4-1BBL基因真核表达载体构建及在肝癌细胞中表达的研究
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李国强；王学浩；印洁；俞悦
肝肿瘤|癌,肝细胞|基因重组|基因治疗|4-1BBL,关键词：
参见附件(57kb)。
李国强；王学浩；印洁；俞悦 南京医科大学第一附属医院肝脏外科江苏省肝脏移植中心 210029 中华肿瘤杂志 2003 4
关键词：肝肿瘤；癌,肝细胞；基因重组；基因治疗；4-1BBL
目的 研究含鼠源性4 1BBL真核表达载体体系的构建及其在大鼠肝细胞癌(HCC)细胞系CBRH7919中获得稳定、高效表达的方法。方法 将4 1BBL全长cDNA亚克隆到真核表达载体PCI neo中,获得4 1BBL定向插入重组子PCI neo 4 1BBL ,采用酶切法和测序法鉴定。用阳离子脂质体将PCI neo 4 1BBL转染CBRH7919,经G4 18筛选,获得阳性克隆,命名为PCI neo 4 1BBL CBRH7919+细胞。逆转录 聚合酶链反应(RT PCR)检测4 1BBL在CBRH7919中的表达。结果 PCI neo 4 1BBL经限制性内切酶切,电泳后显示有980bp的4 1BBL目的基因片段和5 .4kb的线性化PCI neo载体片段;重组子测...
关键词：肝肿瘤；癌,肝细胞；基因重组；基因治疗；4-1BBL
目的 研究含鼠源性4 1BBL真核表达载体体系的构建及其在大鼠肝细胞癌(HCC)细胞系CBRH7919中获得稳定、高效表达的方法。方法 将4 1BBL全长cDNA亚克隆到真核表达载体PCI neo中,获得4 1BBL定向插入重组子PCI neo 4 1BBL ,采用酶切法和测序法鉴定。用阳离子脂质体将PCI neo 4 1BBL转染CBRH7919,经G4 18筛选,获得阳性克隆,命名为PCI neo 4 1BBL CBRH7919+细胞。逆转录 聚合酶链反应(RT PCR)检测4 1BBL在CBRH7919中的表达。结果 PCI neo 4 1BBL经限制性内切酶切,电泳后显示有980bp的4 1BBL目的基因片段和5 .4kb的线性化PCI neo载体片段;重组子测...
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