杜氏利什曼原虫蛋白磷酸酶-2C的基因克隆化与序列分析
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成军；夏小兵；王刚；刘妍；钟彦伟；王琳；杨继珍
利什曼原虫|蛋白磷酸酶2C|基因疫苗|T细胞抗原|基因克隆化,关键词：
参见附件(52kb)。
成军；夏小兵；王刚；刘妍；钟彦伟；王琳；杨继珍 解放军第三○二医院传染病研究所基因治疗研究中心；北京；100039 中国人兽共患病杂志 2001 3
关键词：利什曼原虫；蛋白磷酸酶2C；基因疫苗；T细胞抗原；基因克隆化
目的 克隆杜氏利什曼原虫(Leishmaniadonovani,Ld)1S株蛋白磷酸酶2C(PP2C)的编码基因,为应用这种编码T细胞抗原的基因进行基因疫苗研究奠定基础。方法 体外培养杜氏利什曼原虫1S株无鞭毛体,常规方法从虫体提取制备基因组DNA。以夏科氏利什曼原虫(Leishmaniachagasi,Lc)的PP2C基因序列为参照,设计并合成利什曼原虫PP2C基因序列特异性的引物。结果 以杜氏利什曼原虫的基因组为模板,利用多聚酶链反应(PCR)技术,扩增获得了杜氏利什曼原虫PP2C的全长编码基因。基因序列测定结果表明,杜氏利什曼原虫1S株PP2C基因序列长度为1317bp,开放读码框架由1221bp组成,编码产物为406个氨基酸残基。获得的杜氏利什曼原虫1S株的PP2C基因与来源于夏科氏利什曼原虫的PP2C氨基酸残基序列的同源性为95%(387/406)。结论 本研究克隆了杜氏利什曼原虫的PP2C基因,为应用诱导T细胞免疫应答抗原的编码基因进行杜氏利什曼原虫的基因疫苗研究奠定了基础。
关键词：利什曼原虫；蛋白磷酸酶2C；基因疫苗；T细胞抗原；基因克隆化
目的 克隆杜氏利什曼原虫(Leishmaniadonovani,Ld)1S株蛋白磷酸酶2C(PP2C)的编码基因,为应用这种编码T细胞抗原的基因进行基因疫苗研究奠定基础。方法 体外培养杜氏利什曼原虫1S株无鞭毛体,常规方法从虫体提取制备基因组DNA。以夏科氏利什曼原虫(Leishmaniachagasi,Lc)的PP2C基因序列为参照,设计并合成利什曼原虫PP2C基因序列特异性的引物。结果 以杜氏利什曼原虫的基因组为模板,利用多聚酶链反应(PCR)技术,扩增获得了杜氏利什曼原虫PP2C的全长编码基因。基因序列测定结果表明,杜氏利什曼原虫1S株PP2C基因序列长度为1317bp,开放读码框架由1221bp组成,编码产物为406个氨基酸残基。获得的杜氏利什曼原虫1S株的PP2C基因与来源于夏科氏利什曼原虫的PP2C氨基酸残基序列的同源性为95%(387/406)。结论 本研究克隆了杜氏利什曼原虫的PP2C基因,为应用诱导T细胞免疫应答抗原的编码基因进行杜氏利什曼原虫的基因疫苗研究奠定了基础。
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