严海东 Jeffery D Zajac Marjorie E Dunlop Richard R Larkins 齐今吾 110001 中国医科大学第一临床学院内科(严海东、齐今吾)；澳大利亚皇家墨尔本医院内科(Jeffery D Zajac, Marjorie E Dunlop, Richard R Larkins) 中华内分泌代谢杂志 1998 0 14 6


    关键词：醛糖还原酶；转染；糖尿病并发症 期刊 zhnfmdxzz 0 论著 fur -->


    

【摘要】 目的 建立一内含人醛糖还原酶(hAR)cDNA的细胞株，并研究其在高葡萄糖环境中的基因表达及生化特性。方法 将全长hARcDNA基因插入质粒载体pcDNAneo中，并将AR正义、反义构建以及pcDNAneo载体本身分别转染至中华仓鼠卵巢(CHO)细胞中。用放免法测定这些细胞株在高糖环境中的山梨醇水平。用Northern杂交检测其mRNA表达，并用分光光度法检测AR活性。结果 有四株AR正义构建的细胞株显示了高山梨醇水平。随机将其中一株细胞作进一步分析，发现该细胞株具有ARmRNA表达，并且在高糖环境中AR活性亦显著升高。以上升高的山梨醇及酶活性均被AR抑制剂-HOE843所抑制。结论 本研究结果表明已成功地建立了一细胞系统，它为进一步研究AR在糖尿病并发症发病机理中的作用提供了手段。

The establishment of CHOcell line transfected with aldose reductase cDNA, its gene expression and biochemicalcharacters

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