杨正林 杨瑞馥 杜琼 郭兆彪 张敏丽 汪晓辉 杨明清

    610072 成都，四川省人民医院检验科(杨正林、杜琼、杨明清)；军事医学科学院微生物流行病研究所国家生物医学中心分析微生物实验室(杨瑞馥、郭兆彪、张敏丽、汪晓辉) 中华医学检验杂志 1998 9 21 5


    关键词：分枝杆菌；结核；聚合酶链反应；酶联免疫吸附测定 期刊 zhjyyxzz 0 *论著* fur -->


    

【摘要】 目的 建立结核分枝杆菌的PCR-酶联免疫吸附测定(ELISA)方法，使PCR结果判定更加客观。方法 我们使用玻璃粉吸附提纯模板DNA，将PCR引物5′端标记生物素，用PCR产物与微孔板中预先包被的克隆靶基因杂交，然后用酶标链霉亲和素与杂交体中的生物素结合，最后用酶底物与所标记酶进行显色反应，通过测定其吸光度来判断结果。结果 所建立的PCR-ELISA检测法可提高检测的灵敏度和特异性。对50份来自结核病人高度怀疑有结核分枝杆菌的标本检测表明，PCR-ELISA检出22份阳性，比抗酸染色法(7/50)、培养法(13/50)和PCR-电泳法(18/50)检出率高，而20份证实无结核分枝杆菌的标本，几种方法检查均为阴性。结论 该法可敏感、特异和客观地检测临床标本中的结核分枝杆菌。

    Detection of mycobacteriumtuberculosis by using polymerase chain reaction and microwell plate hybridization Yang Zhenglin^* , Yang Ruifu, Du Qiong, Guo Zhaobiao, Zhang Minli, Wang Xiaohui, Yang Mingqing ^* Clinical Laboratory, SichuanPeople′ s Hospital, Chengdu 610072, Sichuan Province

     ......