【摘要】 目的 探讨利用分子生物学方法直接快速检测临床标本结核分支杆菌利福平(RFP)药物敏感性的可行性。方法 自行设计针对rpoB基因特异扩增的引物(扩增产物为183 bp片段)，运用聚合酶链反应-单链构象多态性(PCR-SSCP)银染色法，检测45株结核分支杆菌临床分离株，对其中部分菌株进行rpoB基因DNA序列分析；运用PCR-SSCP银染色法对70份结核病患者痰标本进行直接快速检测，并与药敏试验结果做对照分析。结果 45株临床分离株中16株RFP敏感结核分支杆菌SSCP带谱与结核分支杆菌标准株(H₃₇ Rv)相同，29株RFP耐药株中有26株检测到突变图谱，阳性率为90%。从具有SSCP特征性带谱的菌株中筛选8株临床分离株进行rpoB基因序列分析显示：1株RFP敏感株无rpoB基因突变，7株耐药株均发生碱基突变(符合率100%)。碱基以单点突变为主，以531位碱基突变最为多见[4株531位TCG→TTG，Ser→Leu(57%)；1株531位TCG→CAG，Ser→Gln(14%)；2株526位CAC→TAC，His→Tyr(29%)]。与BACTEC对照临床痰标本直接快速检测阳性率为64%。结论 结核分支杆菌耐RFP是其rpoB基因突变所致 ......