β-葡萄糖醛酸苷酶基因转染的人肾癌细胞的生物学特性观察

http://www.100md.com 邵晨 秦卫军 温伟红 张 磊3 , 王 禾1 , 秦荣良 袁建林 邵国兴

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     邵晨；秦卫军；温伟红；张磊；王禾；秦荣良；袁建林；邵国兴 第四军医大学；第四军医大学基础部生物化学与分子生物学教研室；第四军医大学预防医学系第四军医大学西京医院泌尿外科 陕西西安710032 细胞与分子免疫学杂志 2003 2

    关键词：β葡萄糖醛酸苷酶；肾癌细胞；转染；超微结构

    目的 :建立高表达 β 葡萄糖醛酸苷酶 (以下简称 βG)基因的肾癌细胞模型 ,并观察转染细胞的生物学特性。方法 :构建真核表达载体 pcDNA3.1 βG ,并利用阳离子脂质体介导将其转入人肾癌细胞株GRC 1中。用mRNA打点杂交和Westernblot,鉴定其转录与表达水平 ,并通过光镜、电镜及细胞增殖周期检测等方法 ,观察转染细胞的生物学特性。结果 :在mRNA与蛋白水平证实 ,转染细胞内有 βG基因的高表达。透射电镜观察 ,转染细胞中的溶酶体、内质网丰富 ,细胞微绒毛及突起增多 ,但转染前后肾癌细胞GRC 1的周期及生长情况无显著性差别。结论 :应用脂质体介导法 ,将βG...

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