成军,王刚, 刘妍,邵得志, 张玲霞,陈菊梅,中国人民解放军第302医院传染病研究所基因治疗研究中心、全军病毒性肝炎防治研究重点实验室 北京市 100039

    国家自然科学基金资助课题,No. C39970674, No. C03011402

    军队回国留学人员启动基金项目,No. 98H038

    项目负责人:成军, 100039, 北京市西四环中路100号，中国人民解放军第302医院传染病研究所基因治疗研究中心,全军病毒性肝炎防治研究重点实验室. cj@genetherapy.com.cn

    电话:010-66933391 传真:010-63801283

    收稿日期:2004-03-15 接受日期:2004-05-11

    摘要

    目的:应用分子生物学和生物信息学方法，寻找、克隆大鼠肝再生相关基因LRRP1的人的同源基因，阐明LRRP1基因的结构和功能，为研究肝脏再生调节的分子生物学机制奠定基础.

    方法:利用美国国立卫生研究院建立的核苷酸数据库(GenBank)以及相应的核苷酸序列同源性搜索分析软件(BLASTN)，以大鼠的LRRP1的cDNA序列作为参照，对于人的同源性cDNA序列进行搜索分析，寻找人的LRRP1的同源基因序列.利用蛋白质一级结构序列的数据库以及相应的同源蛋白序列的搜索分析，阐明人LRRP1蛋白质一级结构与已知蛋白序列的同源性，从而根据蛋白质一级结构的相似性，对于新克隆基因进行功能方面的预测分析.应用在线软件的分析，对于人LRRP1蛋白质一级结构序列进行分析预测，分析其氨基末端序列是否具有信号肽序列，以判断人LRRP1蛋白是否是一种可以分泌表达的蛋白;同样对人LRRP1蛋白质一级结构序列进行在线软件的分析，对于人LRRP1蛋白质分子结构中的潜在的糖基化位点以及其他类型的修饰位点进行预测.

    结果:人的LRRP1的编码基因由480nt组成，编码产物由159aa组成. 人LRRP1的蛋白质一级结构序列与人琥珀酸脱氢酶亚单位D、牛琥珀酸脱氢酶亚单位D高度同源，同源性分别为79%(126/159)，78%(123/156). 人LRRP1是一种分泌蛋白，在其分子结构中具有N-糖基化位点、蛋白激酶C磷酸化位点和豆蔻脂化修饰位点.

    结论:人LRRP1蛋白是一种新型的琥珀酸脱氢酶的亚单位编码基因. ......