田学军 吴健 孟麟 寿成超 董志伟 100034 北京市肿瘤研究所北京医科大学临床肿瘤学院[田学军、吴健、孟麟、寿成超(联系作者)]；中国医学科学院肿瘤研究所(董志伟) 中华肿瘤杂志 1999 0 0 2


    关键词：胃肿瘤；血管内皮细胞生长因子；抗体，单克隆 期刊 zhzlzz 0 基础研究 fur -->


    

【摘要】 目的 从胃癌细胞MGC803克隆并在体外表达血管内皮细胞生长因子(VEGF),利用VEGF₁₂₁ 单克隆抗体对其产物进行鉴定，为进一步明确肿瘤组织中VEGF来源，并以VEGF为靶点治疗肿瘤奠定基础。方法 用杂交瘤技术制备VEGF₁₂₁ 单克隆抗体(McAb)，通过ELISA、³ H-TdR掺入检测其活性；用RT-PCR从MGC803细胞克隆VEGF基因，与原核表达载体PGEX2T重组,在大肠杆菌中进行表达，以Western blot 对表达产物进行鉴定。结果 所制备的VEGFMcAb能特异性地同VEGF结合，并能中和VEGF对内皮细胞的促增殖作用；利用RT-PCR扩增出特异的VEGF基因片段，重组到PGEX2T表达载体中，在大肠杆菌XL-1blue中得到了稳定高效表达的蛋白产物，并能特异性地被VEGF抗体所识别。结论 在MGC803细胞中存在VEGFmRNA表达，提示肿瘤细胞是肿瘤组织中VEGF的重要来源。VEGF McAb不仅可对其存在进行检测，而且可有效抑制VEGF对内皮细胞的促增殖作用，可望在肿瘤治疗中发挥作用。

Preparation of monoclonal antibodies to human vascular endothelialgrowth factor(VEGF₁₂₁ ) and identification of its expression on gastriccarcinoma cell line MGC803 TIAN Xuejun, WU Jian, MENG Lin, et al. Departmentof Biochemistry and Molecular Biology, The School of Oncology, Beijing Medical University,100034

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