pH区带逆流色谱研究进展

    龚 燕

    3 1 郭 颖2 黄健光1 李总成1 孙丽华3

    1 (清华大学化学工程系, 北京100084) 2 (中国地质大学珠宝学院, 北京100083)

    3 (黑龙江辰能生物工程有限公司,哈尔滨150001)

    摘 要 pH区带逆流色谱是在逆流色谱基础上发展起来的一种新型制备型分离技术。利用物质解离常数和

    疏水性的不同进行分离,具有分离量大、分离效果好等优点,应用领域比较广泛;简单介绍了该技术的分离原

    理及分类,并对该技术在氨基酸衍生物、肽衍生物、染料、生物碱和异构体等分离纯化中的应用及其改进方向

    进行了较为全面的总结,展望了其发展前景。

    关键词 pH区带逆流色谱,分离机理,氨基酸,多肽,生物碱,分离,评述

    2002208203 收稿;2003202214 接受

    1 引 言

    逆流色谱(countercurrent chromatography ,CCC) 作为一种新型色谱技术,1971 年由日本学者Ito 提

    出1 。由于其自身的优点,得以迅速发展并在DNP 氨基酸、肽、嘌呤、吡啶、胰岛素、植物激素、海藻蛋

    白、血球细胞和病毒等的分离以及一些标准品的制备方面得到广泛应用2 。它依靠溶质在不相混溶两

    相间的不同溶解度实现分离,并利用变化的离心力场促进两相溶剂的有效混合分离和强化对固定相的

    保留,从而实现高效率的色谱分离。

    pH 区带逆流色谱(pH2zone2refining countercurrent chromatography) 3 由Ito 于1994 年首次提出,利用待

    分离有机酸碱的酸(碱) 解离常数及疏水性的不同进行分离。与普通逆流色谱相比,其突出特点是在溶

    剂体系的固定相中加入保留酸(或碱) ,同时在流动相中加入洗脱碱(或酸) ;不同物质洗脱出来时伴随着

    pH值的突变。该技术可以得到最小重叠的矩形峰,同时杂质被集中在峰的两侧,具有样品分离容量大、分离纯度和分离效率高等优点,目前已经成功用于多种混合物的分离,如氨基酸衍生物、肽衍生物、氧杂

    蒽染料、生物碱及立体异构体等。它继承了逆流色谱高效、固定相无污染等优点,同时具有制备量大和

    快速等特点,能够针对具体问题达到更优效果。

    2 分离原理简介[4 ,5 ]

    以分离碱性物质为例(见图1) 。与pH 突变相对应,保留碱在柱子前沿形成一个边界 ......