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编号:10675697
ERCC1反义RNA降低肺癌细胞对苯并(a)芘所致DNA损伤的修复能力
http://www.100md.com 吴晓明;周宜开;徐顺清;郝巧玲;任恕
DNA修复|蛋白质类|苯并芘|RNA|反义|肺肿瘤|肿瘤细胞|培养的,关键词:
    参见附件(53kb)。

     吴晓明;周宜开;徐顺清;郝巧玲;任恕 华中科技大学同济医学院环境医学研究所 430030武汉 中华预防医学杂志 2003 5

    关键词:DNA修复;蛋白质类;苯并芘;RNA;反义;肺肿瘤;肿瘤细胞;培养的

    目的 探讨核苷酸切除修复基因ERCC1在肺癌细胞修复苯并(a)芘所致DNA损伤中的作用。方法 构建表达ERCC1反义RNA的重组质粒,Lipofectin转染肺癌A5 4 9细胞,潮霉素筛选出稳定转染的细胞克隆;噻唑蓝法检测2 4h细胞生存力;NorthernBlot分析细胞ERCC1基因mRNA表达水平;单细胞凝胶电泳技术检测DNA损伤程度,每组计算5 0个细胞损伤情况。结果 筛选出表达ERCC1反义RNA的7个阳性克隆,其生长特性与亲本细胞差别无显著性;内源性mRNA表达水平不同程度降低,为亲本细胞的12 %~86 % ;DNA损伤修复速度减慢,10 μmol/L苯并(a)芘作用2 4h后再孵育2 4h ,修复程度为亲本细...

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