乙型肝炎病毒特异性核酶与丁型肝炎病毒重组体的体外转录及切割活性
核酶乙型肝炎病毒丁型肝炎病毒转录,关键词：
关键词：核酶 乙型肝炎病毒 丁型肝炎病毒 转录
摘要 目的 研究乙型肝炎病毒(HBV)特异性核酶(简称rRZ)体外转录及切割HBV的活性。方法 将831 bp的HBV C基因片段克隆于T载体T7启动子下游，32 P标记转录后作为靶RNA(32 P-rHBV)。rRZ、rHDVRZA(插入有核酶结构的丁型肝炎病毒基因组重组体)和rHDVRZP(部分HDV基因组重组体)进行非标记的大量转录，转录产物经凝胶纯化后，与32 P-rHBV按一定比例和条件保温切割，电泳后放射自显影。结果 rRZ，rHDVRZP，rHDVRZA在37℃有活性，并随温度升高而提高，体外观察到重组体的切割活性，证明所设计的核酶结构是正确的。结论 将核酶基因插入到HDV基因组中，使其具有特异性切割HBV的活性，可实现核酶的保护性和靶向性运载，为下一步重组体的体内应用研究奠定了基础。
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