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编号:10677272
赖型钩端螺旋体外膜蛋白真核表达载体构建及表达的初步研究
http://www.100md.com 晏菊芳;鲍朗;胡昌华;李学敏;张会东
钩端螺旋体|质粒|真核细胞|表达,关键词:
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     晏菊芳;鲍朗;胡昌华;李学敏;张会东 华西医科大学感染免疫研究室 成都610041 中国人兽共患病杂志 2002 4

    关键词:钩端螺旋体;质粒;真核细胞;表达

    目的 测定所克隆的强毒力赖型钩端螺旋体OmpL1基因的序列 ,构建能够在哺乳动物细胞中表达赖型钩体OmpL1外膜蛋白的重组质粒。 方法 首先对自行构建的含有赖型钩端螺旋体OmpL1基因的重粗质粒 pAC -OmpL1进行插入片段的序列分析 ,然后将该质粒略作修改 ,使更适于在真核细胞中表达目的蛋白 ,同时将OmpL1基因亚克隆入另一个质粒pcDNA3中 ,采用限制性内切酶分析所得质粒的正确性。最后以脂质体转染法将两个重组质粒转入COS7细胞 ,以RT -PCR分析导入质粒的表达。结果 pAC -OmpL1中插入的赖型钩体OmpL1基因全长 96 0bp ,具有完整的阅读框架 ,与流感伤寒型钩...

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