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编号:10617678
应用GelWorks软件定量分析PCR扩增产物
http://www.100md.com 《中华中西医杂志》 2004年第9期
增产物,RT-PCR,ε,γ血红蛋白基因,Gel,Works软件,定量分析
     【摘要】 目的 探讨Gel Works1D软件应用于PCR扩增产物的定性与定量分析。方法 提取孕妇全血mRNA,经体外逆转录后,应用ε/γ引物引导扩增胎儿特异血红蛋白基因片段,同时用不同剂量标准mRNA经逆转录及PCR扩增后,经琼脂糖凝胶电泳,以凝胶成像系统扫描成像,用Gel Works1D软件分析凝胶图像,绘制标准曲线,对样品进行定性与定量分析。结果 在7例妊娠妇女中,6例扩增出ε/γ基因片段(274bp),1例为阴性。定量标准曲线公式:Y=-2.83×10 -5 X 2 +0.06045X-2.265,R 2 =0.9401,6份样品中,胎儿mRNA在孕妇外周血中的浓度平均25.72ng/ml,最大值33.66ng/ml,最小值20.84ng/ml。结论 Gel Works1D分析软件,可以对样品mRNA或DNA进行定性与定量分析,由于影响PCR扩增的因素较多,标准曲线的线性关系受到一定程度的限制,适当增加或减少逆转录时的模板量可克服上述缺陷。

    关键词 RT-PCR ε/γ血红蛋白基因 Gel Works软件 定量分析

    Using Gel Works software to quantity the products of PCR

    Wang Binyou,Xu Tan,Chen Fei,et al.

    Public Health College,Harbin Medical University,Harbin150001

    【Abstract】 Objective Traditional prenatal diagnosis for congenital diseases were villus sampling and amnioˉcentesis.These invasive diagnosis methods are not only technical complicated ......

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