人抗菌肽FALL－39基因定点突变体的构建及其大肠杆菌表达产物的抗菌活性研究
FALL-39是抗菌肽Cathelicidin家族中惟一存在于人体的线形肽，它虽然具有广谱的抗菌活性，但其抗菌活性较低，而且还可溶解正常的红细胞。四川大学华西基础医学与法医学院的研究人员改造其分子结构，以期得到有抗菌活性而没有血细胞溶解活性的新的变构分子。k(xm, 百拇医药
方法：采用PCR体外定点突变技术(PCR-SDM)，设计两对引物，引入一个突变点，通过重叠延伸法两次PCR扩增，使FALL-39第32位密码子由AAT突变为AAG，将扩增片段克隆入PGEΧλ1T质粒中，转化大肠杆菌JM109，并用IPTG诱导，表达的FALL-39-lys32经纯化后与FALL-39进行抗菌活性比较。结果：突变后的FALL-39-lys32蛋白对大肠杆菌ML-35p的最低抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MBC)分别由FALL-39蛋白的18.75和37.50微克/毫升降低为FALL-39-Lys-32的10.94和21.88微克/毫升，对绿脓杆菌ATCC27853的MIC和MBC值从31.25和37.50微克/毫升降为18.75和31.25微克/毫升。在同一种培养基中FALL-39-Lys-32蛋白抗菌活性要高于FALL-39蛋白。k(xm, 百拇医药
结论：获得的FALL-39-Lys32突变子，其表达分子的抗菌活性明显增强；在FALL-39分子中增加碱性氨基酸可以增强其抗菌活性。k(xm, 百拇医药
摘自《四川大学学报(医学版)》2003年第34卷第3期(《四川大学学报（医学版）》 )
方法：采用PCR体外定点突变技术(PCR-SDM)，设计两对引物，引入一个突变点，通过重叠延伸法两次PCR扩增，使FALL-39第32位密码子由AAT突变为AAG，将扩增片段克隆入PGEΧλ1T质粒中，转化大肠杆菌JM109，并用IPTG诱导，表达的FALL-39-lys32经纯化后与FALL-39进行抗菌活性比较。结果：突变后的FALL-39-lys32蛋白对大肠杆菌ML-35p的最低抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MBC)分别由FALL-39蛋白的18.75和37.50微克/毫升降低为FALL-39-Lys-32的10.94和21.88微克/毫升，对绿脓杆菌ATCC27853的MIC和MBC值从31.25和37.50微克/毫升降为18.75和31.25微克/毫升。在同一种培养基中FALL-39-Lys-32蛋白抗菌活性要高于FALL-39蛋白。k(xm, 百拇医药
结论：获得的FALL-39-Lys32突变子，其表达分子的抗菌活性明显增强；在FALL-39分子中增加碱性氨基酸可以增强其抗菌活性。k(xm, 百拇医药
摘自《四川大学学报(医学版)》2003年第34卷第3期(《四川大学学报（医学版）》 )