E. C-erbB-2 expression and
its relationship with ploidy, P53 abnormalities and epidermal growth factor receptor content in human non-small cell lung
, 百拇医药
cancer. Clin Chim Acta, 1999;285:105-120
19 Ioachim E, Kamina S, Demou A, Kontostolis M, Lolis D, Agnantis NJ. Immunohistochemical localization of metallothionein in
human breast cancer in comparison with cathepsin D,stromelysin-1, CD44, extracellular matrix components, p53, Rb, C-erbB-2,EGFR, steroid receptor content and proliferation. Anticancer Res, 1999;19:2133-2139
20 Slesak B, Harlozinska A, Porebska I, Bojarowski T, Lapinska J, Rzeszutko M, Wojnar A. Expression of epidermal growth factor
, 百拇医药
receptor family proteins (EGFR, c-erbB-2 and c-erbB-3)in gastric cancer and chronic gastritis. Anticancer Res,
1998;18:2727-2732
21 郑祥雄, 王小众, 林谷珍, 王平. c-erbB-2基因产物及PCNA在大肠癌组织中的表达及其临床意义. 世界华人消化杂志, 1999;7:274
22 米建强, 杨石强, 沈铭昌. 胃癌及癌前病变组织中c-erbB-2癌基因产物的表达. 新消化病学杂志, 1997;5:152-153
23 马祥君, 王启堂, 张永生. 乳腺癌C-erB-2、表皮生长因子受体基因蛋白表达与预后的关系. 癌症, 1998;16:111-113
, 百拇医药
24 于永利. 生长因子的信号传递异常和恶性肿瘤的发生. 中国免疫学杂志, 1999；15：289-290
25 Tong WM, Ellinger A, Sheinin Y, Cross HS. Epidermal growth factor receptor expression in primary cultured human
colorectal carcinoma cells. Br J Cancer, 1998;77:1792-1798
26 Ruck A, Paulie S. The epidermal growth factor receptor is involved in autocrine growth of human bladder carcinoma cell
lines. Anticancer Res, 1997;17:1925-1931
, 百拇医药
27 Wang HM, Rajagopal S, Chakrabarty S. Inhibition of human colon cancer malignant cell behavior and growth by antisense
epidermal growth factor receptor expression. Anticancer Res, 1998;18:2297-2300
28 庄小强, 赖日权, 孙桂华, 王晓怀, 袁世珍. 大肠癌P53蛋白与PCNA表达的预后意义. 世界华人消化杂志, 1999;7:616
29 王述民, 吴金生, 要秀, 何泽生, 潘伯荣. TGFα，EGFR反义寡聚核苷酸抑制人大肠癌细胞的增殖. 世界华人消化杂志, 1999;7:522-524
30 王青, 吴金生, 高德明, 赖大年, 马庆久. EGF受体和转化生长因子α mRNA在人大肠癌组织的表达意义. 世界华人消化杂志, 1999;7:590-592, http://www.100md.com(曲 娴1 刘建平2 曲 宏3 孙红霞1 )
2中国人民解放军第四军医大学吉林军医学院附属医院外科
3吉林市第二人民医院普外科
项目负责人 曲娴 华北大学医学院生理教研室 吉林省吉林市 132001
Tel. 0086-432-2452575 Ext.2045
收稿日期 2001-02-08 接受日期 2001-03-11
主题词 原癌基因蛋白质C-erbB-2类/生物合成； 原癌基因蛋白质C-erbB-2类/分析； 受体,表皮生长因子-尿抑胃素/生物合成；受体,表皮生长因子-尿抑胃素/分析；直肠肿瘤/代谢；直肠肿瘤/病理学；免疫组织化学；预后
, http://www.100md.com
曲娴, 刘建平, 曲宏, 孙红霞. 大肠癌C-erbB-2和EGFR的表达意义. 世界华人消化杂志，2001；9(7)：838-839
大肠癌是严重威胁人类健康的常见肿瘤之一[1-11],机制尚未完全阐明[12-17]. 原癌基因蛋白(C-erbB-2)及表皮生长因子受体(EGFR)的表达与肿瘤生物学行为及预后的关系日益受到关注[18-22]. 鉴于C-erbB-2与EGFR在结构和功能上的相似，我们应用免疫组化对51例结直肠癌进行C-erbB-2和EGFR蛋白标记，探讨两种基因共同表达时对肿瘤生物学行为及预后的影响，为进一步研究结直肠癌的治疗及预后提供有益资料.
1 材料和方法
, 百拇医药
1.1 材料 1992/1995年外科手术经病理证实资料完整的结直肠癌51例(吉林市第二人民医院32例，北华大学附属医院19例). 男27例，女24例；平均年龄68.5岁，经40g·L-1甲醛固定，常规石蜡包埋切片. C-erbB-2为Oncogene Sci Inc产品，1∶400稀释；EGFR为Sigma公司产品，1∶400稀释；PCNA 为Dako公司产品，1∶50稀释.
1.2 方法 常规ABC免疫组化法，阳性对照用乳腺癌阳性标本，以TBS代替一抗做阴性对照. 凡肿瘤细胞膜、细胞浆或细胞膜和细胞浆出现棕色染色者为阳性，PCNA增殖指数以随机计数10个高倍视野共计1000个细胞中阳性细胞的百分率表示.
统计学方法 采用F检验,q检验及四格表的确切概率法.
2 结果
, http://www.100md.com
2.1 大肠癌C-erbB-2和EGFR表达与PCNA的关系 C-erbB-2和EGFR免疫组化染色两者均阳性占24%(12/51)，均为阴性占14%(7/51)，C-erbB-2阳性占47%(24/51),EGFR阳性占16%(8/51),两者共同表达组肿瘤细胞PCNA增殖指数高于其他各组，与两者同时阴性组的差异有显著性(P<0.05)，C-erbB-2阳性组细胞增殖指数也高于两者同时阴性组，差异有显著性(P<0.05).
2.2 大肠癌C-erbB-2和EGFR表达与肿瘤生物学行为的关系 C-erbB-2和EGFR同时阳性组与EGFR阳性组比较前者多呈浸润性生长方式(P<0.05),但与C-erbB-2阳性组及两者同时阴性组比较,差异无显著性(P>0.05)；C-erbB-2和EGFR两者同时阳性或单独阳性组淋巴转移率有增高趋势,但无统计学意义(P<0.05，表1);C-erbB-2和EGFR共同阳性组5年生存率低于其他各组，而单独的C-erbB-2或EGFR阳性与共同阴性组5年生存率的差别无显著性(P>0.05).
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表1 C-erbB-2和EGFR表达与肿瘤生物学行为的关系
| 分组 | n | 生长方式 | 淋巴结转移 | 年生存率 | |||
| 推进型+混合型 | 浸润性 | + | - | ≥5 | <5 | ||
| C-erbB-2和EGFR阳性 | 12 | 2(17%) | 10(83%)a | 6(50%) | 6(50%) | 2(17%) | 10(83%)c |
| C-erbB-2阳性 | 24 | 11(46%) | 13(54%) | 9(38%) | 15(62%) | 13(54%) | 11(46%) |
| EGFR阳性 | 8 | 5(62%) | 3(38%) | 3(38%) | 5(62%) | 6(75%) | 2(25%) |
| C-erbB-2和EGFR阴性 | 7 | 3(43%) | 4(57%) | 1(14%) | 6(86%) | 4(57%) | 3(43%) |
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aP<0.05 vs EGFR阳性；cP<0.05 vs 其余3组.
3 讨论
原癌基因C-erbB-2与EGFR具有高度同源性，两者在肿瘤的发生和生物学行为等方面可能存在协同作用. 目前有关于C-erbB-2与EGFR的研究多集中在乳腺癌[23]，而在老年结直肠癌中的变化尚少见报道. 本实验表明两者共同阳性表达时，肿瘤细胞PCNA增殖指数高于共同阴性表达组,而且也有高于单独C-erbB-2或EGFR表达组的趋势，显示两者对细胞增殖有协同作用. C-erbB-2单独表达时肿瘤细胞PCNA增殖指数也高于共同阴性表达组，而EGFR单独表达时则无此差别，说明此协同作用主要取决于C-erbB-2，可能是由于两者作用的途径不同有关. EGFR由胞外结构域、跨膜区和胞内结构域组成，胞内结构域具有酪氨酸激酶(TPK)活性，EGFR与配体表皮生长因子(EGF)结合，可催化细胞内某些底物蛋白质的酪氨酸残基磷酸化，导致细胞增殖信息传递，刺激细胞增殖和分化[24-30]. 而C-erbB-2则在无EGF时可激活TPK,已证实鸟类红细胞增多症病毒v-erbB的基因产物缺少膜外的EGFR结合区段,不需与EGF结合便可相继被激活,于是细胞不断地生长. 已有报道C-erbB-2或EGFR的表达与肿瘤的浸润和转移有关[21-23,25-30]. 我们观察到C-erbB-2及EGFR共同表达时肿瘤呈浸润性生长方式的比单独EGFR表达多，显示两者共同表达时肿瘤的浸润能力增强，至于为何两者共同表达与单独的C-erbB-2表达或两者共同阴性表达组间差异无显著性,以及C-erbB-2和EGFR共同阳性组有淋巴结转移增多的趋势但无统计学意义,尚有待积累病例进一步研究. 同时，本研究显示单独C-erbB-2或EGFR阳性与大肠癌5年生存率无明显关系，而C-erbB-2及EGFR共同表达组5年生存率则低于其他组，反映了两者对预后影响的协同作用. 因此两者共同表达时，可作为判定大肠癌恶性程度及估计预后的有效指标.
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1 于皆平, 董卫国. 大肠癌早期诊断的现状. 世界华人消化杂志, 1999;7:553-554
2 范应方, 黄宗海. 结直肠癌基因治疗研究进展. 世界华人消化杂志，2001;9:427-430
3 郁宝铭, 赵任. 大肠癌分子生物学研究的现状. 世界华人消化杂志, 1999;7:173-175
4 卢献平, 李宝金, 陈声乐, 吕斌, 蒋宁一. 化疗及导向化疗治疗大肠癌与癌细胞凋亡研究. 世界华人消化杂志, 1999;7:332-334
5 黄宗海, 余文林, 杨力, 宋惠娟, 杨继震. 逆转录病毒介导HSVtk基因转导体外抗结肠癌的作用. 世界华人消化杂志，2001;9:84-86
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6 徐延豪, 宋今丹. 肿瘤相关抗原LEA在大肠癌前病变及早期肠癌诊断中应用的研究. 世界华人消化杂志, 1999;7:992
7 周志宏,沈志祥. 大肠癌肿瘤坏死因子的研究进展. 世界华人消化杂志，2000;8:700-701
8 许健, 陈君坤, 刘福坤, 吴波, 黄伟, 曹建民, 李成郎. 大肠癌术前化疗疗效的病理组织学对照研究. 华人消化杂志, 1998;6:891-893
9 刘时才, 白馨, 韦荣干, 黄振录. 半乳糖氧化酶检测大肠癌和癌前病变T抗原. 华人消化杂志, 1998;6:990-991
10 吴金生, 何勇, 王述民. 脂质体包裹EGFR反义寡脱氧核苷酸抑制人大肠癌细胞的增殖. 华人消化杂志, 1998;6:762-764
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11 张亚历, 张振书, 吴保平, 孙正基, 林金容, 周殿元. 大肠癌相关标记物筛检高危人群的评价. 世界华人消化杂志，2000;8:1188-1190
12 陈星海, 王江滨, 张俊格, 刘蓉昕. 凋亡相关因子FasL在大肠癌组织中的表达规律研究. 世界华人消化杂志，2000;8:1184-1186
13 谷化平, 倪灿荣, 詹熔洲. 大肠癌CD15, CD44v6和nm23H1的mRNA表达与转移及预后的相关性. 世界华人消化杂志，2000;8:887-891
14 王维,罗和生,余保平. 端粒酶与大肠癌. 世界华人消化杂志，2000;8:800-802
15 卿三华,蒋会勇,齐德林,周正端,黄祥成,张福明,盛权根. 影响大肠癌淋巴结转移的因素间相关性探讨. 世界华人消化杂志，2000;8:654-657
, 百拇医药
16 赵任, 郁宝铭, 张国弛, 郑民华, 李东华, 黄梁, 邹鸿志. 手术前后补硒对大肠癌患者的免疫功能及抗氧化功能的影响.
世界华人消化杂志，2000;8:1013-1016
17 王青, 吴金生, 赖大年, 马庆久, 潘伯荣. 抑癌基因P16蛋白在大肠腺癌组织中的表达及意义. 世界华人消化杂志, 1999;7:1047-1048
18 Lopez Guerrero JA, Bolufer Gilabert P, Vera Sempere FJ, Marugan de la Concha I, Barragan Gonzalez E. C-erbB-2 expression and
its relationship with ploidy, P53 abnormalities and epidermal growth factor receptor content in human non-small cell lung
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human breast cancer in comparison with cathepsin D,stromelysin-1, CD44, extracellular matrix components, p53, Rb, C-erbB-2,EGFR, steroid receptor content and proliferation. Anticancer Res, 1999;19:2133-2139
20 Slesak B, Harlozinska A, Porebska I, Bojarowski T, Lapinska J, Rzeszutko M, Wojnar A. Expression of epidermal growth factor
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receptor family proteins (EGFR, c-erbB-2 and c-erbB-3)in gastric cancer and chronic gastritis. Anticancer Res,
1998;18:2727-2732
21 郑祥雄, 王小众, 林谷珍, 王平. c-erbB-2基因产物及PCNA在大肠癌组织中的表达及其临床意义. 世界华人消化杂志, 1999;7:274
22 米建强, 杨石强, 沈铭昌. 胃癌及癌前病变组织中c-erbB-2癌基因产物的表达. 新消化病学杂志, 1997;5:152-153
23 马祥君, 王启堂, 张永生. 乳腺癌C-erB-2、表皮生长因子受体基因蛋白表达与预后的关系. 癌症, 1998;16:111-113
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24 于永利. 生长因子的信号传递异常和恶性肿瘤的发生. 中国免疫学杂志, 1999；15：289-290
25 Tong WM, Ellinger A, Sheinin Y, Cross HS. Epidermal growth factor receptor expression in primary cultured human
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26 Ruck A, Paulie S. The epidermal growth factor receptor is involved in autocrine growth of human bladder carcinoma cell
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27 Wang HM, Rajagopal S, Chakrabarty S. Inhibition of human colon cancer malignant cell behavior and growth by antisense
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28 庄小强, 赖日权, 孙桂华, 王晓怀, 袁世珍. 大肠癌P53蛋白与PCNA表达的预后意义. 世界华人消化杂志, 1999;7:616
29 王述民, 吴金生, 要秀, 何泽生, 潘伯荣. TGFα，EGFR反义寡聚核苷酸抑制人大肠癌细胞的增殖. 世界华人消化杂志, 1999;7:522-524
30 王青, 吴金生, 高德明, 赖大年, 马庆久. EGF受体和转化生长因子α mRNA在人大肠癌组织的表达意义. 世界华人消化杂志, 1999;7:590-592, http://www.100md.com(曲 娴1 刘建平2 曲 宏3 孙红霞1 )