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编号:10626827
肿瘤蛋白质组学研究的新进展
http://www.100md.com 《中华中西医杂志》 2005年第7期
肿瘤,蛋白质组学,肿瘤,1蛋白质组学技术概述,2肿瘤蛋白质组学研究的进展,3问题及展望,参考文献
     【摘要】 随着蛋白质组研究策略及相关技术的逐渐完善,已越来越多地应用于生物医学领域,本文主要介绍蛋白质组学技术在肿瘤研究方面应用的新进展。

    【关键词】 蛋白质组学 肿瘤

    人类基因组计划(HGP)全基因组测序的完成,标志着后基因组时代的到来,其主要任务是分析细胞全部蛋白质的结构、功能和相互作用,即蛋白质组学。恶性肿瘤是危害人类的主要疾病之一,但其发生发展机制仍不清楚,诊断、治疗效果也不理想,而蛋白质组学方法可望为肿瘤发生机制的研究和防治带来新的突破,本文将介绍这一领域的进展。

     1 蛋白质组学技术概述

    蛋白质是细胞的功能产物,一个基因组所表达的全部蛋白质即为蛋白质组,可反映细胞当前功能状态,除了基因组成可决定蛋白表达,细胞及环境因素均可通过影响基因而调控蛋白表达,也可直接影响蛋白表达。蛋白质的表达或功能在从转录到翻译后过程中均受到调节,故mRNA表达水平不能代表细胞中活化蛋白量,由于转录产物能由多种方式修饰而产生不同类型蛋白,并且翻译后修饰对蛋白质的功能和活性有重要作用。经二维电泳分离的蛋白亚型常是翻译后蛋白调节的结果,蛋白分析技术的进展最终将使全蛋白质组分析成为可能,并将对细胞功能有更深入了解 [1,2] 。蛋白质组学技术分为分离技术和鉴定技术。蛋白质分离的基本技术是二维电泳,一维分离是以蛋白电荷差异为基础,二维分离以分子量不同为基础。分离后的胶块在银染色、放射或荧光标记后通常可显示蛋白点,对有兴趣的蛋白点可进一步鉴定。目前蛋白质鉴定的主要技术是质谱技术。蛋白或多肽可由液态被电喷雾离子化或由固态被基质辅助激光解吸离子化-时间飞行质谱仪(Matrix-assisted desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry,MALDI MS),离子的质量可由相应分析仪精确测定,如时间飞行分析仪(TOF)可测定离子由发出点到检测器(MALDI-TOF)的时间。也可用胰酶将切除的蛋白点消化为多肽混合物,多肽的质量可由质谱测定而产生肽质指纹图,在与数据库中理论上蛋白质消化后所预测的肽质量比较,可确认该蛋白。此外,表面增强激光解吸/离子化(Surface-enhanced Laser Desorption/Ionization,SELDI)与LC-MS,二维电泳结合质谱、ELISA等方法比较,具有可重复性好、敏感性高、易于操作、快速、经济的优点。SELDI也可检测出传统方法难以检测出的蛋白,如已使用SELDI从前列腺癌患者的血清中成功确定了前列腺特异性膜抗原(PSMA) ......

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