肝细胞体外培养技术的研究现状
项目负责人,摘要,0引言,1,肝细胞原代分离和储存,1.1肝细胞原代分离,1.2肝细胞的储存方法,2,肝细胞培养液中的关键补充物,2.1二甲基亚砜(DimethylSulfoxide,DMSO),2.2尼克酰胺(Nicotinamide),2.3抗坏血酸(L-ascorbicacid2-phosphate,Asc-2
张颖,白雪帆,黄长形,中国人民解放军第四军医大学唐都医院传染科 陕西省西安市 710038吴军正，中国人民解放军第四军医大学口腔医学院口腔生物学教研室 陕西省西安市 710033
项目负责人 白雪帆，710038，陕西省西安市第四军医大学唐都医院传染科
电话：029-3377452 传真：029-3377452
收稿日期 2001-09-14 接受日期 2001-10-16
摘要
本文综述了肝细胞原代分离、低温冻存、培养液补充物、常用肝细胞培养方法等肝细胞体外培养的有关内容，强调非实质细胞和基质生物学在维持细胞形态和功能方面的重要性.体外肝细胞培养技术及其应用方式都取得了长足进步，反映了肝组织生物学的重大进展.许多新技术已应用于临床，取得良效，如微囊肝技术用于肝细胞移植﹑肝细胞中空毛细血管三维培养技术用于生物型人工肝支持系统等.随着肝细胞生物学和细胞培养技术以及细胞工程技术的发展，我们将能更好地模拟肝细胞的体内生长环境，从而体外大规模长期培养活力旺盛﹑功能良好的肝细胞，应用于临床.
张颖，白雪帆，黄长形，吴军正.肝细胞体外培养技术的研究现状.世界华人消化杂志 2002;10(3):343-345
0 引言
肝细胞是一种分化程度很高的细胞，一旦失去体内的生存环境，则很快失去分化再生的能力.原代肝细胞在一般培养条件下，几个小时内便丧失其缝隙连接，几天内丧失其组织特异性代谢活动[1].长期稳定地大规模体外培养活力旺盛﹑功能良好的肝细胞在诸如人工肝支持系统
[2-10]﹑肝细胞移植[11,12]﹑基因治疗[13,14]﹑药物毒性评价及药代动力学研究[15-17]等方面具有广泛的用途.因此，尽量延长肝细胞的体外培养时间，尽可能保存肝细胞的生物学活性，保持其表型稳定，对医学研究具有重要意义.
1 肝细胞原代分离和储存
1.1 肝细胞原代分离 肝细胞原代分离的方法很多，有机械分离法、胶原酶分离法、胰蛋白酶消化法、含螯合剂(EDTA﹑枸橼酸钠﹑Garfield焦磷酸盐等)的无钙离子溶液灌注法、酸性磷酸盐灌注法等. 1967年 ......
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