逆转录病毒双顺反子策略有效转导和共表达ALDH1基因与mdr1基因的研究
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阳小卫；陈子兴；王玮；傅建新；国风；岑建农；夏学鸣
逆转录病毒|基因|醛脱氢酶|基因|多药耐药|基因表达,关键词：
参见附件(46kb)。
阳小卫；陈子兴；王玮；傅建新；国风；岑建农；夏学鸣 苏州大学附属第一医院、江苏省血液研究所 中华血液学杂志 2001 12
关键词：逆转录病毒；基因；醛脱氢酶；基因；多药耐药；基因表达
目的 研究含内在核糖体进入位点 (IRES)的逆转录病毒双顺反子载体介导的醛脱氢酶基因 (ALDH1 )与多药耐药基因 (mdr1 )转导和共表达。方法 以携带ALDH1与mdr1基因的重组逆转录病毒双顺反子G1Na ALDH1 IRES mdr1 (G1Na AIM)为载体 ,电穿孔法转导双嗜型包装细胞PA3 1 7,长春新碱筛选 ;所得病毒生产细胞PA3 1 7 AIM与单嗜型包装细胞GP +E86乒乓感染提高病毒滴度 ;以重组病毒上清转染K562细胞 ,应用聚合酶链反应 (PCR)和Southernblot检测转移基因的整合 ,流式细胞术(FCM)及MTT分析基因表达 ,集落培养法测定转导效率。结果 双嗜型病毒上清滴度达 1 .0×
关键词：逆转录病毒；基因；醛脱氢酶；基因；多药耐药；基因表达
目的 研究含内在核糖体进入位点 (IRES)的逆转录病毒双顺反子载体介导的醛脱氢酶基因 (ALDH1 )与多药耐药基因 (mdr1 )转导和共表达。方法 以携带ALDH1与mdr1基因的重组逆转录病毒双顺反子G1Na ALDH1 IRES mdr1 (G1Na AIM)为载体 ,电穿孔法转导双嗜型包装细胞PA3 1 7,长春新碱筛选 ;所得病毒生产细胞PA3 1 7 AIM与单嗜型包装细胞GP +E86乒乓感染提高病毒滴度 ;以重组病毒上清转染K562细胞 ,应用聚合酶链反应 (PCR)和Southernblot检测转移基因的整合 ,流式细胞术(FCM)及MTT分析基因表达 ,集落培养法测定转导效率。结果 双嗜型病毒上清滴度达 1 .0×
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