王培训 黄 丰 周 联 曹柳英 梁瑞燕 广州中医药大学临床药理研究所，广州 510407 中药新药与临床药理 1999 0 10 2


    关键词：随机扩增多态性；DNA；技术；利用；中药鉴别 期刊 zyxyylcyl 0 方法与技术交流 fur -->


    

摘要： 以各地产西洋参为研究对象，对影响中药材随机扩增多态性 DNA (RAPD) 的若干问题进行探讨。研究发现，中药材 DNA 模板的降解程度、纯度、浓度，Tap 酶的浓度， Mg²⁺ 浓度以及循环参数等诸多因素皆会不同程度的影响扩增结果，同时推荐一个较为适用的循环参数。

    分类号：R282.5；Q503；Q281

    文献标识码：A

RAPD^[1] 是一种以 10 bp 左右的短寡核苷酸为引物的 PCR (聚合酶链式反应)技术，由于 RAPD 无需知道被检样品的基因组序列，具有灵敏、简捷和对模板要求不高等特点，已经被广泛应用于物种的遗传进化、分类等方面。随着该技术的发展，近几年已用来鉴别中药材^[2～4] ，显示了良好的应用前景。然而在不同的报道中 RAPD 其最佳扩增条件有些出入。为了使 RAPD 结果在不同实验实具有重复性和可比性，提高 RAPD 技术在中药鉴别中的应用价值，根据我们实验的实际应用，对上述易影响 RAPD 的诸多因素进行了较为详细的论述。

    1 材料和方法

    1.1 中药材样品 采用各地产的西洋参作为样品(全部样品均为干品，由广州市药品检验所谢培山教授赠送) ......