仝文斌 高巍 费然 冯百芳 陶其敏 100044 北京医科大学人民医院肝病研究所 中华医学检验杂志 1999 0 0 2


    关键词：免疫酶技术；基因扩增；聚合酶链反应；肝炎病毒组；丙型 期刊 zhjyyxzz 0 论著摘要 fur -->


    

【摘要】 目的 以丙型肝炎病毒(HCV)-RNA(RNA)核酸扩增产物的量化酶免疫(EIA)通用型检测方法及试剂，以准确评价疗效，指导治疗。方法 选择合适的扩增循环数使聚合酶链反应(PCR)在“平台期效应”出现前即停止；同时将第2次PCR所用的引物进行生物素标记，使扩增产物带有生物素标记成分，再通过固相包被的链霉亲合素进行捕获、氢氧化钠解链变性、荧光素标记的HCV特异性探针杂交以及辣根过氧化物酶(HRP)标记的抗-荧光素酶标抗体反应后，TMB显色测定，通过显色反应颜色的深浅，反映样品中HCV-RNA模板的情况。结果 HCV-RNA扩增产物的EIA检测结果表明：所建立的方法操作简便、重复性好、特异性强、敏感度高、结果判断客观准确，而且可以反映样品中病原体核酸模板量的多少；干扰素治疗期间，HCV感染的慢性丙型肝炎患者不同时间系列血的动态检测结果提示，在临床监测治疗、评价疗效上，本方法具有较大的指导意义。结论 所建立的方法可以成为一种通用型检测技术，用于量化分析病毒、细菌等致病因子及人类某些基因(如HLAB₂₇ )的核酸扩增产物的研究，具有广阔的应用前景。

    Universal quantitative immunoenzyme assay for detecting the amplified products ofnucleic acid TONG Wenbin, GAO Wei, FEI Ran, et al. Institute of Hepatology,People′s Hospital, Beijing Medical University, Beijing 100044

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