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编号:10673821
p11融合蛋白表达、纯化及抗血清的制备
http://www.100md.com 谭志平;黄亮群;郑多;房海燕;夏昆;夏家辉
p11(CalpactinI|lightchain)|融合蛋白|GST|亲和层析|抗血清,关键词:
    参见附件(65kb)。

     谭志平;黄亮群;郑多;房海燕;夏昆;夏家辉 中南大学中国医学遗传学国家重点实验室 长沙410078 湖南医科大学学报 2002 3

    关键词:p11(CalpactinI;lightchain);融合蛋白;GST;亲和层析;抗血清

    目的 :表达GST p11和 6xHis p11融合蛋白并制备GST p11特异性抗体。方法 :将人p11基因克隆入两种原核表达载体pGEX 4T 2和pQE30 ,分别在大肠杆菌BL2 1和M15中表达 ,用GlutathioneSepharose 4B和Ni NTAagar ose亲和柱分别纯化目的蛋白。利用纯化的GST p11蛋白制备多克隆抗体。结果 :得到高表达量的融合蛋白 ,经亲和层析柱纯化获得较高纯度的GST p11和 6xHis p11蛋白。以GST p11蛋白免疫新西兰兔得到p11多克隆抗体 ,Westernblotting证实该抗体能够识别 6xHis p11蛋白 ,具有较高特异性。结论 :利用原核表达人p11融合蛋白制备的p11多克隆抗体具有较好的特异.

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