移植研究中X-gal染色的影响因素及优化条件
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张琪；孟晋宏；罗娜；李静雯；鞠躬
β-半乳糖苷酶|lacZ基因|移植|脑|大鼠|小鼠,关键词：
参见附件(110kb)。
张琪；孟晋宏；罗娜；李静雯；鞠躬 第四军医大学神经科学研究所 西安710032 解剖学报 2002 3
关键词：β-半乳糖苷酶；lacZ基因；移植；脑；大鼠；小鼠
目的 研究在细胞移植过程中 ,利用X gal染色定位lacZ转基因细胞时 ,消除宿主内源性 β 半乳糖苷酶 (β galactosidase ,β Gal)非特异背景的条件。 方法 分别取成年及新生大小鼠 ,侧脑室注入LacZ转基因神经干细胞C17 2后 ,于两种不同灌注条件下取脑 ,在 5个pH点 ,6个孵育时间点行x Gal染色 ,计数不同条件下海马区非特异性着色细胞数 ,得出X gal染色的最佳条件。 结果 X gal染色中非特异染色随pH增高及孵育时间缩短而减少 ,在pH为 9 5 ,孵育时间为 1h时较为理想。并与宿主的种属 ,年龄有密切关系。 结论 X gal染色必须从动物灌注、pH和孵育时间...
关键词：β-半乳糖苷酶；lacZ基因；移植；脑；大鼠；小鼠
目的 研究在细胞移植过程中 ,利用X gal染色定位lacZ转基因细胞时 ,消除宿主内源性 β 半乳糖苷酶 (β galactosidase ,β Gal)非特异背景的条件。 方法 分别取成年及新生大小鼠 ,侧脑室注入LacZ转基因神经干细胞C17 2后 ,于两种不同灌注条件下取脑 ,在 5个pH点 ,6个孵育时间点行x Gal染色 ,计数不同条件下海马区非特异性着色细胞数 ,得出X gal染色的最佳条件。 结果 X gal染色中非特异染色随pH增高及孵育时间缩短而减少 ,在pH为 9 5 ,孵育时间为 1h时较为理想。并与宿主的种属 ,年龄有密切关系。 结论 X gal染色必须从动物灌注、pH和孵育时间...
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