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编号:10793664
流动注射化学发光法测定尼莫地平
http://www.100md.com 《分析化学》 2004年第3期
     流动注射化学发光法测定尼莫地平

    赵亚娟 郎惠云

    3

    张秀军江元汝

    (西北大学化学系,西安710069) (西安建筑科技大学理学院,西安710055)

    摘 要 利用尼莫地平对Ce d 2Na2SO3 化学发光体系的抑制作用,建立了流动注射2化学发光法测定尼莫地

    平的新方法。化学发光强度与尼莫地平浓度在0. 5~90 mg/ L 范围内呈线性关系,线性范围为0. 5~10 mg/ L

    时, r = 0. 9990 ;线性范围为10~90 mg/ L 时, r = 0. 9968。回收率在98. 3 %~103. 2 %范围内;检出限为0.

    085 mg/ L 。

    关键词 尼莫地平,流动注射,化学发光

    2002212223 收稿;2003206203 接受

    1 引 言

    尼莫地平(nimodipine) 又名硝苯甲氧乙基异丙啶,属二氢吡啶类药物,是一种新的亲脂性很强的钙

    拮抗剂。它可选择性地扩张脑血管,明显而持久地增加脑血流量,并能抑制和解除血管痉挛所致的缺血

    性脑损伤,对血压的影响小,故临床上主要用于脑血管疾病的治疗1 ,如脑血管痉挛、蛛网膜下出血、脑

    血管灌注不足、中风和偏头疼等2 。近年来的研究表明,它还有保护式促进记忆的作用。其分析方法

    有高效液相色谱法3 、紫外分光光度法4 ,5 、气相色谱法6 及电化学方法7 ,8 等,而用化学发光法测定尚

    未见报道。本文利用尼莫地平对Ce d 2Na2SO3 化学发光体系的抑制作用,建立了流动注射2抑制化学发

    光法测定尼莫地平含量的新方法。该方法的优点是线性范围宽、简便、快速、灵敏度高、自动化程度高。

    用于实际样品的测定,结果良好。

    2 实验部分

    2. 1 仪器和试剂

    IFFL2D 型化学发光仪(西安瑞科设备有限公司) ;420Aplus 型酸度计(美国ORIN 公司) 。

    尼莫地平标准溶液(0. 100 g/ L) :称取尼莫地平标准品0. 0100 g ,用冰醋酸2硫酸溶液溶解并定容于

    100 mL 容量瓶;硫酸铈铵溶液(1. 6 ×10 - 3 mol/ L) :称取0. 2700 g 四水硫酸铈铵,用0. 5 mol/ L 硫酸溶

    液溶解并定容于250 mL 容量瓶;亚硫酸钠溶液(4. 0 ×10 - 3 mol/ L) :称取亚硫酸钠0. 2520 g ,用1. 0

    mol/ L 硫酸溶解并定容于500 mL 容量瓶,新鲜备制。醋酸2硫酸溶液:用冰醋酸和0. 5 mol/ L 硫酸以2∶

    1 ( V / V ) 混合而成。以上所用试剂均为分析纯,水为二次蒸馏水。

    2. 2 实验方法

    流动注射2化学发光仪器流路图见图1 ,将酸性亚硫酸钠溶液(4. 0 ×10 - 3 mol/ L) 与一定量的尼莫地

    平溶液分别通过b、c 通道混合后作为载流进入流通池F ;将酸性硫酸铈铵溶液(1. 6 ×10 - 3mol/ L) 经a 管

    道注入到上述载流中, 并进入16μL 的采样环内。溶液流经流通池F 的过程中由于扩散作用而发生化

    学反应,并产生一定的光强度Icl ,由计算机采样并处理。实验参数由仪器优化设定,光电倍增管工作电

    压为800 V。若试剂经a 、c 流通池F 时测得的峰高记为IO ,样品溶液经b 通道进入流通池F 时测得的

    峰高为IS ,二者的差值ΔI (ΔI = IO - IS) 与尼莫地平浓度呈线性关系,据此进行定量分析。

    3 结果与讨论

    3. 1 流动注射参数的设定

    3. 1. 1 采样时间和采样环体积对发光强度的影响 研究了采样时间对发光强度的影响,结果表明:随

    第32 卷

    2004 年3 月

    分析化学(FENXI HUAXUE) 研究简报

    Chinese Journal of Analytical Chemistry

    第3 期

    345~347

    图1 流动注射化学发光分析仪流程图

    Fig. 1 Schematic diagram of flow injection chemilumi2

    nescence analyzer

    a. 硫酸铈铵( Ce (NH4) 4 ( SO4) 4 solution ; b. 尼莫地平( ni2

    modipine solution) ; 亚硫酸钠(Na2SO3 solution) ; p. 蠕动泵

    (peristaltic pump) ; V. 采样阀(value) ; F. 流通池(flow cell) ;

    W. 废液(waster water) ; PMT. 光电倍增管(multiplier photo2

    tube) ; PC. 计算机(computer) 。

    着采样时间的增加,发光强度逐渐增强,8 s 时发光

    强度达到最大值。此后发光强度逐渐降低,故本实

    验选用采样时间为8 s 时。

    研究了10~40 mL 采样环体积对发光强度的影

    响。结果表明,随着采样环体积的增大,相对发光强

    度也随之增大,当采样环体积为16μL 时,发光强度

    达到最大值;随着采样环体积的进一步增加,发光强

    度又逐渐减弱,且出现二次发光,这可能是由于采样

    环体积增大造成溶液混合不均匀所致。故本实验选

    用采样环体积为16μL 。

    3. 1. 2 流速和反应管长度对发光信号的影响 在

    化学发光体系中,流速太慢会导致最大发光信号发

    生在进入流通池之前;流速太快会导致最大发光信

    号发生在进入流通池之后。两者都不能被光电倍增管完全检测。又由于本系统是一个快速发光反应,为避免溶液在进入流通池之前化学发光强度达到最大值,反应管长度尽可能短。综合考虑,本实验选用

    反应管长度为8 cm ,流速为4. 0 mL/ min ,泵转速70 r/ min。

    3. 2 溶液参数对发光强度的影响

    3. 2. 1 硫酸铈铵溶液的浓度和酸度对发光强度的影响 硫酸铈铵在酸性溶液中能够稳定存在,实验结

    果表明,当硫酸的浓度在0. 5~1. 0 mol/ L 之间时,发光信号最大,在0. 5 mol/ L 硫酸溶液中,反应有最

    大的发光强度和最高的信噪比。本实验选用0. 5mol/ L 硫酸作为硫酸铈铵的溶剂。研究了硫酸铈铵溶

    液的浓度对发光强度的影响。结果表明,当硫酸铈铵浓度为1. 6 ×10 - 3mol/ L 时,体系有最大的发光强

    度。实验所选用硫酸铈铵浓度为1. 6 ×10 - 3 mol/ L 。

    3. 2. 2 亚硫酸钠溶液的浓度和酸度对发光强度的影响 实验结果表明,当亚硫酸钠溶液中硫酸的浓

    度为1. 0mol/ L 时,发光强度有最大值,而且信噪比最大。在此溶液中,亚硫酸钠浓度为4. 0 ×10 - 3

    mol/ L 时发光强度有最大值。故本实验选用亚硫酸钠的浓度为4. 0 ×10 - 3 mol/ L ,且以1. 0 mol/ L 的硫

    酸溶液做溶剂。

    3. 3 校准曲线、精密度和检出限

    在最佳实验条件下,尼莫地平在0. 5~90 mg/ L 范围内发光信号呈良好的线性关系,为了提高测定

    的精密度,对校准曲线分段绘制,各段校准曲线的线性回归方程为:在0. 5~10 mg/ L 的浓度范围内,其

    线性回归方程为: y = - 97. 5 x + 7700 , r = 0. 9990 ,在10~90 mg/ L 的浓度范围内,其线性回归方程为:

    y = - 98. 0 x + 9200 , r = 0. 9968 。

    对0. 5 mg/ L 尼莫地平标准溶液进行11 次平行测定的RSD 为1. 8 %。根据IUPAC 建议,计算得

    出该方法检出限为0. 085 mg/ L 。

    3. 4 干扰实验

    在药物制剂中常加入赋形剂可能会给测定带来影响。本文选用不同的种类和浓度的赋形剂进行实

    验,检测常见赋形剂对尼莫地平测定的干扰情况。结果表明:当尼莫地平浓度为2. 5 mg/ L 时,在相对

    误差±5 %的范围内,100 倍的蔗糖、乳糖、糊精和淀粉,50 倍的半乳糖、葡萄糖、硬脂酸镁、滑石和明胶,20 倍的聚乙醇不产生干扰。

    3. 5 样品分析

    取尼莫地平10 片,研细,并称取相当于10 mg 尼莫地平的样品,用醋酸2硫酸( V / V = 2/ 1) 溶液溶

    解(若不溶,可水浴加热使其溶解) ,并置于100 mL 容量瓶中,稀释至刻度线,摇匀并过滤。精确量取滤

    液适量,用醋酸2硫酸( V / V = 2/ 1) 溶液逐级稀释,使最终浓度位于工作曲线的线性范围内,再按实验方

    法进行尼莫地平浓度的测定。同时进行回收实验:精确称取已知含量的样品粉末20 mg ,加入对照品

    10 mg ,按样品分析方法进行处理和测试,结果见表1 。

    6 4 3 分析化学第32 卷

    表1 尼莫地平片剂的测定结果( n = 5)

    Table 1 Determination results of nimodipine content in nimodipine samples ( n = 5)

    样品批号

    Sample

    标示量( mg/ 片)

    Nominal content

    (mg/ tablet)

    测得量( mg/ 片)

    Present method

    ( mg/ tablet)

    加入量( mg)

    Added

    ( mg)

    回收率( %)

    Recovery

    020101 20 18. 7 10. 0 101. 1

    010901 20 19. 3 10. 0 98. 3

    020720 20 21. 6 10. 0 103. 2

    3. 6 机理探讨

    在醋酸介质中,Ce d 在氧化亚硫酸钠的过程中有较强的发光现象产生,而加入尼莫地平之后,化学

    发光强度有所减弱,其减弱的程度与尼莫地平浓度在一定范围内成线性关系。其原因可能是在尼莫地

    平的结构中含有可被氧化的集团———烷基存在。当与Ce d 共存时,二者之间发生氧化2还原反应,生成

    了有机酸9 ,10 ,消耗了部分Ce d ,降低了Ce d 的浓度,影响了Ce d 2Na2SO3 发光体系的正常发光,导致

    发光强度降低。

    References

    1 Wang Rulong (王汝龙) , Yuan Zhengping (原正平) . Medication (药物) . 3rd ed. (第三版) , Beijing (北京) : Chemi2

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    4 Liu Meiling (刘美玲) . Chinese Journal of Medica A nalysis (药物分析) , 1990 , 10 (3) : 171~173

    5 Jiang Jianguo (江建国) , Du Zenghui (杜增辉) , Zhang Xiru (张西茹) . Journal of S henyang Medica University (沈阳

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    10 Zhang Zhixian (张志贤) , Zhang Ruihao (张瑞镐) . Quantitative A nalysis of Organic Functional Groups (有机官能团

    定量分析) . Beijing (北京) : Chemical Industry Press (化学工业出版社) , 1991 : 324~325

    Determination of Nimodipine by

    Flow Injection Chemiluminescence Method

    Zhao Yajuan1 , Lang Huiyun

    3 1 , Zhang Xiujun1 , Jiang Yuanru2

    1 ( Department of Chemist ry , Northwest University , Xi′an 710069)

    2 ( School of Science , Xi′an University of A rchitecture & Technology , Xi′an 710055 )

    Abstract Method for the determination of nimodipine , based on the inhibition of the chemiluminescence

    (CL) reaction between cerium d and sulphite , has been developed. The CL intensity is proportional to the

    concent ration of nimodipine in the range of 0. 5~10 mg/ L ( r = 0. 9990) and 10~90 mg/ L ( r = 0. 9968)

    . The recovery is 98. 3 %~103. 2 %. The detection limit is 0. 085 mg/ L and relative standard deviation is

    118 %.

    Keywords Nimodipine , flow injection , chemiluminescence

    (Received 23 December 2002 ; accepted 3 J une 2003)

    7 4 3 第3 期赵亚娟等:流动注射化学发光法测定尼莫地平, http://www.100md.com(赵亚娟 郎惠云 张秀军 江元汝)