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编号:10675599
新型基因工程干扰素受体结合域的改造及其生物活性测定
http://www.100md.com 胡荣;马学军;魏开坤;王虹;薛水星;段招军;侯云德;钱振超
干扰素α|抗体|病毒|DNA突变分析|受体|干扰素,关键词:
    参见附件(55kb)。

     胡荣;马学军;魏开坤;王虹;薛水星;段招军;侯云德;钱振超 中国预防医学科学院病毒学研究所病毒基因工程国家重点实验室 中华实验和临床病毒学杂志 2002 2

    关键词:干扰素α;抗体;病毒;DNA突变分析;受体;干扰素

    目的 改造干扰素功能结合域 ,以提高干扰素的生物学活性。方法 在新型基因工程干扰素 (IFNα1c 86D)AB环内通过点突变技术引入 2个独立酶切位点EcoRⅤ和EstEⅡ ,用聚合酶链反应 (PCR)技术在干扰素cDNA水平对母体干扰素LoopAB的 31位甲硫氨酸换成天冬氨酸 (M D) ,32位天冬氨酸换成脯氨酸 (D P) ,将重组基因在大肠埃希菌中表达 ,用滤泡口炎病毒 (VSV) 人羊膜传代细胞 (WISH)系统检测抗病毒活性。用比色MTT实验检测抗增殖活性。结果 通过突变 ,31和 32位氨基酸获得重组突变体 31 32IFNα1c 86D ,经限制性内切酶图分析、DNA序列和抗病毒活性测定 ,初步...

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