MEBO对家兔内毒素血症血液粘度和TNF-α 的影响
山东省滨州医学院(256603) 邱世翠 周颖斌 胡 涛
[摘 要] 目的：检测MEBO对家兔内毒素血症血液粘度和TNF-α的影响。方法：利用LBY-N6型血液粘度计测定在115 s-1和10 s-1切变率下的血 液粘度。采用ELISA双抗体夹心法检测TNF-α水平。结果：试验组注射内毒 素前后血液粘度相比P>0.05。对照组注射内毒素前后血液粘度相比P<0.01。内毒素血症 TNF-α水平试验组与对照组相比P<0.05。结论：MEBO可改善内毒素血症血液粘度，可降低内毒素血症TNF-α水平。
[关键词]MEBO 内毒素血症 TNF-α 血液粘度
The Effect of MEBO on Blood Viscosity and Tumor Necrosis Factor-α(TNF-α) Produ ction in Endotoxicemia of Rabbit Qiu Shicui, Zhou Yingbin, Hu Tao. Binzh ou Medical College, Binzhou, Shandong Province 256603
[Abstract] Objective: To examine the effect of MEBO on blood viscosity and TNF-α production in endotoxicemia of rabbit. Methods: Blood viscosity and TNF-α were detected using Type LBY-N6 blood viscometer (with shear rates of 115s-1 and 10s-1) and ELISA respectively. Results: There was no difference in blood viscosity between prior to and post endotoxin injections at 1 hr and 2 hr, in the test group (P>0.05), but in control group, the difference was very obvio us (P<0.01). There was significant difference in TNF-α level in endotoxicemia b etween the test group and the control group (P<0.05). Conclusion: MEBO could imp rove blood viscosity and reduce TNF-α level in endotoxicemia.
[Key words] MEBO Endotoxicemia TNF-α Blood viscosity
细菌内毒素又称脂多糖(LPS)，是革兰氏阴性菌细胞壁的主要结构成分之一。脂多糖只有细菌死亡菌体裂解时释放，对动物有毒性，故称内毒素。内毒素是造成G-杆菌败血症和感染性休克的重要原因。以往被认为内毒素休克由内毒素直接引起，但动物实验证实，TNF与内毒素所致的休克密切相关[1]。基于以上认识本实验检测了MEBO对G-大肠杆菌内毒素血症全血粘度和TNF-α水平的影响。实验结果如下。
一、材料和方法
(一) 材料
MEBO：北京光明中医烧伤创疡研究所研制。肿瘤坏死因子-α(TNF-α)试剂盒：购于第四军医大学免疫学教研室。LBY-N6型旋转血液粘度计：北京宇华国际技术合作公司制造。MS型全自动酶标仪：美国制造。大肠杆菌内毒素：本教研室制备。
(二) 实验方法和分组
取体重为2kg～2.5kg的健康家兔16只(由本院动物室提供)雌雄不限，分为MEBO试验组和正常对照组，每组8只。在试验组的家兔背部去毛区(约7×8cm)涂抹MEBO，2次/天，共7天，第8天从家兔心脏抽血5ml，置于含有肝素抗凝的干试管内3ml以备检测全血粘度用。将另外2ml血装入清洁小试管内分离血清，-20℃保存以备测TNF用。随即于家兔耳静脉注入粗制大肠杆 菌内毒素0.25ml/kg，造成内毒素血症。
二、检测指标
(一) 全血粘度
取全血0.8ml，测定切变率为115s-1和10s-1
时的全血粘度。
(二) 肿瘤坏死因子α水平检测
采用ELISA双抗体夹心法，操作步骤按试剂盒说明书进行。用MS型全自动酶标仪检测。
三、结 果
(一) 家兔注射内毒素后的体温变化(见表1)
(二) MEBO对家兔内毒素血症全血粘度的影响(见表2)
(三) MEBO对家兔内毒素血症TNF-α水平的影响(见表3)。
四、讨 论
内毒素是革兰氏阴性菌主要致病物质，人们很早发现内毒素对血管内皮细胞具有激活和损伤作用，并可导致局部炎症反应，发热反应和血管舒缩功能紊乱，DIC等病理改变。内毒素在CD14的介导下可直接激活血管内皮细胞。另一途径是内毒素先激活单核细胞、T细胞等免疫活性细胞，使其释放TNF和IL-1β等细胞因子[2]。这些因子与内毒素一起活化和损伤内皮细胞，导致血管通透性增加，严重者可发生多系统器官衰竭。内毒素所导致的以上症状的病理生理改变比较复杂，但TNF-α似乎在其中起着重要作用。
从家兔内毒素血症实验中观察到MEBO使家兔体温升高，从而使血流速度加快。MEBO能增强吞噬细胞的吞噬功能[3]，改善微循环，有利于内毒素的清除，减少了TNF介质的释放 。实验结果表明，MEBO可改善内毒素血症全血粘度和降低TNF-α水平。据此推测MEBO能够减轻内毒素血症造成的内皮细胞的损伤，对多系统器官衰竭具有防治作用。
参考文献
[1]傅小兵编著.生长因子与创伤修复.人民军医出版社，1991，137
[2]赵虎，张玲珍综述细菌内毒素对血管内皮细胞的激活损伤作用国外医学 ，微生物学分册，1999，22(6)：14
[3]曲云英等.MEBO抗感染机理实验研究.中国烧伤创疡杂志，1996，(1)：19, 百拇医药
[摘 要] 目的：检测MEBO对家兔内毒素血症血液粘度和TNF-α的影响。方法：利用LBY-N6型血液粘度计测定在115 s-1和10 s-1切变率下的血 液粘度。采用ELISA双抗体夹心法检测TNF-α水平。结果：试验组注射内毒 素前后血液粘度相比P>0.05。对照组注射内毒素前后血液粘度相比P<0.01。内毒素血症 TNF-α水平试验组与对照组相比P<0.05。结论：MEBO可改善内毒素血症血液粘度，可降低内毒素血症TNF-α水平。
[关键词]MEBO 内毒素血症 TNF-α 血液粘度
The Effect of MEBO on Blood Viscosity and Tumor Necrosis Factor-α(TNF-α) Produ ction in Endotoxicemia of Rabbit Qiu Shicui, Zhou Yingbin, Hu Tao. Binzh ou Medical College, Binzhou, Shandong Province 256603
[Abstract] Objective: To examine the effect of MEBO on blood viscosity and TNF-α production in endotoxicemia of rabbit. Methods: Blood viscosity and TNF-α were detected using Type LBY-N6 blood viscometer (with shear rates of 115s-1 and 10s-1) and ELISA respectively. Results: There was no difference in blood viscosity between prior to and post endotoxin injections at 1 hr and 2 hr, in the test group (P>0.05), but in control group, the difference was very obvio us (P<0.01). There was significant difference in TNF-α level in endotoxicemia b etween the test group and the control group (P<0.05). Conclusion: MEBO could imp rove blood viscosity and reduce TNF-α level in endotoxicemia.
[Key words] MEBO Endotoxicemia TNF-α Blood viscosity
细菌内毒素又称脂多糖(LPS)，是革兰氏阴性菌细胞壁的主要结构成分之一。脂多糖只有细菌死亡菌体裂解时释放，对动物有毒性，故称内毒素。内毒素是造成G-杆菌败血症和感染性休克的重要原因。以往被认为内毒素休克由内毒素直接引起，但动物实验证实，TNF与内毒素所致的休克密切相关[1]。基于以上认识本实验检测了MEBO对G-大肠杆菌内毒素血症全血粘度和TNF-α水平的影响。实验结果如下。
一、材料和方法
(一) 材料
MEBO：北京光明中医烧伤创疡研究所研制。肿瘤坏死因子-α(TNF-α)试剂盒：购于第四军医大学免疫学教研室。LBY-N6型旋转血液粘度计：北京宇华国际技术合作公司制造。MS型全自动酶标仪：美国制造。大肠杆菌内毒素：本教研室制备。
(二) 实验方法和分组
取体重为2kg～2.5kg的健康家兔16只(由本院动物室提供)雌雄不限，分为MEBO试验组和正常对照组，每组8只。在试验组的家兔背部去毛区(约7×8cm)涂抹MEBO，2次/天，共7天，第8天从家兔心脏抽血5ml，置于含有肝素抗凝的干试管内3ml以备检测全血粘度用。将另外2ml血装入清洁小试管内分离血清，-20℃保存以备测TNF用。随即于家兔耳静脉注入粗制大肠杆 菌内毒素0.25ml/kg，造成内毒素血症。
二、检测指标
(一) 全血粘度
取全血0.8ml，测定切变率为115s-1和10s-1
时的全血粘度。
(二) 肿瘤坏死因子α水平检测
采用ELISA双抗体夹心法，操作步骤按试剂盒说明书进行。用MS型全自动酶标仪检测。
三、结 果
(一) 家兔注射内毒素后的体温变化(见表1)
(二) MEBO对家兔内毒素血症全血粘度的影响(见表2)
(三) MEBO对家兔内毒素血症TNF-α水平的影响(见表3)。
四、讨 论
内毒素是革兰氏阴性菌主要致病物质，人们很早发现内毒素对血管内皮细胞具有激活和损伤作用，并可导致局部炎症反应，发热反应和血管舒缩功能紊乱，DIC等病理改变。内毒素在CD14的介导下可直接激活血管内皮细胞。另一途径是内毒素先激活单核细胞、T细胞等免疫活性细胞，使其释放TNF和IL-1β等细胞因子[2]。这些因子与内毒素一起活化和损伤内皮细胞，导致血管通透性增加，严重者可发生多系统器官衰竭。内毒素所导致的以上症状的病理生理改变比较复杂，但TNF-α似乎在其中起着重要作用。
从家兔内毒素血症实验中观察到MEBO使家兔体温升高，从而使血流速度加快。MEBO能增强吞噬细胞的吞噬功能[3]，改善微循环，有利于内毒素的清除，减少了TNF介质的释放 。实验结果表明，MEBO可改善内毒素血症全血粘度和降低TNF-α水平。据此推测MEBO能够减轻内毒素血症造成的内皮细胞的损伤，对多系统器官衰竭具有防治作用。
参考文献
[1]傅小兵编著.生长因子与创伤修复.人民军医出版社，1991，137
[2]赵虎，张玲珍综述细菌内毒素对血管内皮细胞的激活损伤作用国外医学 ，微生物学分册，1999，22(6)：14
[3]曲云英等.MEBO抗感染机理实验研究.中国烧伤创疡杂志，1996，(1)：19, 百拇医药