幽门螺杆菌Mr26000外膜蛋白编码基因的克隆及表达

http://www.100md.com 姜政 黄爱龙 陶小红 王丕龙 蒲丹

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     姜政；黄爱龙；陶小红；王丕龙；蒲丹 重庆医科大学第一附属医院消化科 重庆400016；重庆医科大学病毒性肝炎研究所 重庆400010 细胞与分子免疫学杂志 2002 4

    关键词：幽门螺杆菌；外膜蛋白基因；原核表达

    目的 构建含幽门螺杆菌 (Hp)Mr 2 6 0 0 0外膜蛋白编码基因的重组载体 ,并在E .coliBL2 1中表达。方法 用PCR从Hp染色体中 ,扩增Mr 2 6 0 0 0外膜蛋白编码基因片段。将目的基因与pET32a(+)同时经BamHI、HindⅢ双酶切、纯化、连接后 ,构建含有目的基因的重组载体。以含目的基因片段的重组载体转化大肠杆菌BL2 1(DE30 )并表达。表达产物经纯化后 ,用ELISA法检测其抗原性。结果 经酶切、测序分析表明 ,插入的基因片段为HpMr 2 6 0 0 0的外膜蛋白编码基因 ,与Tomb等的报道相比较 ,有 1.1%的bp发生变异 ,1.5 1%的氨基酸残基改变。经SDS PAGE分析发现 ,融...

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