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编号:10697087
BEL-7402、HLE及HuH-7细胞p53基因突变检测
http://www.100md.com 2001年11月15日 《世界华人消化杂志》 2001年第11期
肝肿瘤,病理学;肿瘤细胞,培养;基因,p53;突变,项目负责人,摘,要,目的,方法,结果,结论,主题词,0,引言,1,材料和方法,1.1材料,1.2,2,结果,2.1三株肝癌细胞p53基因外显子测序,图,1,2,p53cDNA,序列:,2.2HLE,细胞p53基因PCR-RFLP,3,3,讨论
     中国人民解放军302医院生物工程研究室 北京市 100039

    项目负责人 王福生,100039,北京市丰台路26号,中国人民解放军 302医院生物工程研究室.fushengw@yahoo.com

    Telephone: 010-66933332 Fax: 010-63831870

    收稿日期 2001-07-19 接受日期 2001-08-01

    目的 了解BEL-7402、HLE及HuH-7 3株肝癌细胞系p53基因突变 状况,为研究利用此3株细胞系奠定基础.

    方法 采用DNA测序及PCR-RFLP检测p53基因第5~8外显子突变状 况.

    结果 BEL-7402细胞p53基因第5~8外显子未发生突变;HLE细胞 p53基因第7外显子第244密码子由GGC变为GCC,相应的氨基酸由甘氨酸(G)变成丙氨酸(A );HuH-7细胞p53基因第6外显子第220个密码子由TAT变为TGT,相应的氨基酸由酪氨酸 (Y)变成半胱氨酸(C).

    结论 BEL-7402具有野生型p53基因,HLE及HuH-7细胞具有突变 型p53基因.

    主题词 肝肿瘤/病理学;肿瘤细胞,培养;基因,p53;突 变

    施明,王福生,刘明旭,金磊,施红,雷周云.BEL-7402、HLE及HuH-7细胞p 53基因突变检测.世界华人消化杂志,2001;9(11):1330-1332

    0 引言在肝癌基因治疗中,抑癌基因p53是常用的治疗基因[1,2],在以往的实验中发 现,外源性野生型p53基因对BEL-7402、HLE及HuH-7三株肝癌细胞的抑制程度不同 [3],推测可能与其p53基因是否突变有关,因此本研究对此3株肝癌细胞 系p53基因突变状况进行检测,为今后研究利用此3株肝癌细胞奠定基础.

    1 材料和方法

    1.1 材料
HaeⅢ酶(NEB),QIAamp Blood Kit(QIAGEN),Gene Amp PCR system 9600(Perkin Elmer),310 genetic analyzer (Perkin Elmer).收集指数 生长期的BEL-7402、HLE和HuH-73株肝癌细胞 ......

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