逆转录病毒载体是目前基因治疗研究中最常用的外源基因转移工具。常规方法制备的重组逆转录病毒滴度较低，不能满足转染效率的需要。我们将逆转录病毒载体质粒转染混合培养的两种包装细胞PA317和GPE86，并在32℃条件下培养产病毒细胞，获得了比常规条件下滴度高一个数量级的重组逆转录病毒，现报道如下。

材料和方法

1 质粒和细胞株 包装细胞PA317、GPE86，NIH/3T3细胞及逆转录病毒载体质粒pLNCX、pLNC IL-2，均为美国南加州大学儿童医院周辰博士惠赠。

    2 主要试剂 脂质体转染剂Lipofectin、筛选用药物G418、细胞培养基DMEM均购自生命技术公司。

    3 细胞培养条件 PA317、GPE86和NIH/3T3细胞在37℃、5%CO₂ 、含10%胎牛血清和100U/L青、链霉素的DMEM中生长 ......