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编号:10674861
DAAO/D-Ala系统对高致瘤性K562e细胞体外杀伤效应及其机制的研究
http://www.100md.com 王健民;翟勇平;张雨生;周虹;韩凤来
D-氨基酸氧化酶基因|基因表达|细胞系|K562,关键词:
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     王健民;翟勇平;张雨生;周虹;韩凤来 第二军医大学附属长海医院血液科 200433上海 中华血液学杂志 2002 1

    关键词:D-氨基酸氧化酶基因;基因表达;细胞系;K562

    目的 研究D 氨基酸氧化酶 (DAAO) /D 丙氨酸 (D Ala)自杀基因系统在基因治疗中的应用。方法 应用逆转录病毒转染技术获得稳定表达DAAO的高致瘤性K5 6 2e单克隆细胞KDfGC,用PCR、原位杂交技术对DAAO基因修饰的KDfGC细胞进行鉴定 ;通过细胞形态、活细胞计数观察细胞生物学特性 ;应用MTT法检测D Ala对KDfGC、不同比例DAAO表达阳性与阴性混合细胞的杀伤作用 ;用酚红氧化法测定培养上清H2 O2 水平。结果 PCR和原位杂交分析证明DAAO基因已整合至细胞基因组中 ,并在mRNA水平表达。KDfGC与未转基因的原肿瘤细胞相比 ,生长速度差异无显著性。 12 .5mmol/LD Al ...

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