马跃文 佟振月 侯显明 110001 沈阳，中国医科大学呼吸疾病研究所 中华内科杂志 1999 0 38 11


    关键词： 期刊 zhnkzz 0 论著摘要 fur -->


    

转化生长因子(TGF)-β是具有多种生物学功能的细胞生长因子家族，也是致纤维化的关键性细胞因子。TGF-β受体Ⅰ型和Ⅱ型参与信号的传递过程，故在TGF-β的生物调节功能中发挥重要作用。有关TGF-β受体在肺纤维化组织中的分布及变化报道尚少，本实验就此做一研究，进一步探讨TGF-β1如何发挥其调节功能。

    一、材料与方法

    1. 模型复制： 健康雄性 Wistar大鼠50只，体重150～200 g。分为2组，模型组：25只，0.5mg/100 g体重博 莱霉素A5(天津河北制药厂)加入0.3 ml生理盐水注入气管内，制成肺纤维化模型；对照组：25只，气管内注入0.3 ml生理盐水；两组于注射后1、3、7、14和28天各处死5只大鼠。

    2. 肺组织标本制备：硫喷妥钠麻醉后开胸，将肺内血液冲洗干净，向左肺下叶注入10%中性福尔马林固定，常规脱水，石蜡包埋。

    3. 免疫组化染色 ： TGF-β1、 TGF-βⅠ型和Ⅱ型受体均为兔多克隆抗体，购自美国Santa Cruz公司，ABC试剂盒购自Vector公司，按照说明书操作。根据着色的程度分级：(-)为无着色，(±)为浅黄色，(+)为棕黄色，(++)为深棕黄色，(+++)为棕褐色；阳性表达为(+～+++)。

    4. 定量分析： 高倍镜(×200)下每张切片计数200个肺泡巨噬细胞中的阳性细胞数，计算肺泡巨噬细胞阳性表达百分比。应用Luzex-F(日本)图像处理系统对输入的图像进行分析，在20倍物镜下，测定支气管上皮细胞和肺内间质在标准测量框(123461μ m² )中阳性区域的面积比 ......