Egr-1启动子序列调控hytk表达的实验研究

http://www.100md.com 张芳林；叶传忠；赵旭东

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     张芳林；叶传忠；赵旭东 上海第二医科大学附属瑞金医院上海市内分泌研究所；上海第二医科大学附属新华医院泌尿外科；中国科学院上海生物工程研究中心 200025 中华泌尿外科杂志 2003 7

    关键词：膀胱肿瘤；基因；治疗学

    目的 探讨辐射诱导基因调控元件Egr 1调控的潮霉素磷酸转移酶和单纯疱疹病毒胸苷激酶(HSV TK)融合基因(hytk)对体外膀胱癌细胞的杀伤作用。 方法 采用重组DNA技术构建携带Egr 1调控序列的hytk基因表达载体,应用FuGENETM6系统转染膀胱癌细胞株EJ并检测hytk基因在辐射作用下的表达及联合更昔洛韦(GCV)对膀胱癌细胞的杀伤作用。 结果 成功获得带Egr 1启动子的真核表达载体pCIneo/Egr 1 hytk ,经FuGENETM6系统转染后经RT PCR、West ernBlot检测示hytk基因成功整合入EJ细胞中并在mRNA、蛋白质水平获得表达,辐射后2 4h的转基因细胞hytk含量较照射前明显...

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