我们应用聚合酶链反应(PCR)技术,研究23例再生障碍性贫血(再障)患者载脂蛋白B,E(Apo B,E)基因限制性片段长度多态性(RFLPs)。比较再障患者与正常人的Apo B基因XbaⅠ和EcoRⅠ酶切位点RFLPs的差异及ApoE基因HhaⅠ酶切位点RFLPs的差异,同时观察了与脂代谢的关系。

对象和方法

1 研究对象 再障组:根据宝鸡会议诊断标准确诊再障23例,其中重型再障(SAA)-Ⅱ型5例,慢性再障(CAA)18例。男16例,女7例;年龄16～52岁。对照组:经检验无脂代谢异常正常人30名,其中男10名,女20名;年龄26～48岁。

    2 研究方法 采集静脉血5ml,EDTA 1mg/ml抗凝。经低渗溶血,SDS裂解白细胞,蛋白酶E消化过夜,高盐沉淀法提取基因组DNA。PCR扩增含XbaⅠ和EcoRⅠ多态性位点的ApoB基因DNA片段及含HhaⅠ多态性位点的Apo E基因DNA片段。

    Apo B基因引物参照文献[1]设计:

    XbaⅠ-5′GGAGACTATTCAGAAGCTAA

    XbaⅠ-3′GAAGAGCCTGAAGACTCACT

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