人α-干扰素与乙型肝炎病毒前S2嵌合蛋白的表达纯化和鉴定
肝炎病毒,乙型|干扰素α|病毒融合蛋白质类,关键词:
关键词:肝炎病毒,乙型;干扰素α;病毒融合蛋白质类
【摘要】 目的 重组表达人α-干扰素与乙型肝炎病毒前S2融合蛋白(IFN-PreS2),探索治疗HBV感染的特异性免疫药物。方法 采用聚合酶链反应(PCR)技术扩增出人IFN-α2b和HBVPre S2基因片段,分步克隆获取融合基因,构建pBV-IFN-Pre S2重组表达载体,转化E.coli后诱导表达IFN-PreS2融合蛋白。结果 在E.coli中表达了相对分子质量为27 000的目标蛋白,后者以包含体形式存在,表达量占菌体总蛋白的15%。经过反相高效液相色谱(RP-HPLC)等步骤纯化后,目标蛋白纯度达到95%。复性的表达产物在体外测定具有相应的生物活性和免疫学特性,干扰素生物比活达到108 IU/mg蛋白质。融合蛋白能与抗IFN-α抗体、抗HBVPre S2抗体及多聚人血清白蛋白(PHSA)结合。结论 在原核系统中有效表达了具有高生物活性的IFN-PreS2融合蛋白。
Expression, purificationand identification of human IFN-α 2 b/HBV Pre S2 fusion protein
XU Dongping, HAN Fenglian, SHI Hong, et al.
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