吸入一氧化氮对妊高征患者血浆内皮素、血清一氧化氮影响的研究
【摘要】 目的 观察吸入一氧化氮对妊高征患者血浆内皮素及血清一氧化氮的影响，为治疗妊高征提供理论依据。 方法 将40例妊高征患者随机分为常规药物治疗组(20例)和NO治疗组(20例)，并对两组患者治疗前后的血清NO和血浆ET的变化情况进行对照比较(NO代谢终产物以NO -2 、NO -3 表示)。 结果 两组治疗后的血清NO均显著高于治疗前，ET、ET/NO则显著低于治疗前，NO治疗组P<0.01，常规药物治疗组P<0.05。 结论 与常规药物治疗组相比，吸入NO治疗妊高征具有更明显的疗效。
【关键词】 妊高征;一氧化氮;内皮素
The inhalation effect of nitric oxide on serum endotheline and nitric oxide in pa-tients with pregnancy induced hypertension
PENG Hua，CHEN Qiang，TANG Shu-Hui.
Research Institute of Treatment of Plateau Disease of PLA in General Hospital of Tibet Military Region，Lasa850003，China
【Abstract】 Objective To investigate the inhalation effects of nitric oxide on serum endotheline and nitric oxide in the treatment of PIH and find out the theoretic basis for the clinical application of nitric oxide in treatment in PIH.Methods 40patients with PIH are divided into treatment group of routine medicine(20patients)and treatment group of NO(20patients).To contrast in NO serum，ET in plasma of two group patients at pre-and post-therapy(NO is represented by its metabolic prodution NO -2 and NO -3 ).Results NO in serum of groups after treating are significant-ly higher than before treating respectively.ET is significantly lower than before treating.treatment group of NO P<0.01，treatment group of routine medicine P<0.05.Conclusion Compared with routine medicine PIH，nitric oxide inhalation is a kind of promising drug in treatment of moderate to severe PIH.
【Key words】 pregnancy induced hypertension;nitric oxide;endotheline
妊娠高血压综合征(妊高征，PIH)是孕妇在妊娠20周后出现的水肿、高血压、蛋白尿综合征。该病严重影响母婴健康，是孕产妇和围生儿病率及死亡率的主要原因，尽管本病特征已为临床医生所共识，但其病因至今尚末阐明，治疗多以预防、对症为主，近年来的研究表明:血管内皮损伤是PIH发病重要环节之一，当血管内皮细胞受损时，血管内皮舒张因子一氧化氮(NO)分泌减少，血管内皮收缩因子内皮素(ET)产生增加，导致舒张因子和收缩因子比例失调，致使血压升高，从而导致一系列病理生理变化。因此对内皮功能障碍进行可逆治疗，将成为PIH治疗领域的新趋势，本研究采用NO吸入疗法，治疗PIH患者20例，观察其对PIH患者血ET和NO的影响，现将结果报告如下。
1 资料与方法
1.1 研究对象 2003年6月～2004年3月期间我院妇产科住院的妊高征患者40例，其中中度25例，重度15例;年龄18～35岁，孕周35～41周，均为单胎，初产妇30例，经产妇10例，妊高征依断及分类标准以乐杰主编《妇产科学》第6版所定标准为准。以上病例均无心脏病、糖尿病及肾病史。
1.2 试验方法 共分为两组，常规药物治疗组用吸氧、硝苯地平、硫酸镁等对症治疗。NO治疗组采用BG-95型一氧化氮治疗仪(广州军区总医院与佛山空气分析仪器厂联合研制)给予吸入由海拔3658米高度的空气平衡的NO气体，用量10ppmm(0.001%)，流量5L/min，每天一次，每次0.5h，5天为一疗程。两组病人均在入院治疗前和治疗后第3天采集静脉血4ml，其中2ml血置于含EDTA二钠30μl和抑肽酶40μl的试管中混匀待测ET。另2ml加入空白试管中，室温下自发凝固待测NO -2 /NO -3 ，以上标本均在10min内于4℃低温情况下3000转/min离心10min，取血清及血浆置于-70℃冻存。试剂为北京华英生物技术研究所提供，检测步骤及方法按药盒说明进行。
1.3 统计学处理 采用SPSS11.0统计学软件进行统计学处理，组间数据采用均数标准差(ˉx±s)表示，经t检验P<0.05者具有统计学意义。
2 结果
两组治疗前ET、NO、ET/NO比值间差异无显著性(P>0.05)，治疗后血清NO均显著高于该组治疗前，ET、ET/NO值明显低于治疗前，NO治疗组P<0.01，常规药治疗组P<0.05，血清NO、血浆ET及ET/NO的变化情况见表1。
表1 两组治疗前、后血ET、NO、ET/NO比值变化情况 (略)
注:比较治疗前和治疗后 * P<0.05， ** P<0.01
3 讨论
妊高征的基本病理生理改变为全身小动脉痉挛，血管壁对血管加压素的反应消失，血管功能异常主要由血管内皮受损引起。妊高征时，由于胎盘螺旋动脉受损，绒毛血液回流减少引起局部缺血缺氧状态，内皮细胞损害因子(氧自由基、过氧化物质)等产生增多，在循环中释放，引起血管内皮细胞损害，从而产生大量ET，而NO不能相应的增加，引起ET与NO之间失衡，结果表现为血管内皮依赖性舒张功能受限，血小板聚集增加，平滑肌细胞增生，血栓形成及血管腔狭窄，导致妊娠高血压的发生、发展 [1] 。李力等 [2] 发现，PIH患者除了血浆NO明显低于孕晚期正常孕妇血浆的NO外，子宫及胎盘组织中诱导型iNOS-mRNA窄线杂交信号强度也明显低于正常妊娠组，提示PIH患者无论血浆、子宫或胎盘，均存在着NO水平下降以及iNOS-mRNA转录强度的下降，使以iNOS-mRNA作模板的mNOS蛋白质翻译减少，iNOS合成降低，最终引发内源性NO合成降低，从而引起一系列物理学效应，证明NO与PIH的发生有明显关系。Darley-Usmur等认为NO与氧自由基(O ·2 )有拮抗作用，发现NO的减少能使NO和O ·2 平衡倾向于O ·2 进一步损伤内皮细胞而引起血管舒张功能异常 [3] ，另外Myatt等发现NO具有削弱胎儿胎盘循环中血管内皮素等缩血管物质作用 [4] 。NO是一种无机小分了，是左旋精氨酸(L-Arg)在一氧化氮合酶(iNOS)作用下生成的，可迅速与水、氧和机体中广泛存在中血管内皮素等缩血管物质作用 [4] 。NO是一种无机小分子，是左旋精氨酸(L-Arg)在一氧化氮合酶(iN-OS)作用下生成的，可迅速与水、氧和机体中广泛存在的超氧自由基反应，生成硝酸盐和亚硝酸盐。NO的生理作用是舒张血管平滑肌，抗凝血及抑制血小板聚集 [5] 。因此NO对血管内皮细胞的修复、补充内源性NO生成不足、对抗缩血管物质、纠正ET/NO平衡紊乱起到重要作用。动物实验和临床研究证实，短时间吸入低浓度(<100×10 -6 )NO是安全的[6] 。在实际应用中我们采用吸入低浓度NO气治疗了20例PIH患者，收到了明显的疗效，患者头痛、恶心、呕吐等症状缓解，其血ET水平明显下降，血NO水平明显上升，ET/NO比值由治疗前的1.87±0.47降至1.27±0.48，对比药物治疗组，PIH患者血ET、NO、ET/NO虽然也有明显变化，但疗效不如NO治疗组。
【参考文献】
1 Taylor RN，Varma M，Teng NH，et al.Women with preeclampsia have higher plasma endothelin levels than womens with normal pregnancies.Clin Endocrinol Metab，1990，71(6):1675-1677.
2 李力，陈竹钦，徐有奇，等.一氧化氮合成酶mRNA转录强度对妊高征的影响.中国实用妇科与产科杂志，1997，13:27-28.
3 Darley-Usmur V，Wiseman H，Halliwel B.FEBS Lett，1995，369:131-135.
4 MyatL，Brewer AS，Langdon G，et al.Ects of throboxane and endotheoin by nitric oxide in the human fetal-placental.Am J Obstet Gyneool，1992，166:224-230.
5 Moncada S，Pslmer，RMJ，Higgs EA.Phamaool Rev，1991，43:109-142.
6 Rossaint R，Falck K J，Lopcz F，et al.Inhaled nitric oxide for the adult respiratory distress syndrome.J N Med，1993，328(6):399.
(编辑:罗 彬)
作者单位:850003西藏拉萨，西藏军区总医院高山病实验研究中心, 百拇医药(彭华 陈强 汤述慧)
【关键词】 妊高征;一氧化氮;内皮素
The inhalation effect of nitric oxide on serum endotheline and nitric oxide in pa-tients with pregnancy induced hypertension
PENG Hua，CHEN Qiang，TANG Shu-Hui.
Research Institute of Treatment of Plateau Disease of PLA in General Hospital of Tibet Military Region，Lasa850003，China
【Abstract】 Objective To investigate the inhalation effects of nitric oxide on serum endotheline and nitric oxide in the treatment of PIH and find out the theoretic basis for the clinical application of nitric oxide in treatment in PIH.Methods 40patients with PIH are divided into treatment group of routine medicine(20patients)and treatment group of NO(20patients).To contrast in NO serum，ET in plasma of two group patients at pre-and post-therapy(NO is represented by its metabolic prodution NO -2 and NO -3 ).Results NO in serum of groups after treating are significant-ly higher than before treating respectively.ET is significantly lower than before treating.treatment group of NO P<0.01，treatment group of routine medicine P<0.05.Conclusion Compared with routine medicine PIH，nitric oxide inhalation is a kind of promising drug in treatment of moderate to severe PIH.
【Key words】 pregnancy induced hypertension;nitric oxide;endotheline
妊娠高血压综合征(妊高征，PIH)是孕妇在妊娠20周后出现的水肿、高血压、蛋白尿综合征。该病严重影响母婴健康，是孕产妇和围生儿病率及死亡率的主要原因，尽管本病特征已为临床医生所共识，但其病因至今尚末阐明，治疗多以预防、对症为主，近年来的研究表明:血管内皮损伤是PIH发病重要环节之一，当血管内皮细胞受损时，血管内皮舒张因子一氧化氮(NO)分泌减少，血管内皮收缩因子内皮素(ET)产生增加，导致舒张因子和收缩因子比例失调，致使血压升高，从而导致一系列病理生理变化。因此对内皮功能障碍进行可逆治疗，将成为PIH治疗领域的新趋势，本研究采用NO吸入疗法，治疗PIH患者20例，观察其对PIH患者血ET和NO的影响，现将结果报告如下。
1 资料与方法
1.1 研究对象 2003年6月～2004年3月期间我院妇产科住院的妊高征患者40例，其中中度25例，重度15例;年龄18～35岁，孕周35～41周，均为单胎，初产妇30例，经产妇10例，妊高征依断及分类标准以乐杰主编《妇产科学》第6版所定标准为准。以上病例均无心脏病、糖尿病及肾病史。
1.2 试验方法 共分为两组，常规药物治疗组用吸氧、硝苯地平、硫酸镁等对症治疗。NO治疗组采用BG-95型一氧化氮治疗仪(广州军区总医院与佛山空气分析仪器厂联合研制)给予吸入由海拔3658米高度的空气平衡的NO气体，用量10ppmm(0.001%)，流量5L/min，每天一次，每次0.5h，5天为一疗程。两组病人均在入院治疗前和治疗后第3天采集静脉血4ml，其中2ml血置于含EDTA二钠30μl和抑肽酶40μl的试管中混匀待测ET。另2ml加入空白试管中，室温下自发凝固待测NO -2 /NO -3 ，以上标本均在10min内于4℃低温情况下3000转/min离心10min，取血清及血浆置于-70℃冻存。试剂为北京华英生物技术研究所提供，检测步骤及方法按药盒说明进行。
1.3 统计学处理 采用SPSS11.0统计学软件进行统计学处理，组间数据采用均数标准差(ˉx±s)表示，经t检验P<0.05者具有统计学意义。
2 结果
两组治疗前ET、NO、ET/NO比值间差异无显著性(P>0.05)，治疗后血清NO均显著高于该组治疗前，ET、ET/NO值明显低于治疗前，NO治疗组P<0.01，常规药治疗组P<0.05，血清NO、血浆ET及ET/NO的变化情况见表1。
表1 两组治疗前、后血ET、NO、ET/NO比值变化情况 (略)
注:比较治疗前和治疗后 * P<0.05， ** P<0.01
3 讨论
妊高征的基本病理生理改变为全身小动脉痉挛，血管壁对血管加压素的反应消失，血管功能异常主要由血管内皮受损引起。妊高征时，由于胎盘螺旋动脉受损，绒毛血液回流减少引起局部缺血缺氧状态，内皮细胞损害因子(氧自由基、过氧化物质)等产生增多，在循环中释放，引起血管内皮细胞损害，从而产生大量ET，而NO不能相应的增加，引起ET与NO之间失衡，结果表现为血管内皮依赖性舒张功能受限，血小板聚集增加，平滑肌细胞增生，血栓形成及血管腔狭窄，导致妊娠高血压的发生、发展 [1] 。李力等 [2] 发现，PIH患者除了血浆NO明显低于孕晚期正常孕妇血浆的NO外，子宫及胎盘组织中诱导型iNOS-mRNA窄线杂交信号强度也明显低于正常妊娠组，提示PIH患者无论血浆、子宫或胎盘，均存在着NO水平下降以及iNOS-mRNA转录强度的下降，使以iNOS-mRNA作模板的mNOS蛋白质翻译减少，iNOS合成降低，最终引发内源性NO合成降低，从而引起一系列物理学效应，证明NO与PIH的发生有明显关系。Darley-Usmur等认为NO与氧自由基(O ·2 )有拮抗作用，发现NO的减少能使NO和O ·2 平衡倾向于O ·2 进一步损伤内皮细胞而引起血管舒张功能异常 [3] ，另外Myatt等发现NO具有削弱胎儿胎盘循环中血管内皮素等缩血管物质作用 [4] 。NO是一种无机小分了，是左旋精氨酸(L-Arg)在一氧化氮合酶(iNOS)作用下生成的，可迅速与水、氧和机体中广泛存在中血管内皮素等缩血管物质作用 [4] 。NO是一种无机小分子，是左旋精氨酸(L-Arg)在一氧化氮合酶(iN-OS)作用下生成的，可迅速与水、氧和机体中广泛存在的超氧自由基反应，生成硝酸盐和亚硝酸盐。NO的生理作用是舒张血管平滑肌，抗凝血及抑制血小板聚集 [5] 。因此NO对血管内皮细胞的修复、补充内源性NO生成不足、对抗缩血管物质、纠正ET/NO平衡紊乱起到重要作用。动物实验和临床研究证实，短时间吸入低浓度(<100×10 -6 )NO是安全的[6] 。在实际应用中我们采用吸入低浓度NO气治疗了20例PIH患者，收到了明显的疗效，患者头痛、恶心、呕吐等症状缓解，其血ET水平明显下降，血NO水平明显上升，ET/NO比值由治疗前的1.87±0.47降至1.27±0.48，对比药物治疗组，PIH患者血ET、NO、ET/NO虽然也有明显变化，但疗效不如NO治疗组。
【参考文献】
1 Taylor RN，Varma M，Teng NH，et al.Women with preeclampsia have higher plasma endothelin levels than womens with normal pregnancies.Clin Endocrinol Metab，1990，71(6):1675-1677.
2 李力，陈竹钦，徐有奇，等.一氧化氮合成酶mRNA转录强度对妊高征的影响.中国实用妇科与产科杂志，1997，13:27-28.
3 Darley-Usmur V，Wiseman H，Halliwel B.FEBS Lett，1995，369:131-135.
4 MyatL，Brewer AS，Langdon G，et al.Ects of throboxane and endotheoin by nitric oxide in the human fetal-placental.Am J Obstet Gyneool，1992，166:224-230.
5 Moncada S，Pslmer，RMJ，Higgs EA.Phamaool Rev，1991，43:109-142.
6 Rossaint R，Falck K J，Lopcz F，et al.Inhaled nitric oxide for the adult respiratory distress syndrome.J N Med，1993，328(6):399.
(编辑:罗 彬)
作者单位:850003西藏拉萨，西藏军区总医院高山病实验研究中心, 百拇医药(彭华 陈强 汤述慧)