人B7.2(CD86)胞外区原核表达及其工程菌发酵培养的实验研究
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闫晓彩. 来宝长. 郑瑾. 马军. 韩俊宏. 王一理. 司履生.
B7.2(CD86).共刺激.融合蛋白.GST.
参见附件。
闫晓彩. 来宝长. 郑瑾. 马军. 韩俊宏. 王一理. 司履生.
西安交通大学医学院免疫病理研究室. 西安交通大学医学院免疫病理研究室 西安710061
【关键词】
B7.2(CD86). 共刺激. 融合蛋白. GST.
【发表年期页】
2002,1; 0
【摘要】
目的 利用原核系统表达人B7.2 (IgV +C)并对工程菌发酵培养条件进行优化。方法 用聚合酶链反应 (PCR)技术从B7.2cDNA全长中克隆B7.2 (IgV +C) ,将PCR产物克隆入表达载体 pGEX 4T 3从而得到重组体 pGEX 4T 3 /hB7.2 (IgV +C) ,SDS PAGE及Westernblot用于检测目的蛋白的表达 ,同时对目的蛋白诱导表达时间及诱导剂浓度进行优化 ,对重组质粒的遗传稳定性进行鉴定。结果 Westernblot结果显示相应分子质量 5 5kD处有hB7.2 (IgV+C)与GST融合蛋白的高效表达 ,表达量占菌体总蛋白的 3 0 %左右。对工程菌进行发酵培养研究的结果表明 ,所构建的重组质粒在工程菌
闫晓彩. 来宝长. 郑瑾. 马军. 韩俊宏. 王一理. 司履生.
西安交通大学医学院免疫病理研究室. 西安交通大学医学院免疫病理研究室 西安710061
【关键词】
B7.2(CD86). 共刺激. 融合蛋白. GST.
【发表年期页】
2002,1; 0
【摘要】
目的 利用原核系统表达人B7.2 (IgV +C)并对工程菌发酵培养条件进行优化。方法 用聚合酶链反应 (PCR)技术从B7.2cDNA全长中克隆B7.2 (IgV +C) ,将PCR产物克隆入表达载体 pGEX 4T 3从而得到重组体 pGEX 4T 3 /hB7.2 (IgV +C) ,SDS PAGE及Westernblot用于检测目的蛋白的表达 ,同时对目的蛋白诱导表达时间及诱导剂浓度进行优化 ,对重组质粒的遗传稳定性进行鉴定。结果 Westernblot结果显示相应分子质量 5 5kD处有hB7.2 (IgV+C)与GST融合蛋白的高效表达 ,表达量占菌体总蛋白的 3 0 %左右。对工程菌进行发酵培养研究的结果表明 ,所构建的重组质粒在工程菌
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