HSV1-TK逆转录病毒载体构建及表达
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何祥梁；蒋小忠；何雪花；郭先健；黄桂君
逆转录病毒科|胸苷激酶|疮疹病毒1型|人|基因转染,关键词：
参见附件(326kb)。
何祥梁；蒋小忠；何雪花；郭先健；黄桂君 第一军医大学珠江医院呼吸科；广东广州 510282；第三军医大学新桥医院全军呼吸研究所；重庆 400037 第一军医大学学报 2001 6
关键词：逆转录病毒科；胸苷激酶；疮疹病毒1型；人；基因转染
目的 构建含TK基因逆转录病毒载体并检测其在转染细胞中的表达，为肺癌基因治疗积累实验资料。方法从 PHSV106质粒中切下约2.4kb TK基因片段，插入逆转录病毒载体PLXSN多克隆位点，酶切筛选正、反向连接质粒。正 向连接子电穿孔法转化肺癌细胞A549，用PCR、细胞原位杂交法分别检测TK基因整合和表达。结果 经酶切鉴定得到 正向连接子，电穿孔法转导A549细胞，经G418筛选出了转基因细胞，TK基因已整合在转染细胞中并阳性表达。结论 成功构建了含TK基因逆转录病毒载体，转导该载体的肺癌细胞可表达TK基因。
关键词：逆转录病毒科；胸苷激酶；疮疹病毒1型；人；基因转染
目的 构建含TK基因逆转录病毒载体并检测其在转染细胞中的表达，为肺癌基因治疗积累实验资料。方法从 PHSV106质粒中切下约2.4kb TK基因片段，插入逆转录病毒载体PLXSN多克隆位点，酶切筛选正、反向连接质粒。正 向连接子电穿孔法转化肺癌细胞A549，用PCR、细胞原位杂交法分别检测TK基因整合和表达。结果 经酶切鉴定得到 正向连接子，电穿孔法转导A549细胞，经G418筛选出了转基因细胞，TK基因已整合在转染细胞中并阳性表达。结论 成功构建了含TK基因逆转录病毒载体，转导该载体的肺癌细胞可表达TK基因。
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