黄燕萍,成军, 王琳,杨倩, 杨瑗,白桂芹, 刘敏,中国人民解放军第302医院传染病研究所基因治疗研究中心,全军病毒性肝炎防治研究重点实验室 北京市 100039

    张树林,西安交通大学第一医院传染科 陕西省西安市 710061

    国家自然科学基金攻关项目,No. C03011402, No. C30070689

    军队“九、五”科技攻关项目,No. 98D063

    军队回国留学人员启动基金项目,No. 98H038

    军队“十、五”科技攻关青年基金项目,No. 01Q138

    军队“十、五”科技攻关面上项目,No. 01MB135

    项目负责人:成军,100039, 北京市西四环中路100号，中国人民解放军第302医院传染病研究所基因治疗研究中心,全军病毒性肝炎防治研究重点实验室. cj@genetherapy.com.cn

    电话:010-66933391 传真:010-63801283

    收稿日期:2004-03-15 接受日期:2004-05-11

    摘要

    目的:丙型肝炎病毒(HCV)F蛋白是一个新的HCV基因产物，其生物学特性目前尚不明确，我们应用酵母双杂交系统Ⅲ技术进行筛选F蛋白结合蛋白基因.

    方法:构建F蛋白诱饵质粒，转化酵母AH109后与含肝细胞cDNA文库质粒的酵母Y187进行配合，在涂有X-a-gal营养缺陷型培养基(SD/-Trp-Leu-His-Ade)上筛选生长.挑选蓝色克隆，提取此酵母克隆的质粒，转化大肠杆菌提取质粒DNA后测序，进行生物信息学分析.

    结果:筛选出36个与F蛋白特异性相互作用的克隆，其中11个为人类酶原颗粒蛋白，5个锌指蛋白，6个SL15蛋白，2个过氧化物酶体离子蛋白酶，1个补体调节蛋白因子，2未知功能基因.

    结论:克隆到的基因对以后研究F蛋白的功能有一定提示作用.

    黄燕萍,成军, 王琳,杨倩, 杨瑗,白桂芹, 刘敏,张树林. 酵母双杂交技术筛选HCVF蛋白结合蛋白基因.世界华人消化杂志 2004;12(7):1701-1704

    0 引言丙型肝炎病毒(HCV)属黄病毒科，基因组为单股正链RNA，长度约为9.6千碱基对(kb) ......