人Bcl-2蛋白的基因克隆、表达及初步活性分析
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胡美茹；张学敏；靳宝锋；兰雨；沈倍奋
hBcl-2|细胞凋亡|基因克隆|原核表达,关键词：
参见附件(66kb)。
胡美茹；张学敏；靳宝锋；兰雨；沈倍奋 军事医学科学院基础医学研究所 北京100850 中国免疫学杂志 2003 9
关键词：hBcl-2；细胞凋亡；基因克隆；原核表达
目的:以特定形式对高度疏水性的人Bcl 2 (hBcl 2 )蛋白进行可溶性表达,获得非疏水性hBcl 2蛋白并具备生物学结合活性,为进一步研究hBcl 2三维结构并在此基础上研发特异性小分子药物提供充足的蛋白样品。方法:用PCR方法对hBcl 2基因进行克隆重组,插入原核表达载体pET2 8a(+)中。用WesternBlot和MALDI TOF生物质谱鉴定,采用荧光极化方法进行活性测定。结果:重组hBcl 2在E .Coli中实现了高效、可溶性的融合表达,重组蛋白经纯化至电泳纯,具备了与Bcl 2家族Bak蛋白BH3功能域特异结合的能力,表明原核表达的重组hBcl 2具有较好的结合活性。结论:成功地对重组hB...
关键词：hBcl-2；细胞凋亡；基因克隆；原核表达
目的:以特定形式对高度疏水性的人Bcl 2 (hBcl 2 )蛋白进行可溶性表达,获得非疏水性hBcl 2蛋白并具备生物学结合活性,为进一步研究hBcl 2三维结构并在此基础上研发特异性小分子药物提供充足的蛋白样品。方法:用PCR方法对hBcl 2基因进行克隆重组,插入原核表达载体pET2 8a(+)中。用WesternBlot和MALDI TOF生物质谱鉴定,采用荧光极化方法进行活性测定。结果:重组hBcl 2在E .Coli中实现了高效、可溶性的融合表达,重组蛋白经纯化至电泳纯,具备了与Bcl 2家族Bak蛋白BH3功能域特异结合的能力,表明原核表达的重组hBcl 2具有较好的结合活性。结论:成功地对重组hB...
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